EGFR与自噬在调节脑胶质瘤辐射敏感性中的关系

放射治疗是目前脑胶质瘤综合治疗最重要的治疗手段之一,但恶性脑胶质瘤产生的耐辐射作用限制了它的临床作用。因此,寻找胶质瘤耐辐射新机制具有十分重要的意义。研究表明,在脑胶质瘤放射治疗中,表皮生长因子受体(Epidermal growth factor receptor,EGFR)与脑胶质瘤的辐射敏感性,自噬与肿瘤辐射抗性产生机制相关;EGFR与自噬的发生存在某种联系,这种联系是否能作为增强脑胶质瘤辐射敏感性的理想靶点有待进一步深入研究。

黄芩素对TGF-β_1体外诱导肺成纤维细胞向肌成纤维细胞转化的影响

目的观察黄芩素(黄芩苷元,baicalein,BAE)对TGF-β1体外诱导肺成纤维细胞向肌成纤维细胞转化的影响。方法体外培养人胚胎肺成纤维细胞(WI-38),TGF-β1诱导后,通过Western blot检测细胞中α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)相关蛋白表达的变化,同时采用免疫组化法观察细胞形态变化。TGF-β1体外诱导肺成纤维细胞WI-38成肌成纤维细胞模型,再给予不同剂量的黄芩素,检测转化过程中相关蛋白α-SMA、collagen 1、Smad 2、p-Smad 2的表达变化。结果与模型组相比,黄芩素2 000nmol.L-1～125 nmol.L-1对TGF-β1体外诱导肺成纤维细胞向肌成纤维细胞转化有抑制作用。黄芩素组以剂量依赖性下调α-SMA(P<0.01)、collagen 1(P<0.01)、Smad 2(P<0.05)、p-Smad 2(P<0.05)蛋白的表达。结论黄芩素对TGF-β1体外诱导肺成纤维细胞向肌成纤维细胞的分化过程中有一定的抑制作用,该作用与下调α-SMA,抑制细胞内胶原合成及干预TGF-β/Smads信号通路有关。

熊果酸诱导人肝癌SMMC-7721细胞株凋亡机制的研究

目的:研究熊果酸(ursolic acid,UA)对人肝癌SMMC-7721细胞增殖抑制作用及诱导凋亡的相关机制。方法:MTT法测定UA对SMMC-7721细胞的生长抑制作用;Wright-Giemasa染色和Hoechst33258荧光染色法观察细胞的形态学变化;流式细胞仪检测细胞的凋亡率;RT-PCR检测细胞凋亡相关基因p53和Fas的表达。结果:UA对SMMC-7721细胞生长有明显的生长抑制作用,呈明显的时间-效应关系和浓度-效应关系,24 h的半数抑制浓度(IC50)为45.72μmol/L。Wright-Giemasa染色、Hoechst荧光染色证实了UA可以通过凋亡途径诱导SMMC-7721细胞发生死亡。流式细胞仪结果进一步证实了UA可以诱导SMMC-7721细胞凋亡,而且凋亡率增加呈一定的量效和时效关系。RT-PCR结果显示UA能够上调p53和Fas基因的表达。结论:UA在体外对SMMC-7721细胞具有抗增殖和诱导凋亡的作用。其机制可能与p53和Fas基因的变化有关。

表没食子儿茶素没食子酸酯对博莱霉素所致大鼠肺纤维化的干预作用及其机制研究

目的观察表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对实验性大鼠肺纤维化的干预作用及可能的作用机制。方法大鼠随机分为正常对照组、模型组、醋酸泼尼松组和EGCG大、中、小剂量组。通过气管内注入博莱霉素(BLM)复制大鼠肺纤维化模型,于造模后d 2各治疗组开始给药,给药后d7、14、28处死大鼠,取肺组织,观察形态学变化,并测定生化指标。结果EGCG能减少实验性肺纤维化大鼠肺组织中胶原沉积及降低肺系数(P<0.05,P<0.01),提高T-AOC、SOD水平(P<0.05,P<0.01),减轻肺部的病理损害。结论EGCG对BLM诱导产生的大鼠肺纤维化有一定的抑制作用。

蓝萼甲素对人肺癌A549细胞的作用及其机制

蓝萼甲素（glaucocalyxinA）是由唇形科香茶菜属植物香茶菜Rabdosia amethystoieds （Benth） Ham中分离提取出的二萜化合物，可抑制SiHa、Hela、HL-60等细胞株增殖。本文研究了蓝萼甲素对人肺腺癌A549细胞增殖的影响，并初步探讨其机制。

