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基于LCK募集和活化的嵌合抗原受体T细胞的结构优化及其功能研究
1
作者
邹琳
陈思吟
+1 位作者
杜丽
陶崑
《免疫学杂志》
CAS
CSCD
2024年第1期33-38,共6页
目的 通过对二代嵌合抗原受体(CAR)进行淋巴细胞特异蛋白酪氨酸激酶(LCK)结构改造,探讨能否增强二代CD137 CAR-T细胞的活化水平及杀伤肿瘤细胞效率,为制备新型二代CAR-T细胞奠定基础。方法 利用基因工程技术,构建靶向人表皮生长因子受体...
目的 通过对二代嵌合抗原受体(CAR)进行淋巴细胞特异蛋白酪氨酸激酶(LCK)结构改造,探讨能否增强二代CD137 CAR-T细胞的活化水平及杀伤肿瘤细胞效率,为制备新型二代CAR-T细胞奠定基础。方法 利用基因工程技术,构建靶向人表皮生长因子受体-2(HER2)的CD137-LCK2 CAR和CD137-PYAP2 CAR的慢病毒载体,经慢病毒包装、感染活化T细胞后制备出CD137-LCK2和CD137-PYAP2 CAR-T细胞。采用流式细胞术、酶联免疫吸附实验、细胞毒性实验分别检测新构建的CAR-T细胞在活化分子CD137的表达水平、表型分布、分泌的细胞因子水平及对表达HER2的肿瘤细胞的杀伤效率。结果相较于二代CD137 CAR-T细胞,经过结构改造的靶向HER2的CD137-LCK2和CD137-PYAP2 CAR-T细胞能够上调活化分子CD137的表达、增加细胞因子IFN-γ的分泌、增强对靶细胞的杀伤能力,且均有统计学差异;同时能够维持在记忆状态、受抗原刺激后可迅速活化增殖分化。结论 靶向HER2的CD137-LCK2和CD137-PYAP2 CAR-T细胞有望比二代CD137 CAR-T细胞能更有效活化并发挥抗肿瘤效应。
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关键词
嵌合抗原受体T细胞
淋巴细胞特异性蛋白酪氨酸激酶
细胞毒性
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职称材料
谷氨酰胺缺乏诱导CD8^(+)T细胞铁死亡促进肿瘤生长
被引量:
1
2
作者
张龙
李罗
+4 位作者
申美莹
韩晓建
阎敏
陈思吟
金艾顺
《免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2023年第10期829-838,共10页
目的探究谷氨酰胺(glutamine,Gln)对CD8^(+)T细胞抗肿瘤免疫反应的影响及机制。方法TCGA数据库分析肿瘤Gln代谢与浸润CD8^(+)T细胞数量及功能的关系。利用CRISPR/Cas9敲低MC38细胞GLS表达,构建小鼠肿瘤模型。流式细胞术检测肿瘤增殖和凋...
目的探究谷氨酰胺(glutamine,Gln)对CD8^(+)T细胞抗肿瘤免疫反应的影响及机制。方法TCGA数据库分析肿瘤Gln代谢与浸润CD8^(+)T细胞数量及功能的关系。利用CRISPR/Cas9敲低MC38细胞GLS表达,构建小鼠肿瘤模型。流式细胞术检测肿瘤增殖和凋亡,分析肿瘤浸润免疫细胞数量和功能。用Gln缺乏的培养基、完全培养基或添加GSH、RSL3的培养基分别处理CD8^(+)T细胞,检测GSH含量,细胞凋亡,GPX4和Lipid-ROS及效应功能蛋白表达,并进行RNA-seq分析。结果肿瘤Gln代谢与肿瘤浸润CD8^(+)T细胞数量和功能负相关。敲低MC38细胞GLS表达抑制了C57BL/6肿瘤的生长及Ki67的表达,促进了Caspase3表达,提高了肿瘤浸润免疫细胞的数量,抑制了肿瘤浸润CD8^(+)T细胞PD-1、TIM-3和LAG-3表达,并提高了CD8^(+)T细胞CD137、CD107a、IFN-γ及TNF-α表达。RNA-seq结果显示,Gln缺乏后CD8^(+)T细胞铁死亡相关基因TFRC、HMOX1、CYBB、SLC7A11表达上调。Gln缺乏后CD8^(+)T细胞死亡增多、CD137、CD107a、IFN-γ、GSH和GPX4表达下调,Lipid-ROS表达上调;补充GSH后CD8^(+)T细胞GPX4上调,Lipid-ROS下调,CD8^(+)T细胞分泌的IFN-γ增多。结论Gln缺乏诱导CD8^(+)T细胞铁死亡抑制其效应功能。
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关键词
谷氨酰胺
CD8^(+)T细胞
铁死亡
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职称材料
T细胞免疫治疗实体肿瘤的临床试验疗效分析
被引量:
1
3
作者
母松
李子林
金艾顺
《国际免疫学杂志》
CAS
2021年第1期51-58,共8页
过继性T细胞治疗(adoptive cell transfer therapy,ACT)是以肿瘤浸润淋巴细胞(tumor infiltrating lymphocyte,TIL)、基因工程编辑的T细胞受体T细胞(T cell receptor engineered T cells,TCR-T)和嵌合抗原受体T细胞(chimeric antibody r...
