基质金属蛋白酶在兔干眼症动物模型中的表达

目的检测兔干眼动物模型角膜组织中基质金属蛋白酶-1(matrix metalloprotein-ase,MMP-1)和MMP-9的表达,探讨MMP在干眼发病机制中的作用。方法新西兰大白兔共30只,采用摘除泪腺、第3眼睑及Harders'腺的方法造模。造模前及造模后第3天、第5天、第7天、第14天、第21天、第28天行ShirmerⅠ试验和荧光素角膜染色检查。分别于造模后第14天、第28天各取15只实验兔角膜组织行免疫组织化学检查。结果造模前兔ShirmerⅠ试验值(16.4±3.8)mm,造模后第3天、第5天、第7天、第14天、第21天、第28天分别为(13.1±3.2)mm、(10.5±2.2)mm、(8.4±1.7)mm、(6.5±2.1)mm、(5.6±2.4)mm、(5.2±2.3)mm,造模后ShirmerⅠ试验值随着时间的推移逐步下降,7d后稳定在10mm以下。造模后各时间点ShirmerⅠ试验值与造模前比较均存在显著性差异(均为P<0.01)。造模前兔角膜荧光素染色阴性,造模后出现阳性染色,并随着时间的推移染色程度逐渐加重。造模后第14天、第28天术眼角膜光学显微镜下可见明显组织结构异常,且MMP-1和MMP-9的表达呈高度相关性,随时间的推移均显著提高。结论 MMP-1和MMP-9均参与了干眼的病理发展过程。

p73、p63及p53基因表达与喉鳞状细胞癌预后相关性分析

目的探讨p73、p63和p53蛋白在喉鳞状细胞癌发生、发展中的作用与意义,为喉鳞癌的临床诊断及治疗提供新的思路,并为基因治疗的探索提供理论依据。方法采用免疫组织化学(S-P法)检测p73、p63、p53蛋白在50例喉鳞状细胞癌、10例癌旁组织及10例正常喉黏膜中的表达,分析3种基因蛋白与喉鳞癌的临床病理特征之间的关系。结果(1)p73表达与局部淋巴结转移成正相关(P<0.01)。p73阳性表达的患者生存率相对较低(P<0.05)。(2)p63表达与临床分期成负相关(P<0.05),与其他临床特征及生存率无关(P>0.05)。(3)p53表达与各临床特征均无关,p53阳性表达的患者生存率相对较低(P<0.05)。结论(1)喉鳞状细胞癌中的p73过表达可能与局部淋巴结转移有关。p73阳性表达可能是患者预后不良的指标。(2)p63过表达的肿瘤恶性度可能相对较低,p63的表达与患者预后无直接联系。(3)p53阳性表达的患者预后较差。(4)提示p53家族可能和喉鳞状细胞癌形成的早期阶段有关。

脂质体介导TGF-β1 shRNA转染的方法

目的探讨脂质体介导的转化生长因子β1(TGF-β1)短发夹RNA(shRNA)在人肿瘤细胞株的转入效率,为研究TGF-β1信号转导在肿瘤微环境中的作用机制提供方法依据。方法化学合成TGF-β1小干扰RNA(siRNA),与脂质体转染介质混合制备转染复合物(Lip-shRNA),处理细胞24h后用流式细胞术(FCM)及人工计数法测定RD细胞的转入率;免疫荧光技术检测细胞TGF-β1蛋白表达水平。结果荧光显微镜观察硫代磷酸化修饰的寡核苷酸转入4h后,shRNA主要定位在细胞浆,8h后细胞核中有较多的shRNA;FCM测得转入细胞转入率与Lip-shRNA复合物呈剂量依赖关系,人工测得shRNA的转入率与转入复合物在低剂量呈剂量依赖关系,但在高剂量时增高不明显。转入6d后各组细胞TGF-β1蛋白表达量较转入3d时明显减少,与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论脂质体介导的TGF-β1shRNA在常见肿瘤细胞株中的转入效率与寡核苷酸的稳定性、Lip-shRNA复合物剂量、转入时间密切相关,该转染技术可以作为RNA干扰手段研究TGF-β1信号转导的病理学机制。

抑癌基因FHIT在乳腺癌中的表达及其临床意义

目的检测脆性组氨酸三联体基因(FHIT)在乳腺癌组织中的表达情况,分析FHIT与乳腺癌生物学特性的关系。方法应用免疫组织化学技术Envision二步法,检测FHIT在75例乳腺癌患者、38例非乳腺癌患者中的表达,分析其与乳腺癌临床病理参数及患者生存期的关系。结果FHIT在非肿瘤性乳腺组织、乳腺癌中的阳性表达率分别为92.1%和52.0%,差异有统计学意义(P<0.05)。FHIT的表达强度与淋巴结转移成负相关(P<0.05),与患者的月经状况、激素受体(ER、PR)及C-erbB-2的表达状态、肿瘤大小、临床分期及组织学分级均无关。结论(1)FHIT与乳腺癌的淋巴结转移密切相关。(2)FHIT在乳腺癌的发生、发展、浸润、转移中起重要作用。

