肝硬化的定义、病因及流行病学

肝硬化是全球肝脏相关死亡的主要原因,最常见的原因是慢性乙型和丙型肝炎、酒精性肝病、非酒精性脂肪性肝病。近年研究显示,世界范围内,肝硬化死亡人数增加,但年龄标准化死亡率降低;失代偿期肝硬化的年龄标准化患病率显著增加。我国肝硬化患病人数、患病率、死亡人数和死亡率均有所增加,但是年龄标准化的患病率和死亡率均有所降低;主要病因仍为慢性乙型肝炎,但酒精性及非酒精性脂肪性肝病所致肝硬化比例也逐渐增加。

肝硬化的诊断、分期及治疗原则

近年来,随着对肝硬化的发病机制、病理生理、治疗和预后研究不断深入,国内外学者在诊断分期和治疗观念上有了很大变化。除了常用的代偿期和失代偿期二分法外,还可以根据腹水、食管胃静脉曲张出血及严重感染等表现分为五期。新的分期方法突出了不同阶段疾病的特点,为治疗提供了目标和依据。目前,病因治疗、针对关键发病机制和主要并发症的治疗,以及营养支持、运动指导及戒烟酒、改善口腔卫生等改善生活方式的综合治疗,是延缓疾病进展、改善预后的关键,而肝移植仍是治疗终末期肝硬化的最有效手段。

基线HBV DNA水平对代偿期乙型肝炎肝硬化患者抗病毒治疗后临床转归的影响

目的分析基线HBV DNA水平对代偿期乙型肝炎肝硬化患者抗病毒治疗后临床转归的影响。方法选取首都医科大学附属北京友谊医院肝病中心2005年-2015年代偿期乙型肝炎肝硬化患者106例,给予核苷和核苷酸类药物抗病毒治疗,对患者进行前瞻性随访观察3年。按治疗前HBV DNA水平将患者分为3组,即HBV DNA<105IU/ml组、105~107IU/ml组和>107IU/ml组。比较3组患者基线特征、抗病毒治疗疗效及肝脏相关终点事件(LREs)发生率。组间比较采用重复测量资料的方差分析或Friedman Test检验;计数资料组间比较采用χ~2检验。采用Kaplan-Meier法计算LREs发生率并绘制生存曲线,各组之间的比较采用log-rank对数秩检验。结果 3组患者在年龄、性别、HBeAg、生化指标、肝脏硬度及CTP评分上差异均无统计学意义(P值均>0.05)。HBV DNA水平随时间的变化趋势差异有统计学意义(F=8.35,P<0.05);3组间比较HBV DNA水平的变化差异也有统计学意义(F=13.95,P<0.05)。3组患者在治疗6个月时HBV DNA水平较基线都显著下降,其中HBV DNA<105IU/ml组和105~107IU/ml组患者实现中位HBV DNA低于检测限,而HBV DNA>107IU/ml组在治疗12个月后实现中位HBV DNA低于检测限。在治疗12个月及24个月时,3组HBV DNA阴转率差异无统计学意义(χ~2值分别为5.97、6.84,P值均>0.05),在治疗36个月时,3组HBV DNA阴转率分别为95.7%、88.0%和77.8%,差异有统计学意义(χ~2=12.75,P<0.05)。3组LREs发生率差异无统计学意义(P>0.05)。结论乙型肝炎肝硬化患者抗病毒治疗后HBV DNA水平显著下降,高水平复制的患者病毒学应答速度较慢,但基线HBV DNA水平对抗病毒治疗后3年内LREs的发生率无显著影响。