过继性T细胞治疗(adoptive cell transfer therapy,ACT)是以肿瘤浸润淋巴细胞(tumor infiltrating lymphocyte,TIL)、基因工程编辑的T细胞受体T细胞(T cell receptor engineered T cells,TCR-T)和嵌合抗原受体T细胞(chimeric antibody receptor engineered T cell,CAR-T)为主的特异性细胞免疫治疗手段。目前TIL和TCR-T疗法,尤其是TIL和TCR-T联合其他方案如白细胞介素(interleukin,IL )-2、程序性死亡受体1(programmed death-1,PD-1)抗体、放疗等在部分晚期实体肿瘤患者的临床试验中取得显著疗效,但相关研究尚处于临床前研究阶段,现就TIL和TCR-T疗法治疗实体肿瘤的临床疗效及常见不良反应的研究进展做一综述。
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关键词
T细胞免疫疗法
实体肿瘤
临床疗效
不良反应
原文传递
题名
基于LCK募集和活化的嵌合抗原受体T细胞的结构优化及其功能研究
1
作者
邹琳
陈思吟
杜丽
陶崑
机构
重庆
医科大学
基础
医学院
免疫
学教研室
肿瘤免疫基础与转化研究重庆市重点实验室
重庆
医科大学附属第一医院临床分子医学检测中心
出处
《免疫学杂志》
CAS
CSCD
2024年第1期33-38,共6页
文摘
目的 通过对二代嵌合抗原受体(CAR)进行淋巴细胞特异蛋白酪氨酸激酶(LCK)结构改造,探讨能否增强二代CD137 CAR-T细胞的活化水平及杀伤肿瘤细胞效率,为制备新型二代CAR-T细胞奠定基础。方法 利用基因工程技术,构建靶向人表皮生长因子受体-2(HER2)的CD137-LCK2 CAR和CD137-PYAP2 CAR的慢病毒载体,经慢病毒包装、感染活化T细胞后制备出CD137-LCK2和CD137-PYAP2 CAR-T细胞。采用流式细胞术、酶联免疫吸附实验、细胞毒性实验分别检测新构建的CAR-T细胞在活化分子CD137的表达水平、表型分布、分泌的细胞因子水平及对表达HER2的肿瘤细胞的杀伤效率。结果相较于二代CD137 CAR-T细胞,经过结构改造的靶向HER2的CD137-LCK2和CD137-PYAP2 CAR-T细胞能够上调活化分子CD137的表达、增加细胞因子IFN-γ的分泌、增强对靶细胞的杀伤能力,且均有统计学差异;同时能够维持在记忆状态、受抗原刺激后可迅速活化增殖分化。结论 靶向HER2的CD137-LCK2和CD137-PYAP2 CAR-T细胞有望比二代CD137 CAR-T细胞能更有效活化并发挥抗肿瘤效应。
关键词
嵌合抗原受体T细胞
淋巴细胞特异性蛋白酪氨酸激酶
细胞毒性
Keywords
Chimeric antigen receptor T cell
Lymphocyte-specific protein tyrosine kinase
Cytotoxicity
分类号
R392 [医药卫生—免疫学]
下载PDF
职称材料
题名
谷氨酰胺缺乏诱导CD8^(+)T细胞铁死亡促进肿瘤生长
被引量:
1
2
作者
张龙
李罗
申美莹
韩晓建
阎敏
陈思吟
金艾顺
机构
重庆
医科大学
基础
医学院
免疫
学教研室
肿瘤免疫基础与转化研究重庆市重点实验室
重庆
医科大学附属第一医院乳腺甲状腺外科
出处
《免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2023年第10期829-838,共10页
基金
国家自然科学基金(82271879)
文摘