食管鳞癌组织中hPOT1蛋白的表达及其意义

目的检测食管鳞癌组织、切缘组织及癌旁组织中hPOT1蛋白的表达水平,探讨它们之间的关系及鳞癌组织中hPOT1的表达与肿瘤临床病理学参数的关系。方法采用免疫组织化学技术检测上述组织中hPOT1蛋白的表达水平。结果82例鳞癌组织、切缘组织中,hPOT1蛋白阳性表达率分别为78.05%(64/82)、73.17%(60/82)两者相比差异无统计学意义(P>0.05),51例癌旁组织中hPOT1蛋白阳性表达率为50.98%(26/51),与鳞癌组织相比差异有高度统计学意义(P<0.01)。hPOT1蛋白的表达与患者的性别、年龄及肿瘤的大小、分化程度没有相关性(P>0.05),与肿瘤浸润深度、淋巴结转移及患者生存期密切相关,有统计学意义(P<0.05)。结论hPOT1蛋白的表达与食管鳞癌的发生、发展有密切的关系,检测hPOT1蛋白的表达对判断食管鳞癌预后有一定的指导意义。

三七总皂甙对实验性肺纤维化大鼠病理变化和转化生长因子-β1表达的影响

目的研究博莱霉素(BLM)所致大鼠肺纤维化的病理形态学变化和三七总皂甙(PNS)的干预作用及其机制。方法通过气管内注入BLM复制动物肺纤维化模型,于造模后第2天各治疗组开始每天给药,于给药后第7,14,28天分别随机处死一批大鼠,取肺组织行HE染色,用免疫组织化学方法检测肺组织中TGF-β1的表达,并测定肺组织中羟脯氨酸(HYP)含量。结果PNS能抑制实验性肺纤维化大鼠肺组织中胶原沉积及TGF-β1的异常升高,减轻其肺部的病理损害。结论PNS对BLM诱导产生的肺纤维化有一定的抑制作用。

细胞因子治疗^(60)Coγ射线照射所致急性放射病的实验研究

目的观察重组人白细胞介素-11(rhIL-11)和重组人粒细胞集落刺激因子(rhG-CSF)联用对60Coγ射线照射所致急性放射病的疗效。方法16只比格狗随机分为对照组(5只)、对症治疗组(5只)和细胞因子治疗组(6只)。所有动物均接受4.5Gy60Coγ射线照射,并在照后当天开始治疗,对症治疗组仅给予积极的对症支持治疗,细胞因子治疗组在对症治疗的基础上,加用rhIL-11和rhG-CSF,对照组不给予任何治疗。观察动物的一般情况、外周血象、外周血有核细胞早期凋亡率和坏死率、血浆中细胞因子含量及组织病理学变化。结果细胞因子治疗组动物的45d存活率升高,外周血象也明显改善;外周血有核细胞早期凋亡率和坏死率明显降低;外周血血浆中IL-2和IFN-γ含量在早期均升高,随后IL-2迅速下降,IFN-γ含量相对比较稳定;骨髓组织病理学结果显示造血功能明显恢复。结论rhIL-11和rhG-CSF联用可促进急性放射病比格狗的造血和免疫功能恢复,是治疗急性放射病的有效方法。

端粒酶催化亚基在卵巢上皮肿瘤中的表达及其临床意义

目的研究端粒酶催化亚基(hTERT)在卵巢上皮肿瘤组织中的表达及其临床意义。方法应用免疫组化S-P法检测26例恶性卵巢上皮肿瘤、8例卵巢良性上皮肿瘤组织中hTERT的阳性表达率。结果卵巢恶性上皮肿瘤组织中的hTERT阳性表达率为65.4%,明显高于卵巢良性上皮肿瘤的12.5%,差异有统计学意义(P<0.05)。hTERT表达水平与恶性卵巢上皮肿瘤病理分级、FIGO分期无关(P>0.05)。结论端粒酶的激活在卵巢癌的发生发展中可能发挥着重要作用。

PTEN和Ki-67蛋白在脑星形细胞瘤中的表达及其临床意义

目的研究PTEN和Ki-67蛋白在脑星形细胞瘤中表达情况以及临床意义。方法用免疫组化方法检测15例正常脑组织和65例脑星形细胞瘤组织中PTEN和Ki-67蛋白的表达情况。结果PTEN蛋白在脑星形细胞瘤表达随WHO分级增高而降低。Ki-67表达水平随脑星形细胞瘤病理分级的增高而增高。脑星形细胞瘤组织中PTEN与Ki-67蛋白的表达均呈负相关。结论PTEN表达缺失可引起Ki-67的过表达,促进脑星形细胞瘤血管生成和肿瘤细胞增殖,两者在肿瘤的增殖、侵袭过程中相互作用。