拟南芥膜相关蛋白基因CP5的克隆及其表达研究

CP5是利用人ACA血清筛选拟南芥cDNA文库的过程中克隆的一个新基因 ,GenBank注册号为AF130 2 5 3。Blast软件比对表明它位于拟南芥的第一条染色体上 ,氨基酸序列与动物的磷脂酰胆碱转移蛋白的同源性为 2 5 %。软件预测它是一种膜蛋白。Southern杂交结果表明CP5在拟南芥基因组中为单拷贝。原位杂交结果表明CP5mR NA在根部主要在根的皮层 ,在叶片和叶柄组织中在维管组织附近的细胞 ,花序基部成熟小花中、内果皮和成熟的种子中高表达。兔抗CP5的多克隆抗体识别拟南芥愈伤组织中2 7 5KD抗原 ;游离原生质体的间接免疫荧光结果表明CP5主要定位在核膜、内质网和质膜等膜系统上。

一种新的钙依赖性的蛋白激酶基因CP4的克隆及其表达研究

在利用人ACA (Anti Centromere/KinetochoreAutoantibody)血清研究拟南芥ACA相关蛋白的过程中克隆了钙依赖性的蛋白激酶基因家族的一个不典型基因 ,称为CP4 ,GenBank注册号为AF130 2 5 2。Southern杂交结果表明 ,拟南芥基因组中至少存在两种以上等位形式的CP4。原位杂交结果表明 ,CP4mRNA在拟南芥的花和根中高表达 ,在果实和叶片中没有表达。此外还构建了CP4的高效表达载体 ,为进一步研究CP4的功能打下了基础。