sCD40L在小鼠急性辐射损伤中的应用研究

CD4 0和 CD4 0 L的相互作用在机体细胞和体液免疫调节及其应答中起重要作用 ,注射可溶性CD4 0 L(s CD4 0 L)可促进骨髓移植小鼠粒细胞和血小板数量的恢复。本实验采用外周血细胞计数、白细胞分类计数、免疫荧光标记和流式细胞技术 ,探讨了 s CD4 0 L对小鼠急性辐射损伤的救治作用。结果显示 ,体内注射 s CD4 0 L以最佳剂量 10 0 μg处理受照小鼠时可明显延长其存活时间 ,并促进 CD8+ T细胞比例和 CD4 + /CD8+ T细胞比值的恢复。说明 s CD4 0

流动注射催化动力学光度法测定痕量锰

在含有氨三乙酸的 p H=5 .4 HAc- Na Ac缓冲体系中 ,在室温下 Mn( )对 Na IO4 氧化季胺 [4 ,4 '-对(二甲氨基 ) -二苯基甲烷 ]反应有显著的催化作用 ,利用流动注射技术在 60 2 nm波长处监测不稳定的显色产物 ,建立了快速自动测定痕量锰的新方法。在 60样 / h采样频率下检出限 (3σ)为 0 .0 73μg/ L,线性范围为 0— 2 0 μg/ L,RSD为 0 .5 %。应用于天然水样的测定 。

人PD-1基因克隆及其在L929基因转染细胞上的表达

目的克隆人PD-1基因,构建含有该目的基因的重组逆转录病毒载体,并转染入L929细胞,获得稳定高表达PD-1分子的L929细胞。方法用PCR法从pGEX-5X-3-PD-1扩增出PD-1基因,通过双酶切(PstI BamHI)装入逆转录病毒载体pGEZ Term中,脂质体法共转染包装细胞293T,用含有完整病毒颗粒的293T细胞的培养上清感染L929细胞,72 h后,加入Zeocin进行筛选,挑选出能稳定表达PD-1分子的L929细胞株。结果成功克隆了人PD-1基因,构建了含PD-1基因的重组逆转录病毒载体,包装出具有感染能力的重组PD-1逆转录病毒,筛选出具有稳定表达人PD-1分子的L929基因转染细胞。经流式细胞仪检测:PD-1分子在L929基因转染细胞中具有高表达,达到97.6%。结论构建了含人PD-1基因重组逆转录病毒的载体,筛选出稳定表达人PD-1分子的L929细胞株。

Flt3配体联合其他细胞因子对受照射小鼠免疫系统的作用研究

目的 研究Flt3配体 (FL)在受照射小鼠免疫系统恢复中的作用。方法 采用F 80 0血细胞自动计数仪行外周血细胞计数及白细胞分类计数 ,流式细胞仪分析外周血淋巴细胞表型。结果 照射前应用FL或照射后联合应用FL、IL 11、EPO和G CSF等细胞因子 ,能有效地促进受照小鼠外周血白细胞和淋巴细胞的恢复 ,对CD8+ 细胞的恢复作用尤为明显 ,同时使CD4 + CD8+ 细胞比值较早恢复正常 ,提高受照射小鼠的生存率。结论 FL不但能促进辐射损伤机体造血功能的恢复 ,对免疫系统的恢复亦具有重要的作用。FL单独或与其他细胞因子联合应用 。

重组人Flt3配体联合其它细胞因子对免疫细胞的体外抗辐射作用研究

目的 研究重组人Flt3配体 (rhFL)及其他细胞因子在体外对免疫细胞的抗辐射作用及其可能机理。方法 用流式细胞仪分析照射前后外周血单个核细胞 (PBMC)表型及rhFL对受照射PBMC表型的影响。 [3H] TdR测定细胞的增殖能力。PBMC来源贴壁细胞经细胞因子诱导树突状细胞 (DC) ,并观察辐射对诱导DC的影响及rhFL对DC的抗辐射效应 ;用PI AnnexinV、DNALadder分析细胞凋亡。结果 PBMC在体外经 15Gy照射后 ,CD8+ 、CD5 6 + 细胞明显减少 ,照射前细胞培养液中加入 10 0ng mlrhFL ,可促进CD5 6 + 细胞的恢复 ;照射前应用rhFL及照射后联合应用IL 2等细胞因子 ,可促进受照射CD8+ 、CD5 6 + 细胞的恢复 ;rhFL可协同GM CSF、IL 4、TNFα产生DC ,并使DC细胞的数量较常规方法诱导产生的数量增加 6倍 ,而且rhFL对DC分化诱导的辐射抑制作用具有明显的抗性 ;rhFL可抑制照射所致的细胞凋亡。结论 rhFL单独或与其他细胞因子联合应用 ,对人外周血免疫细胞具有明显的抗辐射效应 。