骨桥蛋白与肺纤维化的研究进展

骨桥蛋白(osteopontin,OPN)是一种分泌型糖基化磷蛋白,广泛存在于各种组织和体液中,具有多种生物学活性,整合素αvβ3是其主要受体。OPN主要参与细胞的增殖、分化、迁移及黏附。目前国内外对OPN的研究主要集中在骨吸收、血管生成、动脉粥样硬化、消化系统、泌尿系统、创面愈合、皮肤纤维化、肝纤维化、肾纤维化等方面,而在肺纤维化方面的研究报道较少,现将OPN与肺纤维化的关系作一综述。

小窝蛋白-1与特发性肺纤维化

小窝蛋白作为小窝膜内的支架蛋白,能够组织和浓缩特异性的脂质,修饰信号转导分子以及负性调控许多信号转导通路和生物过程。生物体内小窝蛋白表达异常可引起疾病,特发性肺纤维化就是其中一种。大量研究表明,小窝蛋白-1在特发性肺纤维化发病过程中表达明显下调,大大降低了其对多条信号传导通路如TGF-β/SMAD、ERK/MAPK、JNK/MAPK和PKC等的负性调控作用,进而导致肺泡上皮细胞损伤、成纤维细胞增殖及表型转化、细胞外基质(ECM)重塑,加速了肺纤维化发病进程。因此该文就小窝蛋白-1在特发性肺纤维化中的作用进行了综述。

姜黄素对白血病K562细胞增殖抑制作用的研究

目的:探讨姜黄素(curcumin)对白血病K562细胞增殖抑制的作用机制。方法:采用MTT法测定curcumin对K562细胞增殖的抑制作用;分别应用AO/EB和MDC荧光染色观察给药后凋亡和自噬的发生;检测LDH漏出率以观察用自噬特异性抑制剂3-MA后curcumin抑瘤作用的变化。结果:Curcumin可显著抑制K562细胞生长,诱导其发生自噬和凋亡;给药后阻断自噬其细胞毒性作用减弱。结论:curcumin能诱导白血病K562细胞的自噬和凋亡从而提高了抗癌的敏感性。

SREBPs的调节及在非酒精性脂肪肝形成机制中的研究进展

非酒精性脂肪肝(NAFL)是以肝细胞脂肪变性和脂肪沉积为病理特征,但无过量饮酒史的临床综合征,目前NAFL在国内外的发病率正呈明显上升趋势。固醇调节元件结合蛋白(SREBPs)是调控胆固醇、脂肪酸和甘油三酯及脂肪细胞分化过程的关键转录调控因子,现将它的调节以及在NAFL形成中的作用作一综述。

槲皮素对胶质瘤干/祖细胞的辐射致敏作用及其机制的初步探讨

本研究旨在探讨槲皮素对胶质瘤干/祖细胞辐射敏感性的影响及其机制。用槲皮素(Quercetin,Que)作用于已经建立的胶质瘤干/祖细胞系SU-2,用Western Blot和免疫荧光法检测自噬相关蛋白LC3的变化,以检测SU-2的自噬活性的改变。采用四甲基偶氮唑盐(3-(4,5-Dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide,MTT)比色法和克隆形成实验比较各处理组对SU-2的增殖抑制作用;应用Annexin V-FITC/PI流式细胞术检测不同因素处理SU-2后细胞凋亡情况的改变。实验结果表明:用槲皮素预先处理胶质瘤干/祖细胞系SU-2再辐照组较单纯辐照组的细胞增殖率降低(p<0.05),克隆形成率明显降低(p<0.05),细胞凋亡率显著增加(p<0.05)。这些结果提示,胶质瘤干/祖细胞的基础自噬活性很低,经槲皮素处理后,再经X线照射,胶质瘤干/祖细胞的自噬活性提高,辐射敏感性明显增加。

miRNA在肿瘤及肿瘤干细胞中作用的研究进展

microRNAs(miRNAs)是一类含量丰富的非蛋白编码小分子RNA,miRNAs主要是与靶mRNA的3′UTR区域结合,抑制mRNA的翻译或直接使mRNA降解,能调节多种生物功能。一些miRNAs,如miR-17-92,可能作为致癌基因;而另一些miRNAs,如miR-15,可作为抑癌基因,它们在肿瘤的发生、发展过程中起着重要作用。同时它们在肿瘤干细胞中也发挥着重要的作用。因此miRNAs正成为肿瘤的诊断和治疗的新靶点。

