γ射线对淋巴细胞膜及细胞转化的效应

目的研究3种淋巴细胞亚群的辐射效应及其适应性反应。方法采用125I标记的淋巴细胞膜表面的单克隆抗体与细胞膜结合以及PWM（Pokeweed mitogen,美洲商陆有丝分裂原）激活淋巴细胞的方法测量其放射性的变化,以反映γ射线对淋巴细胞的效应及适应性反应。结果 0.5~8.0 Gyγ射线照射后,膜损伤随剂量增加而加重。B淋巴细胞膜损伤程度大于T淋巴细胞,CD8细胞放射敏感性大于CD4细胞。0.048 Gy低剂量辐射导致CD20和CD4细胞的适应性更好。达到8.0 Gy时,适应性反应消失。PWM激活淋巴细胞的方法反映10 Gyγ射线对B细胞的抑制效应非常显著大于CD4细胞。结论攻击剂量损伤CD20〉CD8〉CD4细胞。低剂量照射的适应性反应CD20〉CD4〉CD8细胞。8.0 Gy时适应性反应消失。10 Gy导致PWM细胞的损伤CD20〉CD4细胞。

重组人粒细胞刺激因子对8Gy、10Gy与15Gy照射小鼠救治方案的差别研究

目的探讨骨髓型急性放射病与肠型急性放射病的救治方案差别。方法采用重组人粒细胞刺激因子(rhG-CSF)对接受8 Gy、10 Gy、15 Gy60Coγ射线照射的C57BL/6J小鼠进行救治,并对比其骨髓、胃肠受损程度。结果 rhG-CSF对8 Gy照射组救治作用良好(P<0.05),而对10 Gy、15 Gy照射组则不能起作用(P>0.05)。结论rhG-CSF单独用药适用于小鼠骨髓型急性放射病损伤,而对肠型急性放射病疗效不佳。

含hNIS报告基因的乏氧调控重组质粒的构建及其功能鉴定

目的构建乏氧应答启动子调控的人钠/碘共同转运体(hNIS)报告基因重组质粒,为实体瘤微环境乏氧的实时监测提供研究基础。方法合成乏氧反应元件(HRE)的核苷酸片段,克隆入pGL3-promoter,构建为pGL3-promoter-5×HRE载体。然后将扩增的hNIS基因插入pGL3-promoter-5×HRE载体中,构建为pGL3-promoter-5×HRE-NIS重组质粒并进行测序验证。以DMSO处理组作为对照,CoCl_2处理HEK293细胞模拟乏氧;将经验证的pShuttle-NIS质粒转染HEK293乏氧细胞,同时将构建的pcDNA3.1-HIF-1α质粒和pShuttle-NIS质粒按照3:1比例转染HEK293细胞,转染空质粒pcDNA3.1和pShuttle-NIS质粒组作为对照。通过qRT-PCR法检测hNIS基因表达的变化。并用高锝酸盐(^(99m)TcO_4^-)处理双质粒共转染的HEK293细胞,洗脱游离^(99m)TcO_4^-后通过γ计数器采集细胞放射性计数,检测所表达NIS蛋白的功能。结果克隆的基因产物与预期一致,序列无碱基的突变。共转染HIF-1α质粒组及转染pShuttle-NIS的CoCl_2处理组,其hNIS mRNA的表达量显著高于转染空质粒及DMSO处理组(均P<0.01)。共转染HIF-1α质粒组细胞的^(99)TcO_4^-摄取率显著高于空质粒对照组(P<0.01)。结论 pGL3-promoter-5×HRE-NIS重组质粒转染后能介导细胞摄取^(99m)TcO_4^-,为微环境细胞乏氧的核素显像提供实验依据。