靶向抑制CPEB4对鼻咽癌细胞的影响及放射增敏的机制研究

目的本研究于2016年3~6月期间探讨靶向抑制CPEB4对鼻咽癌细胞生物学行为以及放射敏感度的影响。方法利用RNAi技术构建慢病毒载体靶向抑制CPEB4基因的干扰序列;采用CCK-8法绘制CNE-2-sh CPEB4、5-8Fsh CPEB4、CNE-2及5-8F的生长曲线(增殖能力);采用Transwell法检测CNE-2-sh CPEB4、5-8F-sh CPEB4迁移能力的改变;采用流式细胞术法检测CNE-2-sh CPEB4、5-8F-sh CPEB4凋亡率的改变;采用克隆形成实验检测CNE-2-sh CPEB4、5-8F-sh CPEB4、CNE-2及5-8F细胞的放射敏感度差异。采用Western blot法检测CNE-2-sh CPEB4,5-8F-sh CPEB4、CNE-2及5-8F细胞EMT相关蛋白表达改变。结果 CNE-2-sh CPEB4、5-8F-sh CPEB4分别与CNE-2及5-8F对照,增殖速度以及迁移能力减弱;凋亡率无明显改变,放射敏感度增加。Western blot法检测了CPEB4靶向抑制后EMT表型相关蛋白表达改变,结果提示E-cadherin表达上调,slug、snail以及vimentin的表达下调相关,推测靶向抑制CPEB4后鼻咽癌放射敏感度增强可能与EMT相关蛋白及因子的表达改变相关。结论靶向抑制CPEB4蛋白表达后,鼻咽癌细胞系的增殖能力、体外迁移能力显著减弱,放射敏感度明显增强,其机制可能与CPEB4抑制EMT表型相关,E-cadherin表达上调,vimentin表达下调,E-cadherin表达上调可能与抑制E-cadherin表达的转录因子slug、snail表达下调相关。

鼻息肉中IL-5mRNA和蛋白的定量分析

目的:检测IL-5mRNA和蛋白在鼻息肉和下鼻甲黏膜中的表达,并探讨其在鼻息肉发生发展中的意义及其表达与鼻息肉临床特征之间的关系。方法:采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)和免疫组织化学方法检测24例鼻息肉(息肉组)和15例下鼻甲黏膜(对照组)中IL-5mRNA定量表达和蛋白的表达水平。结果:鼻息肉组织中IL-5mRNA的表达是下鼻甲黏膜组织的7.52倍(P<0.01)。IL-5蛋白在鼻息肉组织阳性表达率为79.17%,显著高于鼻下鼻甲黏膜中的阳性表达率26.67%(χ2=10.52,P<0.01)。鼻息肉中组织中,IL-5mRNA的表达在性别、单双侧,初发复发之间差别无统计学意义,但在单发与多发、伴过敏性鼻炎或(和)哮喘与不伴过敏性鼻炎和哮喘之间差异有统计学意义。IL-5蛋白的表达在性别、单双侧,初发复发、伴过敏性鼻炎或(和)哮喘与不伴过敏性鼻炎和哮喘之间差别无统计学意义,但在单发与多发之间差别有统计学意义。结论:IL-5mRNA和蛋白在息肉组织中的高表达,可能是促进鼻息肉发生发展的一个重要因素;IL-5在鼻息肉中的表达高低与部分临床特征有关。