一项代偿期乙肝肝硬化研究的1年基线分析

目的分析恩替卡韦单药与拉米夫定联合阿德福韦酯两种治疗方案对代偿期乙型肝炎肝硬化疗效比较研究中入组1年时的患者基线数据特点。方法疗效比较研究的方案为对临床或病理诊断为代偿期乙肝肝硬化的患者进行随访,每3个月检测一次血常规、肝功能、肾功能、HBV DNA,每半年检测一次甲胎蛋白、凝血功能、腹部超声和肝脏弹性,比较两种治疗方案的疗效。结果至2013年8月,共入组通过临床诊断代偿期乙肝肝硬化患者382例,截至数据统计时可获得240例患者的随访资料。随访的中位数时间为6个月。恩替卡韦单药治疗患者为200例(83.3%),拉米夫定联合阿德福韦治疗组为40例(16.7%)。两组在患者年龄、性别、HBeAg及HBV DNA水平分布方面具有可比性。所有入组患者中男性176例(73.3%),女性64例(26.7%),平均年龄为(44.6±11.6)岁,HBeAg阳性占58%,HBV DNA的中位数为5.94(4.33,6.87)log10 IU/ml。上述特点与经典的4 006研究中肝穿证实的肝硬化人群特征相似。结论本研究入组患者1年时,通过临床诊断的代偿期乙肝肝硬化患者的基线特征与既往研究中肝穿证实的代偿期乙肝肝硬化患者基线特征相似,恩替卡韦单药组与拉米夫定联合阿德福韦联合用药组偏组明显。

脾脏硬化性血管瘤样结节性转化的CT、MRI表现

目的探讨脾脏硬化性血管瘤样结节性转化(sclerosing angiomatoid nodular transformation,SANT)的影像学特征,提高对脾脏SANT的术前诊断水平。方法回顾性收集并分析经手术病理证实的7例脾脏SANT患者的临床及影像学资料,分析患者临床特点、病理基础及CT和(或)磁共振成像(magnetic resonance imaging,MRI)的特征表现。结果 7例脾脏SANT患者中女性4例,男性3例,患者年龄28~62岁,中位年龄50岁。病理学特征为纤维硬化间质中形成多个血管瘤样结节。病灶在MRI的T2-weighted imaging(T2WI)及增强扫描动脉期表现为"轮辐征",增强扫描5min延迟期中心区域见星芒状延迟强化。病灶在CT上表现为动脉期周边结节样强化及后期渐进性强化,强化特点与MRI增强类似,但因延迟时间不够,中心纤维延迟强化的特点不明显。结论脾脏SANT的典型MRI征象包括在T2WI及动脉期的"轮辐征",以及延迟期的中心星芒状纤维组织延迟强化。MRI对脾脏SANT基本征象的显示优于CT。

肝纤维化和肝硬化逆转的血清学评价

肝纤维化/肝硬化是慢性肝脏疾病的共同病理过程。大量研究已经证实,在经过有效的治疗后,肝纤维化或肝硬化可以得到一定程度的逆转。如何应用简便的血清学指标判断肝纤维化/肝硬化逆转是目前的研究热点,总结了可能用于判断肝纤维化/肝硬化逆转的血清学指标的研究和应用现状。

基线血小板水平可预测代偿期乙型肝炎肝硬化患者抗病毒治疗后的临床转归

目的探索代偿期乙型肝炎肝硬化患者基线指标中可预测肝脏相关终点事件(liver related events,LRE)的危险因素。方法在前瞻性随访的代偿期乙型肝炎肝硬化患者队列中,根据是否发生LRE将患者分为发生LRE组和未发生LRE组,比较两组患者基线特征,并分析基线指标中可预测LRE的危险因素。结果共入组106例代偿期乙型肝炎肝硬化患者并随访3年,发生终点事件者18例(17.0%)。发生LRE组的基线血小板水平低于未发生LRE组(P<0.05)。两组患者治疗过程中可见HBV DNA均显著下降。抗病毒治疗后两组血小板水平均增加,但未发生LRE组增加程度高于已发生LRE组(P<0.05)。Cox比例风险模型分析显示,基线血小板水平是预测LRE的独立危险因素(P<0.01)。结论基线血小板水平是预测代偿期乙型肝炎肝硬化患者发生肝脏相关终点事件的独立危险因素。

