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表达人IL-17F重组腺病毒载体的构建及其表达产物的功能研究
被引量:
3
1
作者
盛伟华
任苏勤
+3 位作者
谢宇锋
缪竞诚
刘铁连
杨吉成
《中华微生物学和免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第9期683-687,共5页
目的构建表达人白细胞介素IL-17F (hIL-17F)的重组腺病毒载体(Ad-hIL-17F),为进行hIL-17F基因表达抑制血管形成和抑瘤效应的研究奠定基础。方法以pUCm-T/hIL-17F重组质粒为模板PCR扩增hIL-17F,酶切连接到带有GFP标记的pAdTrack-CM...
目的构建表达人白细胞介素IL-17F (hIL-17F)的重组腺病毒载体(Ad-hIL-17F),为进行hIL-17F基因表达抑制血管形成和抑瘤效应的研究奠定基础。方法以pUCm-T/hIL-17F重组质粒为模板PCR扩增hIL-17F,酶切连接到带有GFP标记的pAdTrack-CMV转移质粒上,PmeⅠ线性化重组质粒pAdTrack-CMV-hIL-17F,与腺病毒骨架质粒pAdEasy-1共转化BJ5183细菌,经同源重组,获得同源重组腺病毒质粒pAdEasy-1-pTrack-CMV-hIL-17F经PacⅠ线性化后转染QBI-293A细胞,收获Ad-hIL-17F,用RT-PCR和间接免疫荧光法鉴定人IL-17F基因表达。 MTT法检测hIL-17F基因表达对ECV304细胞的生长抑制作用, ELISA法检测人血管内皮生长因子( VEGF)和血管生成素( Ang-1)基因在293A细胞、ECV304细胞中的表达水平;实时定量RT-PCR检测Ad-hIL-17F对293A细胞中人VEGF转录的影响。结果测序显示hIL-17F序列正确,RT-PCR和间接免疫荧光法检测到了IL-17 F基因的表达。 Ad-hIL-17 F能显著抑制ECV304细胞的生长,抑制人VEGF和Ang-1基因在293 A细胞、ECV304细胞中的表达。结论成功构建和获得了hIL-17F的重组腺病毒载体(Ad-hIL-17F), Ad-hIL-17 F可通过下调VEGF和Ang-1的分泌而抑制血管形成。
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关键词
IL-17F
腺病毒载体
构建
鉴定
原文传递
题名
表达人IL-17F重组腺病毒载体的构建及其表达产物的功能研究
被引量:
3
1
作者
盛伟华
任苏勤
谢宇锋
缪竞诚
刘铁连
杨吉成
机构
苏州大学医学部细胞与分子教研室
出处
《中华微生物学和免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第9期683-687,共5页
文摘
目的构建表达人白细胞介素IL-17F (hIL-17F)的重组腺病毒载体(Ad-hIL-17F),为进行hIL-17F基因表达抑制血管形成和抑瘤效应的研究奠定基础。方法以pUCm-T/hIL-17F重组质粒为模板PCR扩增hIL-17F,酶切连接到带有GFP标记的pAdTrack-CMV转移质粒上,PmeⅠ线性化重组质粒pAdTrack-CMV-hIL-17F,与腺病毒骨架质粒pAdEasy-1共转化BJ5183细菌,经同源重组,获得同源重组腺病毒质粒pAdEasy-1-pTrack-CMV-hIL-17F经PacⅠ线性化后转染QBI-293A细胞,收获Ad-hIL-17F,用RT-PCR和间接免疫荧光法鉴定人IL-17F基因表达。 MTT法检测hIL-17F基因表达对ECV304细胞的生长抑制作用, ELISA法检测人血管内皮生长因子( VEGF)和血管生成素( Ang-1)基因在293A细胞、ECV304细胞中的表达水平;实时定量RT-PCR检测Ad-hIL-17F对293A细胞中人VEGF转录的影响。结果测序显示hIL-17F序列正确,RT-PCR和间接免疫荧光法检测到了IL-17 F基因的表达。 Ad-hIL-17 F能显著抑制ECV304细胞的生长,抑制人VEGF和Ang-1基因在293 A细胞、ECV304细胞中的表达。结论成功构建和获得了hIL-17F的重组腺病毒载体(Ad-hIL-17F), Ad-hIL-17 F可通过下调VEGF和Ang-1的分泌而抑制血管形成。
关键词
IL-17F
腺病毒载体
构建
鉴定
Keywords
hIL-17F
Adenovirus vector
Construction
Identification
分类号
R341 [医药卫生—基础医学]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
表达人IL-17F重组腺病毒载体的构建及其表达产物的功能研究
盛伟华
任苏勤
谢宇锋
缪竞诚
刘铁连
杨吉成
《中华微生物学和免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2013
3
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参考文献
引证文献
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