血根碱对人脑胶质瘤A172细胞生长及放射敏感性的影响

目的探讨血根碱对人脑胶质瘤A172细胞的生长及放射敏感性的影响。方法采用MTT法检测血根碱处理后A172细胞的生长和增殖；细胞流式技术测定细胞周期改变以及活性氧（ROS）的变化；磷脂酰丝氨酸外翻分析法检测细胞凋亡；细胞克隆形成法观察血根碱和辐射的联合作用。结果血根碱明显抑制脑胶质瘤A172细胞的生长，12、24和48h血根碱处理导致细胞生长抑制的半数抑制浓度（IC50）分别为4．83、3．91和3．25Ixmol／L。血根碱可以诱导剂量依赖性的细胞周期s期阻滞。与未处理的对照组相比，5Ixmol／L血根碱处理A172细胞24h后，早期凋亡细胞比例从（2．92±0．83）％增至（60．01±3．73）％，晚期凋亡细胞从（0．64．4-0．19）％增至（2．704-0．18）％，坏死细胞从（0．52±0．19）％增至（3．93±0．76）％，差异均具有统计学意义（t=55．28、8．32和9．51，P〈0．05）。另外，血根碱可以诱导ROS的产生，5μmol／L血根碱处理后ROS水平是对照组的4．1倍，而抗氧化剂氮乙酰半胱氨酸（NAC）能有效地抑制血根碱的细胞毒作用。采用多靶单击模型拟合曲线发现，与单纯照射组相比，血根碱预处理＋照射的联合处理组的放射增敏比（SERD0）达1．48。结论血根碱可以通过诱导细胞周期阻滞、细胞凋亡和ROS的产生抑制脑胶质瘤A172细胞的生长，而且在低剂量下，血根碱预处理可增加放射敏感性。

低能量代谢诱导HeLa细胞及SD大鼠的辐射保护作用

目的探讨低能量代谢状态对受照后子宫颈癌HeLa细胞存活的影响，并研究饥饿状态下大鼠受照后抗氧化损伤指标的变化情况。方法四甲基偶氮唑盐（MTT）比色法检测不同浓度葡萄糖对HeLa细胞生长的影响；克隆形成法检测浓度分别为t、5、10和25mmol／L的葡萄糖对HeLa细胞辐射敏感性的影响；不同浓度葡萄糖联合6Gy的x射线处理后，流式细胞术检测细胞周期的变化，AnnexinV—FITC法检测细胞凋亡。动物实验采用SD雄性大鼠60只，采用随机表法将大鼠随机分为6组，每组10只，其中每两组分别给予正常饮食、饥饿24h和饥饿48h处理，每种处理方式中一组不照射，另一组给予11Gy的X射线照射。照射后2h采集大鼠静脉血液，采用ELISA试剂盒检测血中超氧化物歧化酶（SOD）、总抗氧化能力（T—AOC）的水平。结果葡萄糖浓度≤25mmol/L可增加HeLa细胞的存活率，而〉25mmol／L却使HeLa细胞的存活率降低。在25mmol／L以下，随着葡萄糖浓度的下降，HeLa细胞的辐射敏感性也逐渐降低，25、10、5mmol／L相对于1mmoL／L组，辐射增敏比（SER）分别为1．23、1．10和1．07。相比于高糖（25mmol／L）联合6Gy的x射线处理组，低糖（1mmol／L）联合组降低了G：／M期及s期细胞比例[G：／M期（49．68±1．88）％和（35．54±1．45）％，s期（16．88±1．22）％和（10．23±1．65）％，t=10．42和5．61，P〈0．05]，而且使细胞早期凋亡明显减少[（25．50±0．95）％和（7．56±1．07）％，t=21．72，P〈0．05]。与正常饮食组比较，照射后饥饿48 h处理组的大鼠血中SOD、T—AOC含量明显增加（t=40．32和42．78，P〈0．05）。结论无论在细胞水平还是在动物整体水平上，低能量代谢状态均具有一定的辐射防护作用，而高能量代谢状态则增加其辐射敏感性。

BTG2作为一种新的电离辐射诱导基因的研究

目的 研究γ射线照射对肿瘤细胞的B细胞易位基因2（BTG2）表达水平的影响.方法 应用RT-PCR方法研究电离辐射对肿瘤细胞BTG2 mRNA水平的影响;应用Western blot方法测定电离辐射对肿瘤细胞BTG2蛋白表达水平的影响.结果 与未照射对照细胞相比,3 Gyγ射线单次剂量照射明显提高了人乳腺癌细胞系MCF-7、MDA-MB-231和人宫颈癌细胞系C33A、HeLa中的BTG2蛋白的表达水平.γ射线照射人乳腺癌细胞系MCF-7和MDA-MB-231导致了照射剂量和时间依赖性的BTG2表达水平的升高,而且这种改变既表现在BTG2 mRNA水平上,也反映在BTG2蛋白水平上.结论 BTG2是一种新的辐射诱导DNA损伤的反应基因,进一步研究将为BTG2作为肿瘤放射治疗的疗效和预后评价指标提供实验基础和依据.