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人PD-L1基因转染细胞株的构建及其对活化的Jurkat细胞增殖和凋亡的影响
被引量:
3
1
作者
宋莉
葛彦
+5 位作者
曹莎莎
徐永芳
潘建忠
谢炜
居颂文
居颂光
《江苏大学学报(医学版)》
CAS
2015年第2期123-127,共5页
目的:构建稳定表达人PD-L1分子的基因转染细胞株,观察其对活化的Jurkat细胞增殖和凋亡的影响。方法:将编码人PD-L1分子的全长c DNA重组入反转录病毒表达载体p EGZ-Term-R,将重组载体p EGZ-Term-R/PD-L1和辅助病毒载体用脂质体法共转染2...
目的:构建稳定表达人PD-L1分子的基因转染细胞株,观察其对活化的Jurkat细胞增殖和凋亡的影响。方法:将编码人PD-L1分子的全长c DNA重组入反转录病毒表达载体p EGZ-Term-R,将重组载体p EGZ-Term-R/PD-L1和辅助病毒载体用脂质体法共转染293T细胞,包装具有感染能力的完整病毒;收集含有完整重组反转录病毒的293T细胞培养上清,感染L929细胞,筛选并获得G418抗性的基因转染细胞。采用流式细胞术检测表达PDL1的基因转染细胞,命名为L929/PD-L1。采用PHA活化T细胞系来源的细胞株Jurkat,并将其与丝裂霉素预处理的L929/PD-L1细胞共培养,用细胞计数法观察L929/PD-L1细胞株对活化的Jurkat细胞增殖能力的影响,并检测其凋亡情况。结果:成功获得了稳定表达人PD-L1基因的转染细胞株L929/PD-L1。PHA可诱导Jurkat细胞活化并表达PD-1分子;L929/PD-L1与PHA刺激后的Jurkat细胞共培养,可抑制Jurkat细胞增殖,促进其凋亡。结论:成功构建了稳定表达人PD-L1的细胞株,PD-L1分子抑制活化的Jurkat细胞增殖,促进其凋亡。
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关键词
PD-L1
基因转染细胞株
JURKAT细胞
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职称材料
题名
人PD-L1基因转染细胞株的构建及其对活化的Jurkat细胞增殖和凋亡的影响
被引量:
3
1
作者
宋莉
葛彦
曹莎莎
徐永芳
潘建忠
谢炜
居颂文
居颂光
机构
苏州大学基础与生物科学学院免疫学系
南京医科
大学
附属
苏州
医院消化
系
疾病与营养研究中心
出处
《江苏大学学报(医学版)》
CAS
2015年第2期123-127,共5页
基金
国家自然科学基金资助项目(31370887
81373149
+2 种基金
31200661)
江苏省自然科学基金资助项目(BK2012621)
苏州市科技发展计划项目(SYS201363)
文摘
目的:构建稳定表达人PD-L1分子的基因转染细胞株,观察其对活化的Jurkat细胞增殖和凋亡的影响。方法:将编码人PD-L1分子的全长c DNA重组入反转录病毒表达载体p EGZ-Term-R,将重组载体p EGZ-Term-R/PD-L1和辅助病毒载体用脂质体法共转染293T细胞,包装具有感染能力的完整病毒;收集含有完整重组反转录病毒的293T细胞培养上清,感染L929细胞,筛选并获得G418抗性的基因转染细胞。采用流式细胞术检测表达PDL1的基因转染细胞,命名为L929/PD-L1。采用PHA活化T细胞系来源的细胞株Jurkat,并将其与丝裂霉素预处理的L929/PD-L1细胞共培养,用细胞计数法观察L929/PD-L1细胞株对活化的Jurkat细胞增殖能力的影响,并检测其凋亡情况。结果:成功获得了稳定表达人PD-L1基因的转染细胞株L929/PD-L1。PHA可诱导Jurkat细胞活化并表达PD-1分子;L929/PD-L1与PHA刺激后的Jurkat细胞共培养,可抑制Jurkat细胞增殖,促进其凋亡。结论:成功构建了稳定表达人PD-L1的细胞株,PD-L1分子抑制活化的Jurkat细胞增殖,促进其凋亡。
关键词
PD-L1
基因转染细胞株
JURKAT细胞
Keywords
PD-L1
gene transfected cell line
Jurkat cell
分类号
R392 [医药卫生—免疫学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
人PD-L1基因转染细胞株的构建及其对活化的Jurkat细胞增殖和凋亡的影响
宋莉
葛彦
曹莎莎
徐永芳
潘建忠
谢炜
居颂文
居颂光
《江苏大学学报(医学版)》
CAS
2015
3
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