CpG DNA在寄生虫感染免疫中的作用

近年研究发现,细菌胞嘧啶鸟嘌呤二核苷酸(CpGDNA)和合成的含CpG序列的寡脱氧核苷酸(CpG 0DN)具有强烈的非特异性的免疫刺激作用,其共同特征为都含有一些具有免疫学活性的短核苷酸序列.

可诱导共刺激分子(ICOS)在寄生虫感染免疫中的作用

ICOS为近年来新发现的另一类协同刺激分子 ,是CD2 8家族的新成员 ,它与经典的CD2 8、CTLA 4共同参与对T细胞功能的调节 ,尤其对已活化的效应性T细胞有重要的调节作用。该文主要综述了ICOS在寄生虫感染免疫中的作用。

二十一世纪医学人才素质教育模式探讨

要培养二十一世纪需要的高素质医学人才,关键是实施素质教育,更新教育理念,发挥综合性大学优势,加强医科与文、理、工科的结合,建立新的教学体系,加强人文教育,促进文、理科教育与医科教育的结合,形成新的医学人才培养模式。

面向二十一世纪高级医学人才知识体系与培养模式探讨

随着 2 1世纪的到来 ,我国传统医学教育的知识体系和培养模式已越来越难以适应现代医学发展和新时期群众对医疗服务的需求。因此 ,必须加强医学生整体素质培养 ,主要是思想道德素质、医学科学素质、人文文化素质、心理素质和身体素质这几个方面的重点培养 ,构建医学生新的知识体系和培养模式 ,以适应医学人才发展的需要。

苏州市区及郊区学龄前儿童蛲虫感染的调查分析

调查苏州市 2 86 3名学龄前儿童蛲虫感染结果表明 ,其感染率为 2 1.2 % ,郊区幼儿感染率显著高于市区幼儿 ,5～ 7岁幼儿感染率明显高于 2～ 4岁幼儿。

弓形虫P30乳酸球菌口服疫苗诱导小鼠的细胞免疫反应及抗体生成的动态过程

目的 观察弓形虫P30乳酸球菌口服疫苗诱导小鼠产生的细胞免疫效果和抗体IgG的动态发生过程。方法 口服免疫BALB/c小鼠 ,一个月后 ,取鼠脾细胞作ConA刺激淋转试验 (MTT法 )及T细胞亚群的测定 ;不同免疫时间段内 ,收集实验鼠血清 ,ELISA法检测抗体水平的变化。结果 P30乳酸球菌口服免疫组脾淋巴细胞ConA刺激后增殖能力比两对照组显著提高 ,CD+ 4 和CD+ 8的百分数均明显升高 ;第 12周 (即最后一次免疫结束一个月 ) ,P30乳酸球菌口服免疫组检测到特异性抗体IgG。结论 P30乳酸球菌口服疫苗有效地激发了小鼠细胞免疫反应 ,特异性抗体IgG在免疫结束一个月后生成明显。

钙通道阻滞剂与肌动蛋白解聚/稳定剂对吡喹酮体外杀日本血吸虫作用的效应影响

目的探索吡喹酮(praziquantel,PZQ)对日本血吸虫的药物靶点及作用机制。方法在日本血吸虫单性尾蚴感染昆明小鼠6 w后,采用灌注法经鼠肝门静脉收集日本血吸虫雄性成虫。在DMEM(Dulbecco-modified Mini mum Eagle'Medium)培养液内,将雄性成虫分别与能干扰细胞钙通道功能的各种药理学成分(钙通道阻滞剂及肌动蛋白解聚剂或稳定剂)孵育1h,然后在培养液内加入临界致死剂量的PZQ(14μmol/L)与虫体孵育过夜(16h)。次,无菌生理盐水洗涤虫体3次,更换无药物的新鲜培养液继续培养虫体5d,每天置于体视显微镜下观察并记录。结果d晨上午正常情况下,14μmol/L的PZQ药物体外实验可以杀死大部分日本血吸虫雄性成虫,而与肌动蛋白解聚剂细胞松弛素D(cytochalasin D,CyD)预孵育1h的虫体,能够完全拮抗14μmol/L浓度PZQ的杀虫效应,虫体100%存活;与钙通道阻滞剂(calciumchannel blockers,CCBs)尼群地平和尼非地平预孵育1h的虫体,部分拮抗14μmol/L浓度PZQ的杀虫效应,大约50%虫体存活。结论PZQ作用血吸虫的药物靶点可能与血吸虫的钙通道有关。

