干细胞的衰老学说

文章从造血干细胞的自我更新和分化的过程中,阐明干细胞质和量的衰老,端粒缩减、氧化应激均加速干细胞的衰老,组蛋白的编码和转录子的激活可导致DNA或蛋白质的损伤。在干细胞衰老中,异染色质结构和基因转录的异常是干细胞衰老的重要调节机制。如果干细胞的衰老不是发生在基因水平上,那么则是发生在转录水平之中。因此在干细胞的造血中,众多的转录错误导致细胞周期衰老,是异染色质扩展的恶果。在正常的情况下,上述机制通常是不会发生的。如果仅仅是异染色质的错位,则不是干细胞基因表达的结果,在干细胞自我更新中充分证明,异染色质的改变导致了组蛋白的改变。

晚期消化道肿瘤患者化疗前后外周血血浆细胞因子的变化

目的检测消化道肿瘤患者化疗前后血浆细胞因子的变化,从而探讨化疗对不同患者机体免疫状态改变的影响及其临床意义。方法采用ELISA方法检测健康组、消化道肿瘤组、早期消化道肿瘤组及晚期消化道肿瘤组患者化疗前后血浆细胞因子的变化。结果消化道肿瘤患者组IL-2的水平显著低于健康组(P<0.05),而其IL-10和TNF-α水平略高于健康组(P>0.05),以上结果与临床分期有关,即晚期患者IL-2较早期患者更低(P<0.05),而IL-10和TNF-α则较早期患者更加升高。晚期消化道肿瘤患者化疗后1周,血浆IL-2浓度较化疗前明显下降,处于极低水平,其中化疗无效组降低更为明显。化疗后2周起,化疗有效组患者IL-2浓度逐渐回升并接近化疗前水平,化疗后3周其水平甚至显著超过化疗前水平(P<0.05);而化疗无效组,IL-2浓度虽有微弱回升但仍明显低于化疗前。血浆中IL-10和TNF-α的浓度却在化疗后呈现一个先增高后减低的趋势。结论消化道肿瘤患者机体免疫功能受到抑制,而且免疫抑制程度与其临床分期有关,早期患者的免疫抑制程度较轻,晚期患者的免疫抑制程度较重。晚期消化道肿瘤患者化疗后早期(1～2周)加剧了免疫抑制的程度,化疗有效患者,化疗后3周全身免疫状况改善;而化疗无效组未出现相应的免疫功能的改善,甚至呈现免疫功能的进一步恶化。

GTPase在肝癌细胞系中的表达和意义

目的 :研究GTPase三个代表性蛋白在肝癌细胞系中的表达 ,探讨GTPase在肝癌发生发展中的意义。方法 :用Westernblot测定Rac1、Cdc4 2、RhoA蛋白在正常肝细胞系和几种肝癌细胞系中的表达水平。结果 :与正常肝细胞系相对照 ,三种肝癌细胞系中Rac1、Cdc4 2、RhoA的蛋白表达水平均上调。结论 :Rac1、CDC4 2、RhoA可能在肝癌的发生发展中起着重要的作用。

分泌人可溶性FL基因转染细胞及其生物学活性分析

应用基因重组技术构建了人可溶性FL基因逆转录病毒载体pLXSN FL ,经转染PA317细胞和G4 18筛选抗性细胞克隆 ,获得重组病毒液。NIH3T3细胞进行病毒滴度测定后 ,选择适当滴度的重组病毒 (5× 10 5CFU/ml)感染ECV30 4细胞 ;应用聚合酶链反应 (PCR )及反转录聚合酶链反应 (RT PCR )检测感染ECV30 4细胞FL的DNA及mRNA表达 ;应用ELISA测定rhFL在ECV30 4中的表达水平 ,用荧光标记和流式细胞仪检测转基因上清对单个核细胞来源DC的表型影响及3 H TdR掺入法测定DC对T细胞的促增殖作用。结果表明 ,外源性rhFL基因整合到ECV30 4细胞染色体DNA并有效地转录和翻译 ,稳定表达水平为 82 4ng (10 6细胞 /2 4h )的人FL。转基因ECV细胞培养上清能有效诱导人PBMC来源DC的分化和增强DC对T细胞的激发作用。外源性FL基因可以转移到ECV30 4细胞并稳定表达 。