ALT水平对乙型肝炎肝硬化患者肝脏硬度值的影响

目的探讨ALT水平对乙型肝炎肝硬化肝脏硬度值(LSM)分布的影响。方法选取2012年1月-2015年5月在北京友谊医院及各分中心经肝穿刺诊断为乙型肝炎肝硬化的初治患者,收集入组患者的人口学特征、血常规、生化、HBV DNA、AFP、LSM、腹部超声和肝穿刺资料。比较乙型肝炎肝硬化患者中不同ALT水平的LSM分布特征。组间比较采用单因素方差分析或Kruskal-Wallis H检验,计数资料组间比较采用χ~2检验,相关性分析采用Pearson相关和偏相关。结果共入组104例患者,根据ALT水平分成3组[≤2倍正常值上限(ULN)、2~5 ULN和≥5 ULN],3组在性别构成比、BMI、HBeAg状态、HBV DNA水平、Alb水平、PLT方面差异均无统计学意义(P值均>0.05)。3组患者的LSM中位值分别为15.4、18.8及29.9 k Pa,LSM随着ALT升高而升高,3组间差异有统计学意义(χ~2=10.07,P<0.05)。校正年龄后乙型肝炎肝硬化患者的LSM与ALT仍呈正相关(r=0.220,95%可信区间:0.101~0.468,P<0.05)。结论在乙型肝炎肝硬化患者中,LSM随着ALT升高而升高,患者年龄在不同ALT水平组间有差异,而校正年龄因素后,LSM与ALT之间仍存在正相关关系。

慢性乙型肝炎及其相关肝硬化抗病毒治疗：单药还是联合？

目前慢性乙型肝炎的抗病毒治疗应答率仍有待提高,不少学者开始尝试联合用药,包括核苷和核苷酸类药物之间的联用和干扰素与核苷和核苷酸类药物的联用。回顾近期国内外经验发现,初治慢性乙型肝炎患者可首选强效低耐药核苷和核苷酸类药物单药治疗,普通核苷和核苷酸类药物耐药患者可换用替诺福韦。高病毒载量及HBe Ag阳性的患者,推荐核苷和核苷酸类药物的联合治疗。既往经治甚至多重耐药的患者可以选择恩替卡韦与替诺福韦联用。核苷和核苷酸类药物经治、期待HBe Ag和HBs Ag血清学转换的患者,可以考虑加用长效干扰素。

转化生长因子β对肝星状细胞活化的调控作用

在肝纤维化过程中,TGFβ被认为是引起肝星状细胞(HSC)活化及细胞外基质产生的重要调控因子,因此,靶向TGFβ引起的HSC活化和肝纤维化的治疗策略值得深入研究。介绍了近几年来有关TGFβ对HSC的活化作用及其相关调控、靶向TGFβ活化HSC的治疗策略,以期为肝纤维化的临床治疗提供理论依据与新思路。

医学科学学位研究生科研能力培养存在的问题

提高科研能力是医学科学学位研究生培养的关键,本文就目前医学科学学位研究生科研能力培养中存在的问题进行了探讨,并结合本科室的具体实践提出了可能的解决办法。

Lipidoid作为新型脂质载体对肝脏非实质细胞的靶向作用实验研究

目的探讨新型脂质载体Lipidoid对肝脏的细胞靶向效率,为抗肝纤维化治疗提供一定实验室依据。方法C57BL/6小鼠分别给予CCl_4灌胃建立肝纤维化模型,同时给予Lipidoid、Lipidoid/siRNA-TIMP-1尾静脉注射,通过Masson染色观察各组小鼠肝脏纤维化情况,并通过实时荧光定量PCR和蛋白免疫印迹检测Lipidoid/siRNA-TIMP-1对TIMP-1表达水平的影响;通过对小鼠尾静脉注射绿色荧光(GFP)标记的Lipidoid-GFP,取其肝组织进行冰冻切片分别进行Desmin及F4/80染色,评价Lipidoid-GFP对肝脏非实质细胞的靶向作用;通过对小鼠分离的原代肝星状细胞SW-HSC、小鼠巨噬细胞系(RAW264.7)转染Lipidoid-GFP,流式细胞仪分别检测上述两种细胞中GFP荧光强度。结果通过对肝组织进行Masson染色发现,在CCl_4诱导的肝纤维化小鼠模型中,给予Lipidoid/siRNA-TIMP-1治疗可显著降低胶原纤维的沉积;实时荧光定量PCR和蛋白免疫印迹结果显示Lipidoid/siRNA-TIMP-1可以显著抑制TIMP-1基因的表达;肝组织冰冻切片Desmin及F4/80染色结果显示,Lipidoid-GFP主要被肝脏肝星状细胞和Kuffer所捕获,肝星状细胞、Kuffer细胞捕获Lipidoid-GFP的阳性率分别为13.4%、43.8%;原代肝星状细胞SW-HSC、小鼠巨噬细胞系(RAW264.7)转染Lipidoid-GFP后经流式细胞仪检测,结果显示转染Lipidoid-GFP的SW-HSC及RAW264.7GFP阳性率分别为66.9%、75.8%,均显著高于对照组。结论小鼠实验结果表明,Lipidoid/siRNA-TIMP-1可有效降低肝脏TIMP-1水平,发挥抗肝纤维化作用。Lipidoid作为一种新型脂质载体可有效感染肝脏非实质细胞(肝星状细胞和Kuffer细胞)。

