深海贝莱斯芽孢杆菌DH82的抑菌活性物质初步分离纯化及其抑菌谱检测

贝莱斯芽孢杆菌(Bacillus velezensis)DH82发酵上清液经最佳硫酸铵饱和度(70%)沉淀、透析获得粗蛋白,粗蛋白经Sephadex G-75柱层析的色谱条件为柱1.6 cm×50.0 cm;上样量为5 mL;洗脱液为超纯水,流速2 mL/min;检测波长280 nm,获得两个具有抑菌活性的峰蛋白PrI和PrII。两个峰蛋白经抑菌谱检测,发现对常见水产指示病原细菌包括迟缓爱德华氏菌(Edwardsiella tarda)、嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)、坎氏弧菌(Vibrio campbellii)、溶藻弧菌(Vibrio alginolyticus)、哈维氏弧菌(Vibrio harveyi)、无乳链球菌(Streptococcus agalactiae)和金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)都具有较好抑菌活性,表明深海贝莱斯芽孢杆菌DH82产生的抑菌活性物质对水产病原细菌的抑菌谱较广,其中峰蛋白PrII对指示植物病原真菌水贼镰刀菌(Fusarium equisetum)也具有较好抑菌作用。进一步对峰蛋白进行最小抑菌浓度(MIC)检验,发现其对迟缓爱德华氏菌和溶藻弧菌的MIC都较低(为7.16μg/mL)。以上研究结果表明,深海贝莱斯芽孢杆菌DH82具有较宽的抑菌谱及较强的抑菌活性,预示该菌株在常见水产细菌性及个别植物真菌性病害防治上具有较好的开发利用价值。

鱿鱼(Uroteuthis chinensis)黑色素酶法制备工艺优化及理化特征分析

本研究旨在利用响应面法优化鱿鱼黑色素酶法制备工艺条件,并分析其理化特征。选用鱿鱼墨囊为原料,通过单因素实验,研究pH、酶解温度、加酶量、酶解时间对鱿鱼黑色素得率的影响,在此数据基础上,采用Box-Behnken法设计四因素三水平的响应面分析,并通过紫外光谱分析、傅里叶红外光谱分析、扫描电镜分析、X射线衍射分析等多种检测技术对鱿鱼黑色素进行理化特征分析。结果表明,碱性蛋白酶为鱿鱼黑色素提取最适酶,在pH10.40,酶解温度65℃,加酶量2.60%(酶活2×10^5 U/g),酶解时间2.45 h的条件下进行酶解反应,鱿鱼黑色素得率为83.89%±0.21%。紫外吸收光谱分析显示碱性蛋白酶酶法所制鱿鱼黑色素在201 nm处有特征吸收峰;傅里叶红外吸收光谱中3388.46和1601.05,1373.66 cm^-1处出现了归属于吲哚环结构的较强吸收带;扫描电镜结果表明,鱿鱼黑色素单体呈现微球状,且颗粒大小分布集中,平均直径约为120 nm;X射线衍射光谱结果可推测黑色素吲哚结构的存在。本研究成果可为鱿鱼黑色素的的高值化开发及规模化生产提供理论依据和技术支持。

离子色谱法测定岩藻聚糖中L-岩藻糖

建立测定岩藻聚糖中L-岩藻糖的离子色谱方法。对包括色谱柱、流动相等色谱条件进行了优化,选用DIONEX CarboPac PA10型(250 mm×4 mm)色谱柱,以H2O-250 mmol/L NaOH溶液(90∶10)为流动相,流量为1.00 mL/min,柱温为30℃,用脉冲安培检测器检测。在该条件下,L-岩藻糖的质量浓度在0.11~44.80μg/mL范围与色谱峰面积线性良好,相关系数为0.9924,检出限为0.05μg/mL,定量限为0.10μg/mL。样品加标平均回收率为91.79%,相对标准偏差为2.77%(n=6)。该法检测岩藻聚糖中L-岩藻糖,操作简单、快速,灵敏度高,测定结果准确。