^(125)I-TOC和^(125)I-F-PGA放射化学纯度的测定

为比较3种测定125I标记的奥曲肽(TOC)和叶酸-青霉素酰化酶复合物(F-PGA)的放射化学纯度(RCP)的方法是否具有一致性,采用Iodogen法对TOC和F-PGA进行放射性碘标记,并用高效液相色谱法(HPLC)、三氯醋酸(TCA)沉淀法和纸层析法测定标记物的放射化学纯度(RCP),其中TCA沉淀法设4种蛋白浓度以观察其对RCP测定的影响。结果表明,HPLC和纸层析法均能有效分离标记物和游离碘,且HPLC测定这种标记物的RCP最为精确可信。在TCA沉淀法中,用0.2%的小牛血清白蛋白(BSA)测得的RCP最低,而用其它3个BSA浓度测得的RCP则无明显差异(P>0.05);当RCP<10%时,TCA沉淀法与纸层析法测得的RCP间无明显差异(P>0.05),而要高于HPLC(P<0.01);当RCP>10%时,对125I-TOC而言,TCA沉淀法要略低于HPLC和纸层析(P<0.05),但后2种方法无明显差异(P>0.05),且对125I-F-PGA而言,3种方法无明显差异(P>0.05)。3种方法两两之间显著相关(r=0.996~0.999,P<0.001)。

^(125)I-[Tyr^3]-octreotide内化及杀伤NCI-H446细胞的研究

目的 探讨小细胞肺癌NCI H4 4 6细胞株内化 [Tyr3] 奥曲肽 ([Tyr3] octreotide,TOC)的能力及1 2 5I TOC杀伤NCI H4 4 6细胞的效应。方法 以1 2 5I TOC为放射配基 ,生长抑素受体 (SSTR)阳性细胞NCI H4 4 6于 37℃与1 2 5I TOC共同保温不同时间后 ,分别检测细胞的总结合、内化及结合到核上的1 2 5I TOC ;采用噻唑蓝 (MTT)法检测不同剂量1 2 5I TOC、游离1 2 5I及TOC在不同时间对细胞存活率的影响。结果 NCI H4 4 6细胞内化1 2 5I TOC和细胞核结合1 2 5I TOC呈时间依赖性 ,至 2 4h最高 ,结合到核上1 2 5I TOC的量为 0 5h的 7倍 ;1 2 5I TOC对SSTR阳性的NCI H4 4 6细胞的杀伤作用呈剂量 效应、时间 效应关系 ,以 74kBq1 2 5I TOC作用 96h的杀伤效应最大 ,细胞存活率降至 (4 4 8± 7 2 ) %。结论 1 2 5I TOC可在SSTR介导下内化进入细胞并可杀伤细胞 ,呈时间 效应和剂量 效应关系。

紫杉醇脂质纳米粒子对KB、SKOV3细胞的抑制作用

目的:研究并分析新型紫杉醇脂质纳米粒子(paclitaxel nanoparlicle,TAX-NLC)对KB、SKOV3细胞的抑制作用,为研制新型肿瘤靶向治疗药物提供实验依据。方法:激光共聚焦显微镜动态观察TAX-NLC进入细胞的过程,半定量测定TAX-NLC在细胞内的浓度;MTT法测定TAX-NLC对KB、SKOV3细胞增殖的抑制率;锥虫蓝拒染法计数TAX-NLC作用后的活细胞数,绘制细胞生长曲线。结果:激光共聚焦显微镜动态观察发现细胞内荧光强度逐渐增加,约2 h时达到饱和,胞内外荧光强度差达20～40倍;MTT结果表明,TAX-NLC、紫杉醇(paclitaxel,TAX)对细胞的生长均有抑制作用,并且存在时间和剂量的依赖关系,用药后72 h后抑制率最高达92%;细胞生长曲线显示,TAX-NLC、TAX对SKOV3、KB细胞有明显的抑制作用,前者的作用强于后者。结论:TAX-NLC可能是通过主动转运将紫杉醇载带入细胞内,并在细胞内浓聚,对KB、SKOV3细胞的生长具有较强的抑制作用;其可能是一个有前途的新型肿瘤靶向治疗药物。