2017年原发性硬化性胆管炎研究进展

原发性硬化性胆管炎（primary sclerosing cholangitis,PSC）是一种少见的慢性胆汁淤积性肝脏疾病。其典型的病理学改变为胆管周围纤维化而呈洋葱皮样,典型的影像学改变为肝内和（或）肝外胆管狭窄与扩张相间而呈串珠状。2017年,国内外在本病的流行病学、发病机制、诊断、治疗和预后等方面均取得一定进展,本文简要介绍如下。

非酒精性脂肪性肝炎小鼠肝组织中脂蛋白脂肪酶及其相关调控因子的表达及二乙基二硫代氨基甲酸对其的调控作用

目的探讨脂蛋白脂肪酶(LPL)及其相关调控因子在非酒精性脂肪性肝炎(NASH)小鼠肝组织中的变化和二乙基二硫代氨基甲酸(DDC)对其的调控作用。方法将15只雄性C57BL/6小鼠按照随机数字表法分为3组,每组5只。对照组给予普通饲料喂养;模型组给予胆碱缺乏的氨基酸(CDAA)饲料喂养,建立NASH模型;治疗组在采用高脂CDAA饲料喂养的同时给予DDC灌胃治疗。用Real-time PCR方法检测NASH小鼠肝组织中LPL及其活性相关调节因子的表达变化;探讨DDC对LPL及其活性相关调节因子的调控作用。结果模型组小鼠肝组织中LPL基因表达为3.527±1.389,显著高于对照组(1.233±0.887),LPL酶活性的负性调控因子血管生成素样蛋白ANGPTL3、ANGPTL4及载脂蛋白apoC-Ⅰ、apoC-Ⅲ的表达分别为0.060±0.045、0.396±0.203、0.292±0.159、0.145±0.058,均显著低于对照组(1.126±0.650、1.051±0.373、1.016±0.205、1.141±0.751),差异均有统计学意义(P<0.05)。治疗组小鼠肝组织中LPL基因表达为0.597±0.111,显著低于模型组(1.030±0.288),ANGPTL3、ANGPTL4、apoC-Ⅰ表达分别为1.284±0.181、2.040±0.602、1.514±0.369,均显著高于模型组(1.006±0.119、0.909±0.088、0.969±0.124),差异均有统计学意义(P<0.05)。结论NASH小鼠肝组织中LPL表达升高,LPL酶活性抑制因子表达降低;DDC抑制LPL基因表达,并上调LPL酶活性的负性调控因子。