目的探究谷氨酰胺(glutamine,Gln)对CD8^(+)T细胞抗肿瘤免疫反应的影响及机制。方法TCGA数据库分析肿瘤Gln代谢与浸润CD8^(+)T细胞数量及功能的关系。利用CRISPR/Cas9敲低MC38细胞GLS表达,构建小鼠肿瘤模型。流式细胞术检测肿瘤增殖和凋亡,分析肿瘤浸润免疫细胞数量和功能。用Gln缺乏的培养基、完全培养基或添加GSH、RSL3的培养基分别处理CD8^(+)T细胞,检测GSH含量,细胞凋亡,GPX4和Lipid-ROS及效应功能蛋白表达,并进行RNA-seq分析。结果肿瘤Gln代谢与肿瘤浸润CD8^(+)T细胞数量和功能负相关。敲低MC38细胞GLS表达抑制了C57BL/6肿瘤的生长及Ki67的表达,促进了Caspase3表达,提高了肿瘤浸润免疫细胞的数量,抑制了肿瘤浸润CD8^(+)T细胞PD-1、TIM-3和LAG-3表达,并提高了CD8^(+)T细胞CD137、CD107a、IFN-γ及TNF-α表达。RNA-seq结果显示,Gln缺乏后CD8^(+)T细胞铁死亡相关基因TFRC、HMOX1、CYBB、SLC7A11表达上调。Gln缺乏后CD8^(+)T细胞死亡增多、CD137、CD107a、IFN-γ、GSH和GPX4表达下调,Lipid-ROS表达上调;补充GSH后CD8^(+)T细胞GPX4上调,Lipid-ROS下调,CD8^(+)T细胞分泌的IFN-γ增多。结论Gln缺乏诱导CD8^(+)T细胞铁死亡抑制其效应功能。
关键词
谷氨酰胺
CD8^(+)T细胞
铁死亡
Keywords
Glutamine
CD8^(+)T cells
Ferroptosis
分类号
R392 [医药卫生—免疫学]
下载PDF
职称材料
题名
T细胞免疫治疗实体肿瘤的临床试验疗效分析
被引量:
1
3
作者
母松
李子林
金艾顺
机构
重庆
医科大学
基础
医学院
免疫
学教研室
重庆
医科大学
基础
医学院
肿瘤免疫基础与转化研究重庆市重点实验室
出处
《国际免疫学杂志》
CAS
2021年第1期51-58,共8页
基金
国家自然科学基金(81872329)。
文摘
过继性T细胞治疗(adoptive cell transfer therapy,ACT)是以肿瘤浸润淋巴细胞(tumor infiltrating lymphocyte,TIL)、基因工程编辑的T细胞受体T细胞(T cell receptor engineered T cells,TCR-T)和嵌合抗原受体T细胞(chimeric antibody receptor engineered T cell,CAR-T)为主的特异性细胞免疫治疗手段。目前TIL和TCR-T疗法,尤其是TIL和TCR-T联合其他方案如白细胞介素(interleukin,IL )-2、程序性死亡受体1(programmed death-1,PD-1)抗体、放疗等在部分晚期实体肿瘤患者的临床试验中取得显著疗效,但相关研究尚处于临床前研究阶段,现就TIL和TCR-T疗法治疗实体肿瘤的临床疗效及常见不良反应的研究进展做一综述。
关键词
T细胞免疫疗法
实体肿瘤
临床疗效
不良反应
Keywords
T cell immunotherapy
Solid tumor
Clinical efficacy
Adverse reactions
分类号
R730.51 [医药卫生—肿瘤]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
基于LCK募集和活化的嵌合抗原受体T细胞的结构优化及其功能研究
邹琳
陈思吟
杜丽
陶崑
《免疫学杂志》
CAS
CSCD
2024
0
下载PDF
职称材料
2
谷氨酰胺缺乏诱导CD8^(+)T细胞铁死亡促进肿瘤生长
张龙
李罗
申美莹
韩晓建
阎敏
陈思吟
金艾顺
《免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2023
1
下载PDF
职称材料
3
T细胞免疫治疗实体肿瘤的临床试验疗效分析
母松
李子林
金艾顺
《国际免疫学杂志》
CAS
2021
1
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