形成性评价对医学生物化学理论教学的启示

生物化学是医学教育中一门重要的专业基础课程,其内容相对枯燥,且考核形式多采用期末集中考试为主。提高学生的学习兴趣和生物化学的教学效果迫在眉睫,而形成性评价的发展为生物化学的理论教学改革提供了一个新的方向,采用了"平时理论知识考核+期末理论知识考核"相结合的综合评价体系,充分调动了教师教学中的主动性、创造性和学生学习的主动性、积极性,有效提高了医学生物化学的教学效果。

医学生物化学全英文教学探讨

全球化趋势下,本科全英文教育尝试成为必然。而对全日制医学本科生进行全英文教育是一项必要但挑战性很强的工作。文章对全日制医药学生生物化学的全英文教学进行了总结,对授课中存在的问题进行了分析,以提高教学质量,帮助学生掌握基础知识为出发点;在增加学生兴趣,注重英文思维能力,激发学生主观能动性等方面提出了多种解决方法。

虚拟实验在生物化学实验中的应用

为了培养学生的实践能力,激发学生自主学习的兴趣,充分利用实验教学资源,文章对如何将生物化学虚拟实验引入传统实验教学,做出了实验教学改革的必要性分析并提出了改革方案,旨在探讨虚拟实验与传统实验的合理结合,实现两种模式的优势互补,提高实验教学质量。

科研导向型教学在高级生物化学中的应用

研究生是科研体系的中坚力量和后备军。文章针对研究生高级生物化学课程教学中存在的难点和研究生的身心特点,总结了一系列科研导向型的教学改革方法,包括课程内容体系的更新、基于问题的启发式教学、基于创新的案例式教学以及课程评价体系的改变,旨在引导研究生更快进入科研实践的角色。

β3GalT7基因转染HL-60细胞及对其生物学行为的影响

目的:初步探讨人类β1,3半乳糖基转移酶7(β3GalT7)基因对HL60细胞的细胞周期、侵袭能力等方面的影响。方法:通过脂质体介导将本实验室构建好的β3GalT7真核正义表达载体pEGFP-C1-T7-Sense和反义表达载体pEGFP-C1-T7-AntiSense转染入HL60细胞;流式细胞仪分析各细胞株的细胞周期改变;Transwell侵袭实验检测β3GalT7对HL60细胞侵袭转移能力的影响。结果:随着β3GalT7表达的增高,G2+S期细胞增多,且细胞侵袭能力增强;而转染反义表达载体pEGFP-C1-T7-AntiSense的结果是相反的。结论:过度表达β3GalT7的HL-60细胞株体外增殖和侵袭能力增强。

RBL教学模式培养“5+3”一体化医学生科研思维的探索

大数据时代对全面培养和提升医学“5+3”一体化专业学生的科研素养提出了全新的要求。通过构建以解决医学问题为中心,设计性综合性数据分析实验为载体,学生主动参与和教师辅助指导相结合的RBL教学模式,旨在更好地满足医学“5+3”一体化专业教学模式发展的新趋势,探索提高医学生综合素质和竞争力的新模式。

创新创业背景下医学本科生科研能力培养的探索

近年来先后的多项政策,不断深化“高等学校创新创业教育改革,是国家实施创新驱动发展战略、促进经济提质增效升级的迫切需要,是推进高等教育综合改革、促进高校毕业生更高质量创业就业的重要举措”。本文就如何培养大学生创新创业能力成为高校教学改革的新方向:如何结合医学生创新训练项目分阶段培养学生的创新思维,创新能力和科研素质,阐述了“双创”教育结合创新培训项目的一些举措和体会。

丁酸钠联合Feed促进293F细胞表达PD-1嵌合抗体

目的:探讨丁酸钠和CHO CD Efficient Feed(以下简称Feed)对293F细胞表达程序性死亡受体-1(PD-1嵌合抗体产量的影响。方法:采用无血清培养基,通过哺乳动物293F细胞瞬时表达抗人PD-1嵌合抗体;在细胞对数生长期添加不同浓度丁酸钠(0,0. 5,1,2,4 mmol/L)处理293F细胞,连续培养7 d,分别在第1,3,5天添加Feed。同时,每24 h对培养细胞进行取样,自动细胞计数仪检测细胞总量和活性,流式细胞术检测细胞周期。结果:丁酸钠联合Feed可有效提高293F细胞表达PD-1嵌合抗体,最高表达量为57.4 mg/L,是对照组产量的近8倍;丁酸钠可抑制细胞过度增殖,并阻滞细胞周期G_1期,同时添加Feed可增加抗体产量。结论:丁酸钠控制293F细胞适度增殖,Feed则有利于提高细胞活力,两者作为细胞培养的有效补充剂可显著提高PD-1嵌合抗体的产量。