两种不同造模方法形成的酒精性肝病小鼠模型比较

目的明确两种不同造模方法对酒精性肝病模型小鼠的肝脏脂变、炎症及铁沉积的影响。方法分别采用酒精液体饮食喂养C57BL/6小鼠10 d和8周,分为10 d对照组(对照饮食)、10 d模型组(酒精液体饮食)、8周对照组(对照饮食)、8周模型组(酒精液体饮食),每组10只。造模结束后留取各组小鼠血清及肝脏组织检测。采用苏木精-伊红、油红O、普鲁士蓝染色分别观察小鼠肝脏炎症、脂变、铁沉积情况。依据相应试剂盒说明书检测血清中肝功能生化指标[天冬氨酸氨基转移酶(AST)和丙氨酸氨基转移酶(ALT)]、脂质相关生化指标[血清甘油三脂和总胆固醇]、铁代谢相关生化指标[血清铁调素、血清铁及总铁结合力(TIBC)、转铁蛋白饱和度(TS)]。采用Real-time PCR(qPCR)检测肝脏炎症相关基因IL-1β、IL-10以及铁代谢相关基因HAMP的表达。结果苏木精-伊红染色显示10 d和8周模型组仅少量炎症细胞浸润;油红O染色显示10 d及8周模型组较对照组均出现明显脂变;普鲁士蓝染色显示10 d及8周模型组较对照组均无明显铁沉积。10 d模型组的血清ALT、AST水平以及IL-1β表达均较10 d对照组升高,差异均有统计学意义(P<0.05),两组间IL-10表达差异无统计学意义(P>0.05)。8周模型组血清ALT、AST水平以及IL-1β、IL-10表达与8周对照组比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。10 d模型组甘油三酯、总胆固醇水平均较10 d对照组升高,差异均有统计学意义(P<0.05);8周模型组甘油三酯、总胆固醇与对照组比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。两组模型中血清铁均较对照组均有一定上升趋势,但差异均无统计学意义(P>0.05)。10 d模型组与10 d对照组TS水平比较,差异无统计学意义(P>0.05);8周模型组TS水平较8周对照组升高,差异有统计学意义(P<0.05)。10 d及8周模型组的TIBC水平与对照组比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。10 d模型组与10 d对照组血清铁调素水平比较,差异无统计学意义(P>0.05);8周模型组的血清铁调素水平较8周对照组降低,差异有统计学意义(P<0.05)。肝脏HAMP基因表达在10 d和8周模型组均较对照组降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论10 d及8周酒精喂养均能建立酒精性脂肪肝模型,均能引起肝脏轻度炎症,但肝脏均无明显铁沉积,可能需要延长造模时间或额外铁负荷才能建立酒精肝铁过载模型。

转铁蛋白受体-2在铁稳态中的作用研究进展

铁是人体内非常重要的元素,不仅参与细胞构成,还广泛参与重要的生命代谢过程.体内铁稳态的维持对正常机体生长发育和健康发挥着重要作用.铁调素(hepcidin)是维持铁稳态的重要分子,hepcidin水平受许多因素的调节,近年来有研究发现转铁蛋白受体-2(transferrin receptor 2,TFR2)参与了多条hepcidin调节通路,进而调节全身铁代谢.本文就TFR2在铁稳态中的作用相关研究进展作一综述.

肝纤维化3D共培养体外模型的研究进展

肝纤维化是慢性肝病的晚期阶段,最终可能导致肝硬化、肝功能衰竭甚至肝细胞癌。肝纤维化是细胞外基质(ECM)在肝脏过度沉积和异常分布的病理生理过程。肝星状细胞(HSC)活化是肝纤维化的核心事件,其被激活并分化为肌成纤维细胞,可以分泌大量的细胞外基质。肝脏巨噬细胞和其他免疫细胞的参与以及各种炎症因子和促纤维化因子的共同作用决定了肝纤维化进程的复杂性。尽管目前已有各种病因诱导的肝纤维化动物模型用于研究,但是依然缺乏有效的体外模型来深入探究肝纤维化发病机制及药物研发。因此,迫切需要开发一种更接近在体的肝纤维化体外模型,作为了解疾病和筛选新药的有效手段。本文将对近年来发展起来的肝纤维化3D共培养体外模型作一概述。