肝细胞内脂质平衡机制及其调节药物的研究进展

肝在脂类的消化、吸收、分解、合成及运输等代谢过程中起着十分重要的作用,肝细胞内脂质代谢稳态的变化是构成各种形式脂肪肝的基础。过氧化物酶体增殖物激活受体、肝X受体和法尼醇受体信号途径通过对肝细胞内脂肪和胆固醇的合成、代谢和转运的调控,共同维持着肝细胞内的脂质平衡稳态。本文综述了肝细胞内脂质平衡机制及其调节药物的研究进展,将为临床肝脂质代谢失衡的治疗方案提供理论基础,更有利于选择有效的药物进行针对性治疗。

U251细胞受X射线照射后的自噬现象

为探讨自噬在X射线对U251细胞增殖抑制的作用及机制,用X射线处理人胶质瘤细胞系U251细胞,采用WST-1法测定X射线对U251细胞增殖的抑制作用,MDC荧光染色和LC3免疫组化观察辐照后自噬的发生;WST-1法检测3-MA对辐照诱导的U251细胞毒性的影响。WST-1法显示,X射线对U251细胞生长有显著的抑制作用,且此作用呈明显的时间、剂量依赖性;MDC荧光染色和LC3免疫组化。结果表明,X射线可诱导U251细胞发生自噬;X射线照射前阻断自噬使细胞毒性增强。X射线照射能明显抑制U251细胞的生长,并诱导其发生自噬,但自噬对U251细胞可能起到一定的保护作用。

靶向自噬途径作为亨廷顿舞蹈病的潜在治疗策略

亨廷顿舞蹈病的病理特征是神经元内存在突变亨廷顿蛋白聚集体,自噬是清除突变亨廷顿蛋白的重要途径之一。深入研究自噬形成分子调控机制对于治疗亨廷顿舞蹈病有重要意义。自噬可通过抑制哺乳动物西罗莫司(雷帕霉素)靶蛋白(mTOR)活性来调节,同时,自噬也受非mTOR依赖途径的调控。通过调节这两条途径可加速突变亨廷顿蛋白的清除,进而降低突变亨廷顿蛋白毒性作用。本文综述了5条能够调节自噬作用的途径的研究进展。

阿司匹林对高脂高糖诱发的大鼠脂肪性肝炎的治疗作用

目的探讨阿司匹林治疗高脂高糖诱发大鼠脂肪性肝炎的可能性及作用机制。方法雄性SD大鼠随机分为正常对照组、模型组和阿司匹林10mg·kg-1组,在脂肪性肝炎造模成功后,阿司匹林组大鼠ig给予阿司匹林,每天1次,连续4周。测肝重系数,HE染色法观察肝脏组织病理变化,比色法测定血清及肝组织中总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)和空腹血糖(FBG)及血清谷丙转氨酶(GPT)含量;ELISA法测定肝组织中基质金属蛋白酶9(MMP-9)的含量。结果阿司匹林治疗4周后,对降低的肝系数无改善作用,病理学检查结果显示,阿司匹林可明显减少肝组织中的炎性细胞浸润(P<0.05)。大鼠血清TG,FBG和GPT水平分别从模型组的(0.55±0.14)mmol·L-1,(7.18±0.93)mmol·L-1和(85.7±7.1)U·L-1降至(0.31±0.08)mmol·L-1,(5.96±0.40)mmol·L-1和(71.6±16.0)U·L-1(P<0.01或P<0.05);肝组织中TC和TG水平亦降低,肝组织中MMP-9含量从模型组的(49±11)μg·g-1蛋白降至(24±7)μg·g-1蛋白(P<0.01)。结论阿司匹林对大鼠脂肪性肝炎有一定的治疗作用,其机制可能与降低肝组织中MMP-9含量有关。

自噬参与6-羟基多巴胺诱导多巴胺能神经元死亡的实验观察

目的观察自噬在6-羟基多巴胺(6-hydroxydopamine,6-OHDA)诱导的大鼠多巴胺能神经元中的激活,初步探讨自噬在多巴胺能神经元死亡中的作用。方法用脑立体定位黑质致密部给药法建立6-OHDA介导帕金森病大鼠模型,用透射电镜法观察多巴胺能神经元中自噬激活,免疫荧光法检测6-OHDA对多巴胺能神经元中LC3表达的影响。结果透射电镜显示,6-OHDA注射后6h至24h,被损伤大鼠黑质致密部神经元内溶酶体被激活,自噬小体形成。免疫荧光法显示模型大鼠与对照组相比,黑质多巴胺能神经元受损,TH阳性细胞明显减少,LC3表达量显著增加。结论自噬参与6-OHDA介导的多巴胺能神经元死亡过程。