协同刺激分子B7-1/2对日本血吸虫感染小鼠Th1/Th2细胞因子表达水平的影响

目的 观察协同刺激分子B7 1 /2 (CD80 /CD86 )对日本血吸虫感染小鼠后Th1 /Th2细胞因子水平的影响 ,探讨B7 1 /2介导Th1 /Th2免疫偏移对控制血吸虫虫卵肉芽肿的作用。方法 取小鼠感染后 6、8、1 0和 1 2w的脾淋巴细胞用抗CD80mAb和抗CD86mAb处理后培养 72h ,用ELISA双抗体夹心法测定培养上清中IFN γ和IL 4的表达水平的动态变化。结果 抗CD80mAb和抗CD86mAb对IFN γ的抑制作用不明显 ,但二者均能显著抑制IL 4的表达水平 ,尤其是抗CD86mAb对IL 4抑制作用非常显著。结论 通过干预B7∶CD2 8协同刺激途径可以调节Th1 /Th2细胞因子的表达水平 ,而且B7 2分子对Th2反应的影响作用大于B7 1分子。B7∶CD2 8协同刺激途径可以调节Th1 /Th2免疫偏移 。

日本血吸虫感染小鼠血清中虫体核酸来源的实验研究

目的探讨日本血吸虫感染小鼠血清中核酸的来源,为血吸虫病核酸诊断方法的早期诊断及疗效考核提供理论依据。方法用PCR法检测单、双性感染小鼠1w^12w血清中的特异的日本血吸虫DNA片断。结果在单性感染小鼠1w^4w的血清可通过PCR扩增到特异性DNA片段,感染小鼠5w后的血清中则未能测出阳性结果;在双性感染小鼠组中,应用PCR从1w^12w的血清中均可扩增到特异的阳性条带。结论在日本血吸虫感染早期,小鼠血清中的核酸可能主要来自在体内移行的日本血吸虫童虫及虫体在发育过程中的代谢产物;在感染的急性期和慢性期,血清中的核酸则可能主要来自小鼠体内崩解死亡的虫卵组织。

共刺激分子B7和CD40对日本血吸虫感染小鼠Th1/Th2免疫偏移的调控作用

为观察干预B7 CD2 8和CD4 0 CD4 0L共刺激信号对Th1 Th2细胞因子表达水平和Th1 Th2免疫偏移的调控作用 ,分别取小鼠感染日本血吸虫后 6、8、1 0和 1 2周的脾淋巴细胞经抗CD80 (B7 1 )mAb、抗CD86 (B7 2 )mAb、抗CD4 0mAb和抗CD4 0LmAb处理后培养 72h ,用ELISA双抗体夹心法测定培养上清中IFN γ和IL 4的表达水平的动态变化并分析干预 2种不同的共刺激信号对Th1 Th2免疫偏移的影响。结果显示抗CD80mAb和抗CD86mAb均能显著抑制IL 4的表达水平 ,尤其是抗CD86mAb对IL 4抑制作用尤为明显。抗CD4 0mAb和抗CD4 0LmAb也能影响Th2细胞因子的表达。其中以阻断CD4 0分子的作用更为显著。结果提示B7 CD2 8和CD4 0 CD4 0L共刺激信号可以调节Th1 Th2细胞因子的表达水平和调控Th1 Th2免疫偏移。干预B7 CD2 8和CD4 0 CD4 0L介导的共刺激信号调控Th1

