抗病毒蛋白MxA的诱导和检测方法的实验研究

目的 研究抗病毒蛋白ＭｘＡ的表达及其活性。方法用ＩＦＮα２ｂ或３型腺病毒（Ａ＿３）分别对ＷＩ－３８细胞或人外周血单个核细胞（ＰＢＭＣｓ）作用 １２或２４ ｈ，并用Ｗｅｓｔｅｍ ｂｌｏｔ法或ＦＡＣＳ法，分别对Ｍ蛋白的表达进行定性和定量检测。采用微量细胞病变抑制法，对重组的ＭｘＡ和ＩＦＮα２ｂ进行抗病毒效应实验。结果 （１）低浓度的 ＩＦＮα２ｂ（＞ １×1０～＃ＩＵ／Ｌ）和Ａｄ＿３（＞２００ ＴＣＩＤ＿５０），均可诱导相应细胞表达 ＭｘＡ；（２）１０μｇ／Ｌ ＭｘＡ可抵抗２０个 ＴＣＩＤ＿（５０）的 ＨＳＶ－Ｉ、Ｐｏｌｉｏ． Ｖ感染 Ｖｅｒｏ细胞、Ａｄ＿３感染ＨｅＬａ细胞，抵抗２００个ＴＣＩＤ＿（５０）的ＶＳＶ感染Ｗｉｓｈ细胞。结论ＭｘＡ只能由干扰素（ＩＮＦα2ｂ）或病毒诱导产生，其具有广谱的抗病毒活性。

骨髓基质细胞的体外培养和向成骨及软骨分化的实验研究

目的研究骨髓基质细胞（ＢＭＳＣ）的成骨及软骨分化功能。方法 采用细胞静置贴壁培养法，体外培养了兔和儿童的ＢＭＳＣ，用传至２－３代兔ＢＭＳＣ和Ⅱ型胶原联合治疗兔膝关节软骨缺损；采用成骨诱导培养法研究儿童ＢＭＳＣ的成骨效应。结果（１）Ⅱ型胶原和ｂＦＧＦ对兔ＢＭＳＣ的贴壁和生长是有效的。（２）用兔ＢＭＳＣ和Ⅱ型胶原治疗１２周后，能使兔膝关节软骨缺损获得恢复，其软骨细胞分化明显。（３）用成骨诱导培养法，可使儿童ＢＭＳＣ骨钙素分泌水平比常规对照组升高８～１０倍，并可见有典型的成骨化的黑色矿化细胞区。结论骨髓基质细胞具有成骨和软骨分化功能。

儿童骨髓基质细胞系免疫细胞化学初步研究

目的 了解儿童骨髓基质细胞的起源、组成及传代过程中的细胞骨架。方法 采用体外培养和免疫细胞化学染色技术 ,观察波形纤维蛋白 (Vimentin)、结蛋白 (Desmin)、α -平滑肌肌动蛋白 (α -SmoothMuscleActin)和VIII因子相关抗原 (VonWillebrandFactor)在儿童骨髓基质细胞系中的表达。结果 Vimentin在原贴壁基质细胞系由原代传至 5代的细胞中 ,其表达逐渐下降 ,而在再贴壁基质细胞传至第 3代中表达最高 ;Desmin、α -SmoothMuscleActin单克隆抗体和VonWillebrandFactor抗体染色呈阴性。结论 本结果提示本文中骨髓基质细胞来源于间充质 ,Vimentin的表达与细胞的分化、增殖有关 ,体外培养时骨髓基质细胞的组成、分化可能与培养条件有关。