^(125)I标记紫杉醇的方法

采用改良的氯胺T法,先用稳定的NaI与紫杉醇(Paclitaxel)作用,再以放射性Na125I标记紫杉醇,建立125I标记紫杉醇的方法。采用纸层析及HPLC测定标记产物的标记率、纯化后的放化纯度,采用纸层析法测定标记产物在不同温度及不同的储存溶剂中的体外稳定性,红外光谱鉴定产物。结果显示,采用改良氯胺T法标记率约63.1%±5.7%,放化纯度约96.3%±1.3%;标记物储存于4℃生理盐水或乙醇储存体系中241、20 h,放化纯度分别>95%和约90%;在血浆中稳定性也较好,在4、37℃放置24 h,放化纯度分别为92.3%±0.4%、89.5%±0.6%。以上结果表明,改良氯胺T法标记紫杉醇具有方法简便、标记率高、标记产物稳定性较好的特点,能够满足放射性示踪实验的要求。

S180肉瘤乏氧诱导因子-1α与微血管密度表达水平的相关性

目的观察乏氧诱导因子-1α(HIF-1α)和微血管密度(MVD)在S180肉瘤中的表达水平,并探讨两者间的相关性。方法建立昆明种小鼠S180肉瘤模型23个。待肿瘤生长至1～2cm时完整切取肿瘤组织,用免疫组化技术分别测定肿瘤组织的HIF-1α和MVD的表达情况。结果所有S180肉瘤组织的HIF-1α表达为7%～70%(中位数为21%),而MVD的表达为3～40条(中位数为10条);HIF-1α与MVD的表达成线性正相关(t=7.048,P<0.001)。结论S180肉瘤组织中均有HIF-1α和MVD不同程度的表达,并且两者间存在显著的正相关性。进一步证实了HIF-1α在高表达的情况下通过促进血管内皮生长因子的高表达而刺激肿瘤血管的生长。

^(99m)Tc-octreotide的标记及受体分析

目的探讨直接法标记99mTc-octreotide的方法学及其与大鼠脑皮质细胞的亲和力。方法用直接法标记99mTc-octreotide,探讨其最佳标记条件;并以~99mTc-octreotide作为配基,检测大鼠脑皮质细胞与其结合的平衡解离常数。结果99mTc—octreotide标记率为53％～57％,经Sephadex G-10纯化后放化纯大于95％;受体分析显示大鼠脑皮质细胞与99mTc-octreotide保持了较高的亲和力(Kd=10.4nM)。结论 本标记方法是可行的,99mTc—octreotide有希望作为具有临床实用价值的生长抑素受体显像剂。

动脉粥样硬化斑块核素显像研究进展

核素显像是一种较为理想和具有广泛用途的无创伤性检查技术，是目前惟一能定性、定量反映器官组织血流、代谢及功能改变的影像学方法。利用放射性核素标记参与动脉粥样硬化的中间物质进行显像，可发现早期病变。

p53基因治疗与放射治疗联合应用于肿瘤研究

野生型p53基因的导入不仅可诱导肿瘤细胞凋亡，而且还可以提高肿瘤细胞对放射线的敏感性，从而增强放射治疗对肿瘤细胞的杀伤作用，但其作用机制尚未完全明了。野生型p53基因和放射线的协同作用有助于提高肿瘤疗效，从而使针对p53基因的基因治疗和放射线联合治疗方案具有良好的应用前景。

