Gelsolin、P-gp、TopoⅡ、GST-π检测在非小细胞肺癌预后中的价值

目的:探讨凝溶胶蛋白(Gelsolin)、P糖蛋白(P-gp)、拓扑异构酶Ⅱ(TopoⅡ)、谷胱苷肽转移酶(GST-π)在预测非小细胞肺癌(NSCLC)临床病理特征、癌细胞转移和患者预后中的价值。方法:采用S-P免疫组化法检测126例NSCLC患者癌组织标本及其癌旁组织标本Gelsolin蛋白、P-gp、TopoⅡ、GST-π表达情况。结果:Gelsolin蛋白在NSCLC患者中的阳性表达率为31.7%,P-gp为38.1%,TopoⅡ为52.4%,GST-π为85.7%。Kaplan-Meier生存分析显示,Gelsolin蛋白及P-gp阳性患者生存率较Gelsolin蛋白阴性患者为低(P<0.05),Cox风险比例模型显示淋巴结转移、Gelsolin蛋白及P-gp阳性可显著增加NSCLC患者的死亡风险(P<0.05)。结论:Gelsolin蛋白与P-gp表达增加与NSCLC淋巴结转移及肿瘤进展相关,联合检测Gelsolin、P-gp、TopoⅡ、GST-π,可作为临床早期发现NSCLC转移及预测预后的指标。

Gelsolin蛋白与非小细胞肺癌转移的关系

目的:探讨凝溶胶蛋白(Gelsolin)在预测非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)临床病理特征、癌细胞转移和患者预后中的价值。方法:采用SP免疫组化法检测63例有完整资料的NSCLC患者癌组织标本及63例癌旁组织标本Gelsolin蛋白表达,分析Gelsolin与NSCLC患者临床病理特征和转移、预后的关系。结果:Gelsolin蛋白在63例癌旁组织中均为弱阳性表达,在肺癌细胞中的阳性表达率为31.7%(20/63);Gelsolin蛋白阳性表达与NSCLC组织学类型、肿瘤分化程度、肿瘤大小、临床分期及淋巴结转移有关(P<0.05);Kaplan-Meier生存分析显示Gelsolin蛋白阳性患者生存率较Gelsolin蛋白弱阳性或阴性患者为低(P<0.05);Cox风险比例模型显示淋巴结转移及Gelsolin蛋白阳性可显著增加NSCLC患者的死亡风险(P<0.05)。结论:Gelsolin基因在NSCLC发生发展中起重要作用,与NSCLC转移及低生存率有关,可作为临床早期发现NSCLC转移及预测预后的指标。

高/低侵袭转移性肺癌干细胞模型的建立

目的以人肺癌NCI-H446细胞为研究对象,建立一种高/低侵袭性肺癌干细胞(high/low invasion lung tumor stemcells,H/L-ILTSCs)模型,并鉴定其生物学特性。方法首先,利用transwell小室迁移实验分离高/低迁移性NCI-H446细胞。取高/低迁移性NCI-H446细胞采用transwell小室侵袭实验分离高/低侵袭转移性NCI-H446细胞。然后,以CD133、CD44为肺癌干细胞(lung tumor stem cells,LTSCs)表面标志,采用磁珠分选法分离NCI-H446细胞H/L-ILTSCs并进行纯度鉴定。最后,采用MTT法、transwell侵袭及免疫缺陷动物成瘤等实验,检测H-ILTSCs、L-ILTSCs及NCI-H446细胞的生长增殖,体外侵袭转移及体内成瘤能力。结果 H-ILTSCs生长增殖,体外侵袭转移及体内成瘤能力均高于L-ILTSCs及NCI-H446细胞,而L-ILTSCs与NCI-H446无显著差别。结论人肺癌细胞NCI-H446中可以分离和富集H/L-ILTSCs,且二者存在着干性差别。

尼古丁抑制穿孔素/颗粒酶B诱导的A549肺癌细胞凋亡

目的:首次探讨尼古丁对穿孔素/颗粒酶B(perforin/granzyme B)诱导的A549肺癌细胞凋亡的抑制作用及其机制。方法:以人肺癌细胞株A549为研究对象,采用四甲基偶氮噻唑蓝(MTT)比色法检测细胞活性,吖啶橙/溴化乙啶(AO/EB)双染荧光显微镜下观察细胞凋亡形态学变化,异硫氰酸荧光素标记的膜联蛋白V/碘化丙啶(Annexin V-FITC/PI)染色后流式细胞术定量检测细胞凋亡率,RT-PCR法检测X连锁凋亡抑制蛋白(XIAP)及存活素(survivin)mRNA的表达量。结果:(1)不同浓度尼古丁单独作用A549细胞时未见明显诱导凋亡现象,可显著抑制细胞生长(P<0.01),其抑制率与作用时间和剂量呈正相关。(2)0.125 mg/L perforin作用于A549细胞(1×106个)时,PI染核率可达到90%以上。而当加入1μL granzyme B(1 mg/L)孵育6 h时,perforin/granzyme B组细胞可呈现90%以上的凋亡现象。(3)6μmol/L尼古丁作用于perforin/granzyme B预处理的细胞6 h时可见明显凋亡抑制现象,当检测其凋亡抑制蛋白XIAP和survivin mRNA的含量时,发现尼古丁组表达量较高,perforin/granzyme B组表达量明显降低,而当尼古丁联合perforin/granzyme B时表达量最高。结论:尼古丁可明显抑制perforin/granzyme B诱导的A549肺癌细胞凋亡现象,这种作用可能与凋亡抑制蛋白XIAP和survivin的表达上调有关。

海岛地区非小细胞肺癌EGFR基因突变与临床病理特征的关系

目的:探讨舟山海岛地区非小细胞肺癌患者表皮生长因子受体(EGFR)19、21外显子的基因突变发生率及其与临床病理特征的相关性。方法:应用PCR扩增产物直接测序法检测129例非小细胞肺癌患者肿瘤组织EGFR基因19、21外显子突变,并分析其与临床病理资料的相关性。结果:129例肺癌患者中,共有35例发生EGFR基因突变(27.1%)。女性、非吸烟、腺癌及中高分化NSCLC患者EGFR基因突变率较高,是引起EGFR基因突变的危险因素(P<0.05)。Kaplan-Meier生存分析显示,NSCLC患者EGFR基因野生型及突变型生存率比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:舟山海岛地区肺癌患者EGFR突变发生率为27.1%,在女性、非吸烟、中高分化及肺腺癌患者中多见,但与总生存时间无明显相关。

巨噬细胞加帽蛋白与肺癌患者转移预后的关系

目的:探讨巨噬细胞加帽蛋白(CapG)在肺癌临床病理特征、癌细胞转移和患者预后中的价值。方法:S-P免疫组化法检测63例有完整资料的肺癌患者癌组织标本及相应癌旁组织CapG蛋白表达,分析CapG蛋白与肺癌患者临床病理特征和转移预后的关系。结果:CapG蛋白肺癌细胞胞浆及胞核阳性表达为33.3%(21/63),并与肺癌组织学类型、肿瘤分化程度、肿瘤大小、临床分期、淋巴结转移及抽烟有关(P<0.05);Kaplan-Meier生存分析显示CapG蛋白阳性患者生存率较阴性患者为低(P<0.05),Cox风险比例模型显示淋巴结转移及CapG蛋白阳性可显著增加肺癌患者的死亡风险(P<0.05)。结论:CapG基因在肺癌发生发展中起重要作用,与肺癌转移及低生存率有关,可作为临床早期发现肺癌转移及预测预后的指标。