微小RNA-21反义寡核苷酸对舌鳞癌细胞增殖和凋亡的调控作用

目的探讨微小RNA-21(miR-21)反义寡核苷酸(miR-21ASO)对舌鳞癌细胞增殖和凋亡的调控作用。方法通过转染miR-21ASO,采用实时荧光定量RT-PCR(qRT-PCR)检测舌鳞癌细胞株SCC-15和CAL27中miR-21的表达变化,荧光素酶活性检测实验分析miR-21ASO在舌鳞癌细胞中的调控功能,并运用多种细胞增殖和凋亡检测方法以观察miR-21ASO对舌鳞癌细胞调控产生的系列效应。结果miR-21在两株舌鳞癌细胞SCC-15和CAL27中的表达显著高于在正常舌鳞状上皮细胞中的表达(P=0.037,0.015),转染miR-21ASO可显著抑制其表达(P=0.017,0.006),miR-21对荧光素酶活性的抑制率由50%显著减少到20%以下(P=0.002,0.003),SCC-15和CAL27细胞存活率比转染前明显降低(P=0.002,0.004),细胞克隆形成率比转染前明显降低(P=0.007,0.032);流式细胞仪检测显示转染miR-21ASO后,SCC-15和CAL27细胞凋亡明显增加,激光共聚焦显微镜观察到线粒体细胞色素C释放较转染前增加。结论miR-21ASO对舌鳞癌细胞miR-21水平降低具有靶向特异性,转染miR-21ASO可有效抑制miR-21的促癌效应,利用反义核酸技术的高度特异性开展针对促癌microRNA分子的靶向治疗将可能为舌鳞癌的基因治疗开辟新的途径。