加强医科生科研思维的早期培养和训练

本文主要探讨通过课堂讲解分析实例、参与研究领域的专题讲座以及尽早进入科研小组参加科研工作,来进行医科生科研思维的早期培养和训练,从而增强医学院校培养和选拔实用型科研人才的成效。

吡咯并喹啉醌对急性放射性皮肤损伤大鼠机体自由基的清除作用

目的:探讨高能电子射线照射大鼠急性皮肤损伤后,吡咯并喹啉醌(pyrroloquinoline quinone,PQQ)对放射损伤后皮肤和血清中自由基的清除作用。方法:采用电子直线加速器照射制作动物模型,以PQQ口服和辐照区喷射的给药方式,观察皮肤、血清中NOS,MDA和SOD含量的改变。结果:与辐照未给药组大鼠相比,应用PQQ的大鼠皮肤、血清中的MDA和NOS显著下降(P<0.05),但高于正常组大鼠(P<0.05);皮肤中SOD含量明显升高(P<0.05),但低于正常组大鼠(P<0.05),血清中SOD变化不明显。结论:PQQ能有效提高自由基清除酶系活性,部分清除电子直线加速器照射后产生的自由基,但达不到正常水平。

反义caveolin-1对实质肿瘤细胞中β3-半乳糖基转移酶7表达的调节作用

目的:研究反义caveolin-1对实质肿瘤细胞中β3-半乳糖基转移酶7(β3GalT7)表达的调节,以期阐明caveolin-1与β3GalT7的相关性。方法:运用脂质体介导转染人工合成的caveolin-1反义核苷酸(ASODN)至人类4种实质肿瘤细胞中,通过荧光显微镜、RT-PCR及蛋白质印迹检测β3GalT7表达的变化。结果:转染反义caveolin-1后的4种实质肿瘤细胞中β3GalT7均有明显的增强。结论:表明caveolin-1调节肿瘤细胞中β3GalT7的表达,且与β3GalT7的表达呈负相关。

DDX4(VASA)在卵巢癌中的表达及其临床意义

目的 :研究DDX4(VASA)在卵巢癌中与CD133基因和蛋白水平的差异性表达,从而探讨其可能的临床应用价值。方法:利用卵巢癌细胞株SKOV3,从基因和蛋白水平检测DDX4(VASA)和CD133表达的差异;同时以体内卵巢肿瘤组织为研究对象,利用免疫组化的方法检测DDX4(VASA)在其中的表达情况。结果:(1)在卵巢癌细胞SKOV3中,DDX4(VASA)蛋白和m RNA的表达水平明显高于CD133;(2)DDX4(VASA)在卵巢癌组织中高表达,且在不同卵巢癌组织类型中分布位置不同。结论:DDX4(VASA)的高表达与卵巢癌的发生、发展密切相关,检测DDX4(VASA)在卵巢癌中的差异性表达,对了解卵巢癌的生物学行为和完善卵巢癌的早期诊断有一定的临床价值。

β3GnT8基因对HL60细胞体外侵袭能力的影响

目的：初步探讨β3GnT8/GalT7基因对HL60细胞体外侵袭的作用。方法通过脂质体介导将实验室构建好的β3GnT8真核正义表达载体pEGFP-C1-T8-Sense和反义表达载体pEGFP-C1-T8-AntiSense转染入HL60细胞；RT-PCR和Western blot检测浸润转移相关的功能基因TGFβ1、MMP2、MMP14在mRNA水平和蛋白质水平的表达变化；Transwell侵袭实验检测β3GnT8对HL60细胞侵袭转移能力的影响。结果随着β3GnT8表达上调，细胞侵袭能力高于对照组（P＜0.05），MMP2、MMP14在mRNA和蛋白质水平的表达上调，而TGFβ1表达下调；随着β3GnT8表达下调，细胞侵袭能力下降，MMP2、MMP14在mRNA和蛋白质水平的表达下调，而TGFβ1表达上调。结论β3GnT8可在体外增强HL60细胞的侵袭能力，而该作用可能源于它能够诱导肿瘤侵袭相关蛋白的表达变化。

NF-κB1基因多态位点rs4648127与胃癌易感性的研究

目的:探讨位于核因子κB1(nuclear factor kappa subunit 1,NF-κB1)基因内含子区的多态性位点rs4648127与中国人群胃癌易感性的关联。方法:采用病例-对照研究,以363例胃癌患者和506例年龄、性别相匹配的健康对照者作为研究对象,用高分辨率熔解曲线(high resolution melting,HRM)方法对rs4648127多态位点进行基因分型,最后通过SPSS 19.0统计分析软件对分型数据进行统计分析。结果:rs4648127位点的突变基因型CT与胃癌易感性有显著的相关性(P=0.005,OR=0.45,95%CI=0.25~0.79)。根据吸烟及饮酒等因素分层分析显示,在年龄组、性别组、非吸烟组及非饮酒状态组中均体现出CT基因型能够显著降低胃癌易感性风险(P<0.05)。结论:NF-κB1多态性位点rs4648127能够显著降低中国人群胃癌易感性。

