可溶性gp130酶联检测试剂盒的研制及其运用

目的 :建立灵敏、特异、稳定和简便的人可溶性gp130 (sgp130 )酶标检测试剂盒。方法 :采用本室制备的鼠抗人gp130单抗T2作为包被单抗 ,另一株识别不同抗原位点的单抗T12经生物素 (biotin)标记后作为检测抗体 ,建立双单抗夹心的人sgp130酶标检测方法 ,并分别测定了 40例健康供血员、40例甲亢及 47例慢性肾炎患者血清中sgp130的含量。结果 :成功地研制了人sgp130酶联检测试剂盒 ,其灵敏度为 10ng/ml。该试剂盒 4℃放置 3个月 ,离散度 (CV) <± 7 6 %,回收率为95 %～ 111%,提示检测方法具有良好的灵敏度、稳定性和准确性。用该试剂盒测得的血清中sgp130含量的 95 %正常值范围为5 36 92～ 2 87 88(ng/ml) ,甲亢及慢性肾炎患者血清中sgp130的含量分别为 937 16± 2 17 5 9和 80 6 4 5± 138 4 7(ng/ml) ,明显高于正常对照者 (P <0 0 1)。结论 :建立的人sgp130酶标检测试剂盒 ,能够对血清中sgp130进行准确定量 ,可为临床gp130相关性疾病的辅助诊断、疗效估价和判断预后提供有价值的生物学参数 ,具有良好的运用前景。

PI3K在TCR和CD28协同激发的γδT细胞活化信号转导中的作用

目的 探讨CD2 8协同结核杆菌 (M .tb)低分子多肽激活人外周血γδ+ T细胞时 ,其胞内信号的传递经过磷酸肌醇 3激酶 (PI3K)的介导作用。方法 用激发型抗CD2 8单抗模拟第二信号 ,与M .tb抗原一起刺激纯化的T细胞 ,同时用特异性PI3K抑制剂LY2 940 0 2阻断PI3K的活性 ,用流式细胞仪分析γδ+ T细胞上CD6 9分子的表达及γδ+ T细胞的增殖效应。结果 随着LY2 940 0 2浓度的增加 ,γδ+ T细胞表面CD6 9分子的表达率降低 ,其增殖效应亦被不同程度地阻断。结论 抗CD2 8单抗可协同M .tb抗原激活γδ+ T细胞 ,其活化信号在γδ+ T细胞内的转导经过PI3K的介导。