细胞信号转导抑制剂介导Th1/Th2免疫偏移对血吸虫虫卵肉芽肿的影响

目的 观察酪氨酸蛋白激酶(TPK)、蛋白激酶C(PKC)和磷酯酰肌醇-3-激酶(P13-K)特异性抑制剂(分别为tyrphostin-25、D-sphingosine和wortmannin)对日本血吸虫感染小鼠虫卵肉芽肿病变的影响,并探讨其作用机制。 方法 于小鼠感染日本血吸虫后第35天起,经尾静脉分别注射3种信号转导分子抑制剂,连续5 d。在小鼠感染后6和8wk,观察小鼠肝肉芽肿病变,并用ELISA夹心法和硝酸还原酶法分别测定小鼠血清IFN-γ、IL-4和一氧化氮(NO)水平。结果 感染小鼠应用TPK和PKC抑制剂后均可显著抑制肝肉芽肿病变,PKC抑制剂可使肉芽肿减少率达56.2％～63.4％(P<0.01)。PKC抑制剂主要抑制Th2细胞因子IL-4的表达,其抑制率为34.1％和65.6％(P<0.01),而对NO水平的检测结果进一步证明了PKC抑制剂对IL-4表达的抑制作用。 结论 在日本血吸虫感染早期应用PKC抑制剂干预T淋巴细胞信号转导可显著抑制小鼠肝肉芽肿病变,其机制可能是由于抑制了Th2优势应答并介导Th2向Th1免疫反应偏移。

日本血吸虫不同免疫原对小鼠Th1/Th2免疫偏移的影响

目的 观察单、双性日本血吸虫感染小鼠后Th1/Th2细胞因子水平的动态变化 ,探讨日本血吸虫不同免疫原对Th1/Th2免疫偏移的影响及与虫卵肉芽肿形成的相关性。方法 用ELISA夹心法检测单、双性日本血吸虫感染小鼠及单性感染 8w双性再感染 0～ 12w ,小鼠脾淋巴细胞培养上清Th1细胞因子IL - 2、IFN -γ和Th2细胞因子IL - 4表达水平。结果 单性感染小鼠 6～ 12w在脾淋巴细胞培养上清中可测出一定量的IL - 2和IFN -γ ,但无明显动态变化 ,而IL - 4未能测出 ;双性感染小鼠IL - 2和IFN -γ在感染后 4～ 6w开始上升 ,8w达高峰 ,随后下降 ,IL - 4则在感染后 8w时迅速上升且随着感染时间延长而明显升高 ,单性感染 8w双性再感染 4w时 ,小鼠脾淋巴细胞培养上清IL - 2、IFN -γ和IL - 4表达水平即迅速升高且在双性再感染 8～ 12w逐渐增强。结论 日本血吸虫不同免疫原对Th1/Th2免疫偏移的影响作用不同 ,Th1优势应答可能主要由虫体抗原诱导 ,Th2优势应答可能主要由虫卵抗原 (SEA)所诱导 。

间日疟原虫不同MSP-1等位基因型形态学观察

目的 比较两种不同等位基因型间日疟原虫生物学形态特征。方法 现场采集间日疟病人血样并进行基因分型 ,镜下观察形态并测量大小。结果与结论 72份现场分离株基因分型为Sal- 1型 4 0份 ,Belem型 2 5份 ,混合感染 7份 ,均查到典型的间日疟原虫 ,6例多重感染病例均发现在海南分离株 ,多重感染与基因型混合感染无关联。测量正常红细胞、寄生红细胞、环状体以及核大小差别有显著意义 ,Belem型比Sal- 1型大 。

NO介导Th1/Th2免疫偏移与日本血吸虫感染小鼠肝肉芽肿病变的作用

目的 观察日本血吸虫感染小鼠肝肉芽肿病变与一氧化氮 (NO)、Th1/Th2细胞因子水平的动态变化 ,探讨NO介导Th1/Th2免疫偏移在血吸虫卵肉芽肿病变中的作用。方法 采用石蜡切片 ,HE染色后观察感染小鼠肉芽肿病变。用硝酸还原酶法和ELISA夹心法分别检测日本血吸虫感染小鼠 0～ 12周血清及脾CD+ 4 T淋巴细胞培养上清NO、IFNγ和IL - 4表达水平 ,并进行相关分析。结果 感染小鼠 0～ 12周血清和脾CD+ 4 T淋巴细胞培养上清NO表达水平与小鼠肝肉芽肿病变动态相一致 ,并呈显著正相关 ,与IFNγ表达水平呈显著正相关 ,而与IL - 4在小鼠感染慢性期 (12周 )呈显著负相关。结论 NO在日本血吸虫感染小鼠肝肉芽肿病变过程中可能是一种与Th1/Th2细胞因子具有同样重要作用的调节因子 ,并可能是通过调节Th1/Th2细胞因子而发挥作用的 。

