疏水作用层析法纯化抗乙肝病毒核心抗原单克隆抗体

目的:采用疏水作用层析法纯化小鼠腹水来源的抗乙肝核心抗原(HBcAg)单克隆抗体(mAb),并对分离条件进行优化。方法:采用不同疏水层析介质、溶液pH和NaCl浓度,研究其对抗体吸附的影响,以及分析不同的洗脱方式和洗脱体积对抗体洗脱的影响,并用ELISA法检测纯化后抗体的活性。结果:疏水作用层析法纯化小鼠腹水来源的抗HB-cAgmAb(IgG1)的最适条件是以pH7.0、20mmol/LPB+1.2mol/L(NH4)2SO4为上样缓冲液,采用1.2～0mol/L(NH4)2SO4,12CV梯度进行洗脱,获得的mAb纯度大于75%,回收率达80%,纯化后mAb的活性保持良好。结论:采用疏水作用层析对mAb进行纯化,并优化了各步实验条件,为建立具有抗体纯度高、生物学活性好、易于放大的抗HBcAg的mAb的纯化方法提供了必要的实验基础。

阿拉伯胶酶产生菌株的筛选及其发酵培养基的优化

从土壤中筛选产阿拉伯胶酶的微生物菌株,并通过紫外诱变选育后得到高产突变菌株ZHB05F,依据菌落和孢子形态特征初步鉴定为镰刀(Fusarium sp.)。通过单因素试验,优化了产酶培养基的主组分的浓度和pH值,得到最佳的产酶发酵培养基组成为:阿拉伯胶30 g/L,(NH_4)_2SO_4 8g/L,K_2HPO_4 1g/L,MgSO_4·7H_2O 0.5 g/L,KCl 0.5g/L,FeSO_4·7H_2O 0.01g/L,H_3BO_3 0.01 g/L,pH 5～6。菌株ZHB05F在优化培养基组成下进行产酶发酵,酶活达到147.7 U/mL。

超氧化物歧化酶分离-修饰耦合过程的研究

以超氧化物歧化酶(SOD)为模板蛋白,研究其分离—修饰耦合工艺.即将SOD选择性地吸附在铜离子螯合葡聚糖凝胶层析柱上,先不经洗脱分离,直接用活化的聚乙二醇(PEG)5000对吸附的SOD进行化学修饰,再通过特异性洗脱分离获得PEG-SOD,使得SOD分离纯化和修饰过程同步完成.获得了一条SOD金属螯合层析分离—PEG化学修饰耦合工艺路线.获得的PEG-SOD比活9 055.1 U/mg,纯化倍数1.75倍,氨基修饰率42.3%,修饰前后活性保留87.1%.证明SOD的分离-修饰耦合工艺是可行的.

一例标签起皱异常分析及解决方案

标签可以使商品销售状况大为改观，货架上夺人眼球的炫目标签是商品实现销售的一种需求。对医药产品而言，标签更是具有表达商品名称等关键信息的作用。医药产品包装上的标签异常，不仅影响产品和公司形象，还可能造成医疗事故，后果不堪设想。本文就一例标签起皱异常，应用5H1E分析法，通过一些简单的试验，就试验结果展开分析并对该异常提出解决方案。