1,25(OH)_2D_3和γ射线对人卵巢癌细胞SKOV-3的联合作用

为探讨活性维生素D(1,25-dihydroxyvitamin D_3,1,25(OH)_2D_3)与γ射线联合应用对SKOV-3细胞增殖的影响,评价1,25(OH)_2D_3能否增强γ射线对SKOV-3细胞的抑制作用,将实验分为1,25(OH)_2D_3组,^(60)Coγ射线组以及两者联合作用组和对照组,用MTT法测定细胞抑制率,并用流式细胞仪进行细胞周期、细胞内活性氧(ROS)和钙离子[Ca^(2+)i分析。结果发现:1,25(OH)_2D_3与γ射线单独应用可以抑制SKOV-3细胞的增殖,并且1,25(OH)_2D_3能显著增强γ射线对细胞的抑制作用;细胞周期分析显示,1,25(OH)_2D_3增加了SKOV-3细胞G_0/G_1期的比例,γ射线组增加了G_2/M期的细胞比例,而联合作用组中G_2/M期的比例明显增加,使细胞进一步阻滞于G_2/M期;并且1,25(OH)_2D_3组和γ射线单独应用组均能增加细胞内ROS及[Ca^(2+)i]浓度,并且联合作用组增加幅度最大(P<0.05)。结果提示,1,25(OH)_2D_3可以增强γ射线对卵巢癌细胞株SKOV-3抑制作用。

氡慢性染毒致大鼠癌前病变的发生及肺组织RAGE和S100A6蛋白的表达

目的观察氡慢性染毒致大鼠肺组织的病理改变，以及晚期糖基化终产物受体（RAGE）和钙结合蛋白A6（A6，S100A6）蛋白的表达。方法Wistar雄性健康大鼠整体暴露于多功能生态氡室，染毒时间约27个月，染毒结束后观察健康对照组和染毒组大鼠肺组织的病理改变，同时提取大鼠肺组织总蛋白，检测增殖细胞核抗原（proliferating cell nuclear antigen，PCNA）、RAGE和S100A6的表达情况。结果在饲养及染毒过程中，健康对照组和染毒组大鼠各死亡2只，病理切片显示为心衰水肿表现，为自然死亡。存活大鼠病理切片显示肺组织呈充血水肿，炎性反应细胞浸润及肺气肿表现，其中1只大鼠出现肺泡上皮细胞的严重增生性改变，为癌前病变的一种形式。以β-actin为内参，肺组织蛋白表达检测显示，染毒组大鼠PCNA呈高表达（对照组0．0067±0．009，染氡组0．174±0．091），肺组织呈增生性改变，RAGE和S100A6蛋白在染毒组大鼠也呈现高表达（RAGE对照组0．0041±0．006，染氡组0．4372±0．291；S100A6对照组0．069±0．055，染氡组0．493±0．049），其高表达可能与肺组织的癌前病变有关。结论氡慢性染毒可致大鼠肺组织发生癌前病变，并且诱发RAGE和S100A6蛋白的高表达。

二甲基苯蒽卵巢被膜下注射诱发小鼠卵巢肿瘤模型

[目的]以二甲基苯蒽(7,12-dimethylbenz[a]anthracene,DMBA)卵巢被膜下注射诱发小鼠卵巢肿瘤,并初步观察其生物学特性,为探讨卵巢癌的发病机制及评价治疗措施提供理想的动物模型。[方法]取雌性C57BL/6小鼠10只,在麻醉状态下,用眼科微量注射器分别在小鼠双侧卵巢被膜内注入含有4g/L的DMBA注射液0.05mL,连续观察4个月,进行肿瘤生物学特性的一般状况观察、光镜观察、病理切片检查。[结果]在注射DMBA后4个月发现,1只小鼠因术后感染而死亡,2只无肿瘤发生,其余小鼠出现腹部隆起,发现有不同程度的未分化癌或腺癌,组织学特点与相应的人类卵巢肿瘤很相似。[结论]DMBA能原位诱发小鼠的卵巢肿瘤,肿瘤发生率达70%(7/10),可用于人卵巢癌的相关实验研究。

香烟烟雾吸入致大鼠肺与气管上皮细胞RAGE和S100A6表达增加

目的观察香烟烟雾长期染毒大鼠肺组织、气管上皮细胞中晚期糖基化终产物受体(RAGE)和钙结合蛋白(S100A6)的表达。方法健康雄性Wistar大鼠18只,随机分为对照组、低(烟雾浓度20%)和高(烟雾浓度60%)浓度组,每组6只。动式气体染毒装置每天染毒2次,每次30min,一周5d,共染毒43周。分离大鼠气管和肺组织,分离原代上皮细胞,收集并提取总蛋白;Westernblot方法检测RAGE和S100A6蛋白的表达。同时测定正常的人支气管上皮细胞株BEAS-2B和肺癌细胞株A549中2种蛋白的表达情况。结果气管组织贴块培养法分离出的上皮细胞纯度为(93.56±1.48)%;烟雾染毒组大鼠肺组织及气管上皮细胞中RAGE和S100A6蛋白的表达均显著增高。同时,肺癌细胞A549中RAGE及S100A6蛋白的表达量明显高于正常人支气管上皮细胞BEAS-2B。结论RAGE和S100A6有望作为香烟烟雾暴露致肺损伤的生物学标志。