脂滴包被蛋白在非酒精性脂肪性肝病小鼠肝组织中的表达谱及瘦素基因敲除对其的影响

目的探讨不同饮食诱导的非酒精性脂肪肝病(NAFLD)小鼠肝组织中脂滴包被蛋白(Plin)家族的表达谱及瘦素基因敲除对其的影响。方法实验选用8周龄雄性C57BL/6小鼠53只,按照随机数字表法分组:CDAA对照组和模型组(9周组和15周组)、WD对照组和模型组(2周组、6周组和30周组),除CDAA9周对照组为5只,其余每组6只。选用4周龄雄性ob/ob小鼠12只,按照随机数字表法分组:对照组和模型组,每组6只。对照组给予正常饮食喂养;分别采用胆碱缺乏、L-氨基酸替代蛋白饲料(CDAA)和西方饮食(WD)诱导建立野生型C57BL/6小鼠NAFLD模型;采用WD饮食诱导建立瘦素基因敲除小鼠(ob/ob)NAFLD模型。实时荧光定量PCR法检测肝组织中Plin 2,Plin 3,Plin 4,Plin 5 mRNA的表达,比较不同组之间的差异及瘦素敲除对其的影响。结果正常野生型C57BL/6小鼠的肝组织中可检测出Plin 2,Plin 3,Plin 4,Plin 5四种亚型mRNA的表达;其中Plin 2是主要的亚型,其次为Plin 3、Plin 5,Plin 4的表达量最低。在CDAA饮食诱导的NAFLD模型中,Plin 2表达无显著变化;Plin 3表达在造模15周降低(P<0.05);Plin 4表达在造模9周和15周均升高(P<0.05);Plin 5表达在造模9周和15周均降低(P<0.05)。在WD饮食诱导的NAFLD模型中,野生型小鼠肝组织中Plin 2表达在造模30周增加(P<0.05);Plin 3、5表达无显著变化;Plin 4表达在造模2周、6周和30周均升高(P<0.05)。与野生型小鼠不同,在WD饮食诱导的(ob/ob)小鼠NAFLD模型中,肝脏中Plin 2、Plin 3、Plin 5表达降低(P<0.05);而Plin 4表达无显著变化。结论Plins基因表达谱在不同饮食诱导的NAFLD小鼠肝组织中存在显著差异;瘦素基因敲除抑制NAFLD小鼠肝组织中Plins基因的表达。

脂蛋白脂肪酶与非酒精性脂肪性肝病

非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)通常与代谢风险因素有关,包括肥胖、血脂异常和糖尿病等。脂蛋白脂肪酶(LPL)是调控血清中甘油三酯水平的关键酶,与上述风险事件的发生密切相关,提示LPL在NAFLD中发挥重要作用。

铁调素在CCl4诱导的小鼠肝纤维化模型中的动态变化

目的研究铁调素(hepcidin)在CCl4诱导的小鼠肝纤维化中的动态变化。方法 C57BL/6小鼠给予CCl4灌胃建立肝纤维化模型,通过HE和Masson染色验证小鼠肝损伤及纤维化程度,并通过普鲁士蓝染色检测在肝纤维化进展过程中肝脏铁沉积情况;通过两步法胶原酶原位灌注与密度梯度离心分离肝脏原代肝细胞、肝星状细胞、Kupffer细胞;通过实时荧光定量PCR检测肝纤维化进展过程中hepcidin和肿瘤坏死因子(TNF)α、白细胞介素(IL)6、IL-1β的表达水平。计量资料两组间比较采用t检验。结果通过对肝组织进行HE和Masson染色发现,肝纤维化程度随造模时间的延长而逐渐加重,停止造模后肝纤维化出现自发性逆转;普鲁士蓝染色提示,随着造模时间的延长,肝脏铁沉积逐渐增加,造模4周时肝脏铁沉积面积较前增加,与正常对照组相比差异有统计学意义(t=4.772,P<0.05),但在造模6周时无明显增加,仍高于正常对照,差异有统计学意义(t=10.32,P<0.05);停止造模的自发逆转过程中铁沉积又出现下降;通过实时荧光定量PCR检测发现,肝脏中TNFα、IL-1β、IL-6在CCl4诱导的小鼠肝纤维化模型中持续增高,造模6周时达峰值,与正常对照组相比差异有统计学意义(t值分别为4.322、9.707、5.678,P值均<0.05);肝脏hepcidin在此纤维化模型中表达早期升高,造模4周时已达峰值,与正常组相比差异有统计学意义(t=2.590,P<0.05),但在自发逆转过程中表达降低,峰值早于炎症因子的表达。结论肝脏中铁沉积在CCl4诱导的小鼠肝纤维化进展过程中逐渐增加;hepcidin的表达在肝纤维化进展过程中逐渐升高,与炎症因子的表达相关。