嵌合抗原受体T细胞治疗非肿瘤疾病的研究进展

继2017年世界上第一款嵌合抗原受体T(chimeric antigen receptor T,CAR-T)细胞免疫疗法产品被美国食品药品监督管理局(food and drug administration,FDA)批准上市之后,人们正式迎来了CAR-T细胞疗法的新纪元[1]。作为首个含有基因工程成分的免疫疗法,CAR-T细胞免疫疗法具有亲和力高,T细胞受体(T cell receptor,TCR)非依赖性和主要组织相容性复合体(major histocompatibility complex,MHC)非限制等特点,在白血病、非霍奇金淋巴瘤等恶性肿瘤的治疗中凸显出巨大优势。虽然癌症是CAR-T细胞免疫疗法发展中最常见的靶向适应证,但随着基因编辑和细胞制造等技术的快速发展,CAR-T免疫疗法的应用被逐渐向治疗艾滋病、自身免疫性疾病甚至抗衰老等多个方面拓展。

埃索美拉唑诱导宫颈癌细胞增殖、迁移、侵袭和凋亡作用及机制

目的探讨埃索美拉唑(ESO)对人宫颈癌细胞SiHa和HeLa细胞增殖、迁移、侵袭和凋亡的作用及可能机制。方法人宫颈癌细胞SiHa和HeLa及正常宫颈细胞H8分别用ESO 0(细胞对照组),60,80和100 mg·L^(-1)处理24,48和72 h,CCK-8实验检测细胞存活率。SiHa和HeLa细胞用ESO 0,60,80和100 mg·L^(-1)处理24和48 h,通过细胞划痕实验检测细胞迁移率;用ESO 0,60,80和100 mg·L^(-1)处理48 h,通过Transwell实验检测细胞侵袭,流式细胞术检测细胞凋亡率,Western印迹法检测细胞内Bcl-2和胱天蛋白酶3蛋白表达水平及磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)和蛋白激酶B(Akt)磷酸化水平。结果与细胞对照组相比,SiHa和HeLa细胞经ESO 80和100 mg·L^(-1)处理48和72 h后细胞存活率显著降低(P<0.01),H8细胞存活率无明显变化。与细胞对照组相比,SiHa和HeLa细胞经ESO 60,80和100 mg·L^(-1)处理24和48 h后细胞迁移率显著降低(P<0.01);经ESO 60,80和100 mg·L^(-1)处理48 h后侵袭细胞数显著降低(P<0.05,P<0.01),细胞凋亡率显著增加(P<0.05,P<0.01),胱天蛋白酶3表达升高(P<0.01),Bcl-2表达降低(P<0.01),PI3K和Akt磷酸化水平降低(P<0.05,P<0.01)。结论ESO可抑制SiHa和HeLa细胞的增殖、侵袭和迁移,并促进其凋亡,其作用机制可能与抑制PI3K/Akt信号通路相关。

沉默ENO1对人宫颈癌HeLa细胞增殖、迁移、侵袭能力的影响

目的探讨α-烯醇化酶(ENO1)在宫颈癌组织中的表达及其对宫颈癌HeLa细胞增殖、迁移和侵袭的影响。方法运用免疫化学染色和实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测48例宫颈癌患者的癌组织和癌旁组织中ENO1的表达情况。运用RNA干扰技术对人宫颈癌HeLa细胞中的ENO1进行干扰,将细胞分为对照组(PBS组)、空载体组(GV102组)和干扰组(shENO1组),采用RT-PCR和Western blot检测干扰效率。通过MTT实验、细胞划痕实验和Transwell实验检测ENO1对细胞增殖、迁移和侵袭的影响。结果ENO1在宫颈癌组织中高表达(P<0.001),与年龄、FIGO分期、淋巴转移、病理类型及分级无明显相关性(P>0.05)。shENO1组ENO1 mRNA和蛋白表达水平较PBS组和GV102组显著降低(P<0.05)。MTT实验、细胞划痕实验和Transwell实验结果显示,shENO1组细胞增殖、迁移和侵袭能力较PBS组和GV102组显著降低(P<0.05)。结论ENO1在宫颈癌组织中呈高表达,体外实验发现沉默ENO1能抑制宫颈癌HeLa细胞的增殖、迁移和侵袭能力。

嵌合抗原受体T细胞免疫疗法的研究进展

嵌合抗原受体T(CAR-T)细胞是经基因工程修饰后表达靶向肿瘤细胞CAR分子的T细胞。CAR-T细胞治疗在血液肿瘤治疗中展现了显著的疗效而备受关注,是一种新的肿瘤免疫疗法。目前,CAR-T细胞治疗在实体瘤治疗中还面临着很大的挑战。而且,在临床应用的过程中仍会出现一些不良反应,如细胞因子释放综合征、神经毒性、归巢障碍、溶瘤综合征及脱靶效应等。本文就CAR-T疗法的基本原理及临床应用与不良反应展开做一综述。