人类β1,3半乳糖基转移酶7对人4IgB7-H3的修饰作用初探

目的:探讨人4IgB7-H3基因转染人胃癌细胞株SGC7901后人类β1,3半乳糖基转移酶7(β1,3-galacto-syltransferase 7,β3GalT7)的表达变化,以期发现4IgB7-H3与β3GalT7的相互关系。方法:脂质体介导重组逆转录病毒载体pEGZ-Term/4IgB7-H3转染SGC7901细胞,筛选获得稳定表达4IgB7-H3的亚克隆细胞株,通过RT-PCR和蛋白质印迹方法检测β3GalT7的表达。结果:成功获得稳定表达4IgB7-H3的亚克隆细胞株SGC7901/4IgB7-H3;β3GalT7随4IgB7-H3的表达上调而上调。结论:4IgB7-H3蛋白的修饰成熟可能需要β3GalT7的作用。

壳聚糖对白血病细胞糖基转移酶表达的影响及对细胞的抑制作用

目的:观察壳聚糖对白血病细胞(K562,SHI-1)的作用。方法:以不同浓度的壳聚糖处理白血病细胞K562后,运用RT-PCR方法检测实验组K562细胞中多肽:N-乙酰氨基半乳糖转移酶-2(ppGalNAc-T2)mRNA表达差异。另用不同浓度的壳聚糖分别作用于白血病K562细胞和SHI-1细胞,MTT法检测壳聚糖对两种细胞的相对抑制率。结果:与阴性对照组比较,实验组K562细胞的ppGalNAc-T2表达降低,且随壳聚糖浓度升高,表达量进一步减少;MTT实验显示不同浓度的壳聚糖对K562细胞和SHI-1细胞均有抑制作用,并呈浓度依赖性。结论:壳聚糖对肿瘤细胞有一定的抑制作用,同时还可以减少ppGalNAc-T2在mRNA水平的表达。

偏钒酸钠对白血病细胞株HL-60细胞增殖和凋亡的影响及其与N-乙酰氨基半乳糖转移酶2的相关性

目的探讨偏钒酸钠(NaVO3)对HL-60细胞增殖及凋亡的影响,初步判断该影响与ppGalNac-T2的相关性。方法用不同浓度NaVO3作用HL-60细胞后,采用MTT法观察HL-60细胞生长抑制情况,琼脂糖凝胶电泳检测DNA条带,Hoechst 33258染色后荧光显微镜观察细胞核的变化,流式细胞术(FCM)检测细胞凋亡率,分子对接与分子动力学模拟初步判断钒对糖基转移酶ppGalNac-T2活性的影响。结果 MTT检测结果显示,低浓度的Na-VO3促进细胞增殖,高浓度的NaVO3抑制细胞的生长;高浓度NaVO3作用HL-60细胞24 h可见到DNA出现梯形条带,且细胞核呈现核浓缩现象;FCM测定不同浓度NaVO3(5×10-7、1×10-7、1×10-8、1×10-9、1×10-11mol/L)处理HL-60细胞24 h后细胞凋亡率分别是(69.1±2.3)%、(56.3±4.9)%、(39.6±6.5)%、(31.4±1.6)%、(12.2±3.4)%,明显高于HL-60细胞自然凋亡率(均P<0.05);VO3可以与N-乙酰氨基半乳糖转酶2(ppGalNac-T2)的活性中心相关结构形成氢键,并影响ppGalNAc-T2催化相关柔性结构的构象变化,进而影响底物进入和离开酶的活性中心,从而抑制酶的催化功能。结论 NaVO3可以诱导HL-60细胞凋亡,该作用可能与ppGalNAc-T2活性改变相关。

FOXL2在正常宫颈及宫颈癌组织中的表达及临床意义

目的研究转录因子FOXL2在正常宫颈组织及宫颈癌组织中的表达,探讨其在宫颈癌中的临床意义。方法免疫组化法检测10例正常宫颈和18例宫颈癌组织(10例Ⅰ期,8例Ⅱ+Ⅲ期)中FOXL2的表达情况,分析比较其表达与临床特征的关系。结果 FOXL2在正常宫颈组织中表达为0,在18例宫颈癌组织FOXL2阳性表达率为72.2%(13/18),其中宫颈癌I期阳性表达率50%,Ⅱ期及Ⅲ期阳性表达率为100%。FOXL2表达与宫颈癌临床分期、病理分级相关(P<0.05),而与宫颈癌患者的年龄无明显相关(P>0.05)。结论 FOXL2表达水平与宫颈癌恶性度呈正相关,且随着宫颈病变进展,FOXL2的阳性表达率呈递增趋势。