Lupeol及其衍生/修饰物对肝癌细胞增殖影响的研究

目的:探讨lupeol及其结构改造后衍生/修饰物对肝癌细胞HepG2和SMMC7721细胞增殖的作用。方法:对lupeol进行化学结构修饰,然后应用MTT方法检测lupeol及其衍生/修饰物对HepG2和SMMC7721细胞增殖的作用。结果:MTT数据显示,lupeol及其衍生/修饰物均能抑制HepG2和SMMC7721细胞增殖,并且具有浓度依赖性。Lupeol、H1、T1和T2的IC50分别为40μmol/L-50μmol/L、约120μmol/L、约50μmol/L和70μmol/L-80μmol/L。结论:lupeol结构改造后,并没有提高其对肝细胞肝癌细胞增殖的抑制作用。

Lupeol及其衍生/修饰物H2抗肝细胞肝癌作用及其机制的初步研究

目的:探讨lupeol及其结构改造后衍生/修饰物H2抗肝细胞肝癌作用及机制。方法:对lupeol进行化学结构修饰,然后应用MTT方法检测lupeol及其衍生/修饰物H2对HepG2和SMMC7721细胞增殖的作用,流式细胞术检测lupeol、H2对SMMC7721细胞凋亡的诱导作用,Western blot方法检测cleaved-PARP剪切活化水平。结果:MTT数据显示,H2大大提高了lupeol抗肝细胞肝癌效果。lupeol的IC50为45μmol/L(SMMC7721)和48.5μmol/L(HepG2),H2的IC50为30μmol/L(SMMC7721和HepG2)。流式细胞术结果显示,20μmol/L H2作用后诱导SMMC7721细胞发生凋亡。Western blot结果显示,20μmol/L H2作用后诱导SMMC7721细胞内cleaved-PARP剪切活化增多,而20μmol/L lupeol作用后无此效果。结论:lupeol结构改造后的H2,显著提高了其抗肝细胞肝癌活性。

快速高效构建小鼠体内成像肿瘤模型的方法学平台

目的建立小鼠肿瘤模型,并用体内成像的方法进行检测,降低传统方法中的系统误差与人为测量错误,提高模型的准确性与客观性。方法构建萤火虫素酶的慢病毒表达载体,体外包装能表达萤火虫素酶的慢病毒颗粒。用病毒颗粒转染目标细胞,筛选出稳定表达萤火虫素酶的目标细胞系。体外运用双荧光素酶分析系统进行质控检测,通过后建立小鼠肿瘤模型,最后使用活体成像的方法对小鼠肿瘤模型中肿瘤的大小进行定量分析,以评估小鼠肿瘤模型的恶化程度。结果成功构建含有萤火虫素酶基因的慢病毒质粒;包装能正确表达具有功能活性萤火虫素酶的慢病毒颗粒;使用病毒颗粒感染目标细胞并筛选出能表达萤火虫素酶的稳转细胞系;建立小鼠皮下肿瘤模型,并利用活体成像的方法对肿瘤大小进行定量分析。结论通过该种方法可以建立表达萤火虫素酶的稳转细胞系,利用体内成像的检测方法可以准确的对肿瘤模型的发生发展进行评估。

中药干预雄激素受体治疗前列腺癌的研究进展

前列腺癌(Prostate cancer,PCa)是男性常见的雄激素驱动的与内分泌有关的恶性肿瘤。随着社会的发展,饮食结构和生活习惯的改变以及老龄化的到来,前列腺癌在我国的发病率逐年增高。雄激素受体(androgen receptor, AR)是前列腺生长发育以及维持自身内稳态的关键信号分子,也是前列腺癌治疗中最为重要的药物靶点。临床药物机制多为抑制雄激素受体的活性和雄激素的合成,治疗后可以有效减缓病程发展,但大多数PCa患者后期会发展为去势抵抗性前列腺癌,并且产生耐药性,对临床治疗构成挑战。中医药在提高患者生存质量、减轻临床症状、延长生存期等方面显示出一定的优势,为PCa的治疗提供新的方向。概述了中药干预雄激素受体治疗前列腺癌的研究进展。

三氧化二砷抑制小鼠乳腺癌细胞MA-891生长作用及其对端粒酶活性的影响

目的:探讨As2O3在诱导小鼠乳腺癌细胞MA-891凋亡过程中的作用,以及对端粒酶及其亚单位mTERT mRNA活性表达的影响,为进一步进行小鼠体内实验提供理论和实验依据。方法:以小鼠乳腺癌细胞株MA-891为研究对象,将不同浓度的As2O3与MA-891细胞共培养不同时间后,MTT法检测As2O3对MA-891细胞的生长抑制作用;流式细胞术检测As2O3对MA-891细胞凋亡的影响;TRAP-PAGE-银染法检测As2O3作用后MA-891细胞中端粒酶活性的改变;RT-PCR检测As2O3对MA-891细胞鼠端粒酶逆转录酶(mTERT)的影响。结果:As2O3能显著抑制MA-891细胞生长,24,48 h的半数生长抑制浓度(IC50)分别为9.68,5.50μmol.L-1。5,10,20μmol.L-1的As2O3诱导MA-891细胞24 h后,细胞凋亡率依次为30.21%,48.26%,57.43%。5,10,20μmol.L-1的As2O3作用MA-891细胞24,48 h后,端粒酶活性显著下降,抑制程度呈明显的时间和浓度依赖性;银染条带也显示出相同结果。RT-PCR产物显示mTERT mRNA表达显著下降并呈时间和浓度依赖关系。结论:As2O3能显著抑制MA-891细胞生长、诱导细胞凋亡,可能是通过抑制细胞端粒酶及其亚单位端粒酶逆转录酶的活性而发挥作用。

羽扇豆醇对白血病细胞株增殖和凋亡作用的影响

目的研究羽扇豆醇对人髓系K562、NB4、SHI-01及淋系Jurkat白血病细胞的增殖和凋亡作用。方法以不加药物处理为对照组,设置5个羽扇豆醇浓度梯度分别处理人髓系、淋系白血病细胞,采用MTT法检测细胞活力及增殖情况,流式细胞术检测细胞凋亡率。结果随着羽扇豆醇浓度的升高,细胞增殖明显受到抑制。当浓度达到150μmol/L时,4种细胞都呈现出明显的增殖抑制作用(均P<0.05);与对照组相比,羽扇豆醇组细胞凋亡率明显增加(P<0.05)。结论羽扇豆醇可显著抑制人髓系K562、NB4、SHI-01及淋系Jurkat白血病细胞增殖并诱导其凋亡。