阿司匹林体外抑制U251细胞增殖及其机制研究

目的研究阿司匹林体外抑制U251胶质瘤细胞的作用及其机制。方法采用MTT法观察药物对人胶质瘤细胞U251的增殖抑制作用;采用流式细胞仪检测U251细胞周期的变化;FITC-AnnexinⅤ/PI双标记检测U251细胞的凋亡;Western blot检测凋亡相关蛋白Bcl-2的表达和Caspase-3的激活。结果阿司匹林可明显抑制人胶质瘤细胞U251的增殖,细胞阻滞在G2/M期;诱导细胞发生凋亡,下调凋亡相关蛋白Bcl-2的表达以及诱导Caspase-3的激活。结论阿司匹林在体外对胶质瘤细胞U251有明显的抑制作用,并可诱导其凋亡。

槲皮素对LRRK2突变转基因PD模型果蝇的治疗作用

目的研究槲皮素对富亮氨酸重复激酶2(leucine-rich repeat kinase 2,LRRK2)基因突变所致帕金森病(Parkinson s disease,PD)模型果蝇的作用及其机制。方法杂交获得的PD转基因模型果蝇Ddc-Gal4;UAS-LRRK2/G2019S能在多巴胺神经元表达G2019S突变LRRK2,使用浓度为1、10、100μmol/L的槲皮素加药标准玉米培养基饲养,PD模型组和空白对照组使用不加药培养基,观察槲皮素对PD模型果蝇寿命和运动能力的生物学效应;取果蝇脑进行TH免疫荧光染色观察多巴胺神经元存活情况;取果蝇脑组织行蛋白免疫印迹检测TH、GCLC、p-LRRK2、p-p38MAPK等蛋白的表达。结果与对照组相比,10μmol/L的槲皮素对果蝇寿命及改善果蝇运动能力效果最佳,果蝇在第6周时运动能力出现显著改变,PD模型果蝇脑内多巴胺神经元的丢失明显得到保护。和未用药对照组果蝇相比,槲皮素降低了PD转基因模型果蝇的磷酸化LRRK2的水平(P<0.05),显示了抑制PD模型果蝇LRRK2激酶活性的作用。此外,槲皮素还可以活化抗氧化信号通路和抑制p38MAPK信号通路。结论槲皮素能通过活化抗氧化信号通路和抑制LRRK2激酶活性,进一步调节MAPK信号转导通路,起到降低LRRK2突变在PD转基因模型果蝇的神经毒性,保护脑内多巴胺神经元的作用。

自噬活性调节胶质瘤起始细胞辐射敏感性的体内实验研究

为探讨自噬调节对胶质瘤起始细胞移植瘤辐射敏感性的影响,建立裸小鼠皮下移植瘤模型,测量肿瘤体积大小,比较抑瘤率检测雷帕霉素对移植瘤的辐射增敏作用;建立裸小鼠颅内移植瘤模型,观察裸小鼠生存期,HE染色观察移植瘤的生长。取两种模型中各组肿瘤组织做Western blot,分析自噬相关蛋白LC3表达。结果显示,裸小鼠皮下移植瘤模型中,联合治疗组的肿瘤体积明显小于阴性对照组和单纯辐照组(P>0.05),抑瘤率明显增加(P>0.05);在裸小鼠颅内原位移植瘤模型中,联合治疗组的裸小鼠生存期较阴性对照组和单纯辐照组明显延长,HE染色中可见联合治疗组肿瘤生长局限,与周围正常脑组织界限清楚。Western blot结果显示,两种模型中,联合治疗组中的比值LC3II/LC3I显著增加。研究表明,自噬激动剂雷帕霉素通过激活胶质瘤起始细胞的自噬活性,增加胶质瘤的辐射敏感性。

姜黄素的抗氧化和抗炎作用研究进展

姜黄素(curcumin)是从姜科姜黄属植物姜黄、郁金、莪术的干燥根茎中提取的一种天然有效成分,药理作用广泛,毒性低,耐受性好,由于其经济价值,已成为开发热点。现代医学研究发现人体众多疾病的形成与自由基的形成、炎症反应的参与有关,姜黄素的多种药理活性与其抗氧化、抗炎作用有关。姜黄素的抗氧化活性和抗炎作用已引起国内外学者的广泛关注,就近年来姜黄素在抗氧化、抗炎两方面的有关研究予以综述。