三叶苷调控miR-539-5p表达保护缺氧缺糖心肌细胞损伤研究

目的:探讨三叶苷对缺氧缺糖心肌细胞损伤的保护作用及机制。方法:采用不同浓度的三叶苷作用于缺氧缺糖诱导的心肌细胞H9C2,试剂盒检测丙二醛(MDA)含量、乳酸脱氢酶(LDH)和超氧化物歧化酶(SOD)活性,流式细胞术、蛋白质印记(Western blot)检测细胞凋亡以及B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)和Bcl相关X蛋白(Bax)蛋白表达,实时荧光定量PCR(RTq PCR)检测miR-539-5p表达。转染miR-539-5p模拟物至H9C2细胞,检测过表达miR-539-5p对缺氧缺糖诱导的H9C2细胞损伤的影响。结果:三叶苷作用于缺氧缺糖诱导的H9C2细胞后,细胞中MDA含量、LDH释放量、细胞凋亡率和Bax蛋白表达水平显著降低,SOD活性、Bcl-2蛋白和miR-539-5p表达水平显著升高(P<0.05)。过表达miR-539-5p后,缺氧缺糖诱导的H9C2细胞中MDA含量、LDH释放量、细胞凋亡率和Bax蛋白表达水平显著降低,SOD活性、Bcl-2蛋白表达水平显著升高(P<0.05)。抑制miR-539-5p表达可减弱三叶苷对缺氧缺糖诱导的H9C2细胞MDA含量、LDH释放量、SOD活性、凋亡,以及Bax和Bcl-2蛋白表达的影响。结论:三叶苷可有效降低缺氧缺糖诱导的心肌细胞损伤,其机制与上调miR-539-5p表达有关。

miR-146a调控JNK信号通路对高氧下肺泡上皮细胞氧化应激和细胞凋亡的影响

目的研究微小RNA-146a(miR-146a)是否通过调控c-Jun氨基末端激酶(JNK)信号通路影响高氧下肺泡上皮细胞的氧化应激和细胞凋亡。方法将肺泡上皮细胞分为Con组(对照),Model组(模型),Model+miR-NC组(转染miR-NC+高氧),Model+miR-146a组(转染miR-146a mimic+高氧),Model+miR-146a+Anisomycin组(转染miR-146a mimic++JNK信号通路激活剂Anisomycin+高氧)。试剂盒检测超氧化物歧化酶(SOD)、锰(Mn)SOD活性和丙二醛(MDA)含量,膜联蛋白(Annexin V)V-FITC/碘化丙啶(PI)双重染色法评估细胞凋亡,蛋白质印迹法(Western blot)分析活化的(Cleaved)-天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶3(caspase3)、pro-caspase3、磷酸化JNK(p-JNK)表达,逆转录定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测miR-146a表达。结果与Con组相比,Model组肺泡上皮细胞中SOD、MnSOD活性、pro-caspase3蛋白、miR-146a的表达水平降低,MDA含量、凋亡率、Cleaved-caspase3、p-JNK蛋白表达水平升高,差异有统计学意义(P<0.05)。与Model组或Model+miR-NC组相比,Model+miR-146a组肺泡上皮细胞中SOD、MnSOD活性、pro-caspase3蛋白、miR-146a表达水平升高,MDA含量、凋亡率、Cleaved-caspase3、p-JNK蛋白表达水平降低,差异有统计学意义(P<0.05)。与Model+miR-146a组相比,Model+miR-146a+Anisomycin组肺泡上皮细胞的SOD、MnSOD活性、pro-caspase3蛋白表达水平降低,MDA含量、凋亡率、Cleaved-caspase3蛋白表达水平升高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论miR-146a通过激活JNK信号通路,减轻高氧下肺泡上皮细胞的氧化应激,并抑制细胞的凋亡。

淀粉样蛋白A、超敏C反应蛋白与血清降钙素原鉴别细菌性感染与病毒性感染的价值

目的评价血清淀粉样蛋白A（SAA）、超敏C反应蛋白（hs-CRP）与血清降钙素原（PCT）鉴别细菌性感染与病毒性感染的临床价值。方法选取326例患者，根据患者是否感染及感染的病原体不同，将患者分为病毒感染组（n＝68）、细菌感染组（n＝182）、病毒与细菌混合感染组（n＝11）、真菌感染组（n＝6）与非感染组（n＝59），检测并比较各组患者的SAA、hs-CRP与PCT指标，采用受试者工作特征曲线（ROC）评价各项指标的诊断价值。采用逻辑回归模型评价各指标诊断效能的影响指数。 结果各组患者SAA、hs-CRP与PCT指标比较差异有统计学意义（P均〈0.05）。与其他各组比较，细菌感染组患者PCT指标显著提高。混合组患者SAA与hs-CRP指标显著提高（P均〈0.05）。SAA、hs-CRP与PCT指标对病毒感染的诊断准确性较低，对细菌感染诊断准确性较高，对病毒与细菌混合感染的诊断有一定的临床应用价值。采用逻辑回归分析结果表明，PCT指标具有最大的偏回归系数，PCT诊断细菌、病毒感染具有最大的诊断效能。结论临床医师在诊断过程中将患者的临床资料与患者的SAA、hs-CRP与PCT等指标结合诊断，可以显著提高感染疾病诊断的准确性。