188Re—k—ras—AGPNA诱导胰腺癌细胞凋亡及在荷瘤裸鼠体内的生物分布

目的研究胰腺癌k-ras点突变基因的反基因肽核酸（AGPNA）生物活性和”。Re—k—ras—AGPNA诱导人胰腺癌细胞凋亡及在荷瘤裸鼠体内的生物分布。方法（1）用RT—PCR检测转染k—ras．AGPNA后胰腺癌细胞k-ras癌基因的mRNA表达水平。（2）用流式细胞仪检测转染后胰腺癌细胞的k-ras蛋白表达水平。（3）给予188Re-k-ras-AGPNA和188ReO4-3～5d后，用流式细胞仪检测胰腺癌细胞凋亡率。（4）58只荷人胰腺癌裸鼠分为188Re—k—ras—AGPNA和188ReO4-2组，采取瘤内注射给药方式，在不同时间点（2组分别为15min，1h，4h，1d，3d，5d，7d与15min，1h，2h，4h，24h）显像后处死裸鼠，计算各组织的％ID／g，并计算各组织的吸收剂量（mGy／MBq）。对数据行单因素方差分析。结果（1）转染1nmol／mlk-ras—AGPNA组细胞的k-ras突变基因mRNA的灰度比和k-ras蛋白表达率分别为1．00±0．39和（15．05±5．07）％，比未给药的肿瘤细胞对照组[分别为1．86±0．07和（24．38±5．40）％]低（F=2．545，5．329，P均〈0．05）。（2）给药后4，5d，188Re-k-ras-AGPNA组漂浮细胞的凋亡率分别为（26．30±7．45）％和（27．90±10．38）％，比188ReO4组[分别为（8．75±3．11）％和（16．87±5．85）％]高（F=9．376，P均〈0．05）。（3）瘤内注射188Re—k—ra8-AGPNA后1h和1，7d肿瘤内放射性摄取分别为（37．47＋21．31）、（35．96±7．80）和（15．46±4．93）％ID／g。肿瘤内吸收剂量为15569mGy／MBq。结论k-ras．AGPNA能抑制k-ras基因在mRNA和蛋白水平的表达。188Re—k—ra,s—AGPNA能诱导胰腺癌细胞凋亡且瘤内注射后肿瘤部位摄取高、滞留时间长。

抗CD20抗体治疗非霍奇金淋巴瘤

抗CD2 0抗体治疗非霍奇金淋巴瘤 (NHL)已成为研究热点 ,因其与传统治疗相比 ,具有低毒高效的优点 ,从而为众多患者带来福音。现综述抗CD2

以表皮生长因子受体为靶点的肿瘤分子靶向治疗

表皮生长因子受体（EGFR）是多种肿瘤发展和生长过程的重要因素，EGFR信号转导系统在肿瘤细胞的增殖、血管形成、转移以及细胞凋亡抵抗中起关键作用。最近，抗EGFR单克隆抗体和EGFR．酪氨酸激酶抑制剂已经作为治疗EGFR阳性肿瘤的新方法进行临床应用，并且在对晚期和化疗耐药肿瘤的临床试验中表现出活性。本文综述了3类针对EGFR的靶分子药物。

重组人p53腺病毒注射液对人淋巴瘤细胞的作用及辐射敏感性的影响

目的探讨重组人p53腺病毒注射液对人淋巴瘤细胞的抑制作用及其辐射增敏性。方法利用四氮唑盐（MTT）比色法分析重组人p53腺病毒注射液、放射治疗以及两者联合应用对人淋巴瘤细胞Raji和Daudi的抑制作用；通过蛋白质的Western印迹分析法（Westernblotting）分析淋巴瘤细胞内P53蛋白的表达；应用反转录．聚合酶链反应（RT-PCR）检测淋巴瘤细胞内p53基因的mRNA表达。结果MTT结果显示重组人p53腺病毒注射液对人淋巴瘤细胞具有一定的抑制作用，但抑制作用不显著，Saji及Daudi细胞最大剂量的抑制率分别为27．5％±4．1％和28．1％±1．6％，也未见明显的辐射增敏效应。Westernblotting和RT-PCR结果表明，外源性P53蛋白和p53基因的mRNA均有所表达，但未见高效表达和明显的辐射增敏性。结论重组人D53腺病毒注射液对人淋巴瘤细胞的抑制作用及辐射增敏性不显著。

p53基因治疗在恶性淋巴瘤治疗中的应用

多数恶性淋巴瘤患者有突变的p53基因过表达，并且实验表明p53基因与恶性淋巴瘤的发生发展有密切关系。因此，以重组腺病毒为载体将正常p53基因导人肿瘤细胞中并使其稳定表达将会对恶性淋巴瘤起到治疗作用。这已经在基础研究中得到了证实。