弓形虫P30乳酸球菌口服免疫小鼠血清中IFN-γ、IL-2及NO含量的测定

目的观察弓形虫P30乳酸球菌(L.lactis/P30)口服免疫鼠血清中细胞因子IFN-γI、L-2及NO的变化情况。方法L.lactis/P30口服免疫BALB/c小鼠,以gp42乳酸球菌组和生理盐水组为对照,在第3周、第9周及第12周分别收集各实验组小鼠血清,ELISA法测定血清IFN-γI、L-2含量;酶法测定NO浓度。结果L.lactis/P30口服免疫鼠血清中IFN-γI、L-2含量均显著高于两对照组,血清中NO含量随着免疫时间延长与两对照组差异逐渐明显。结论L.lactis/P30口服免疫能有效刺激小鼠细胞因子IFN-γ和IL-2的产生及NO分子的释放。

IL-12联合IL-2在伯氏疟原虫红内期感染中的免疫调节作用

目的探讨IL-12联合IL-2在抗P.berghei红内期感染中的免疫调节作用。方法BALB/c小鼠接种5×105个感染P.berghei的RBC,同时分别给予0.03μg/dIL-12、40U/dIL-2或IL-12联合IL-2处理,连续用药6d,观察小鼠原虫血症变化及存活时间。通过淋巴细胞增殖转化试验、T淋巴细胞亚群测定及NK细胞杀伤活性检测等方法,观察细胞免疫应答水平。结果IL-12联合IL-2处理组可较单独IL-12或单独IL-2及感染对照组显著推迟原虫血症达峰值的时间与明显延长小鼠的存活时间,IL-12或联合IL-2组小鼠在原虫血症达30%时开始死亡,而单独IL-2或感染对照组小鼠在原虫血症低于13%时已全部死亡。IL-12联合IL-2处理组脾淋巴细胞总数、CD4+与CD8+百分比、3H-TdR掺入量及NK细胞杀伤活性均较其它各处理组及感染对照组显著升高。结论IL-12与IL-2二者可协同促进脾淋巴细胞的增殖及增强NK细胞杀伤活性以诱导抗P.berghei红内期感染的免疫保护作用。

人重组磷脂酶D_2变构体cDNA和蛋白质序列分析

采用VectorNTI、DNATools等计算机分析软件及信息库 ,研究人重组磷脂酶D2 (rhPLD2 )变构体的生物学特征。rhPLD2具有多种基因结构和功能调控元件 ,其编码的蛋白质具有发挥功能所必需的活性保守基序和一定的空间结构 ,表明rhPLD2应是一种具有一定生物学功能的异质性蛋白质。

CpG ODN对日本血吸虫感染小鼠Th1/Th2细胞因子表达水平的影响

目的 观察CpGODN对日本血吸虫感染小鼠后不同时期Th1/Th2细胞因子表达水平的影响 ,探讨CpGODN介导Th1/Th2免疫偏移对控制血吸虫虫卵肉芽肿的作用。方法 取小鼠感染后 4、8、12和 16周的脾淋巴细胞经CpGODN和N CpGODN处理后 ,培养 72h ,用ELISA双抗体夹心法测定培养上清中IFNγ和IL - 4表达水平的动态变化。结果 CpGODN能显著上调IFNγ的表达水平 ,下调IL - 4的表达水平 ,而N -CpGODN对IFNγ及IL - 4表达水平无显著影响。CpGODN处理后小鼠脾淋巴细胞Th2分化指数明显减小。结论 CpGODN可以调节Th1/Th2细胞因子的表达水平 ,显著上调Th1型细胞因子水平和下调Th2型细胞因子水平 ,介导小鼠Th1型细胞免疫优势应答 ,为控制日本血吸虫慢性肉芽肿病变提供了一种新途径。