沙苑子黄酮提取工艺研究

目的优选沙苑子黄酮提取工艺。方法采用碱水、碱醇和乙醇提取,考察提取溶媒对沙苑子总黄酮提取的影响;采用石油醚脱脂后乙醇提取和直接乙醇提取,比较脱脂对沙苑子总黄酮提取的影响;并采用正交设计法优选乙醇提取工艺。结果以乙醇为溶媒,提取所得总黄酮含量最高;脱脂对提取有较大影响,脱脂后乙醇提取所得沙苑子总黄酮含量较高;乙醇提取最佳工艺条件为乙醇体积分数80%,料液比为1∶16,提取时间为1.5 h,沙苑子粒度为40目。结论优选出的提取工艺具有操作简便,可行性等特点。

毛茛总苷对人胃癌细胞和胰腺癌细胞增殖作用的初步研究

目的:研究毛茛总苷体外对人胃癌细胞MGC803和人胰腺癌PATU898细胞增殖、细胞周期的影响。方法:采用Alamar Blue和瑞-姬染色方法检测毛茛总苷对人胃癌细胞MGC803和人胰腺癌细胞PATU8988增殖的作用;PI染色法观察毛茛总苷对MGC803和PATU8988细胞周期的影响;Annexin V/PI双染实验法检测毛茛总苷对MGC803细胞凋亡的影响。结果:用Alamar Blue检测及瑞-姬染色法,其结果显示毛茛总苷对人胃癌细胞MGC803和人胰腺癌细胞PATU8988表现出具有较好地增殖和抑制作用,其48h的半数抑制浓度分别为222.05μg/mL,341.23μg/mL;用PI单染法,其结果显示毛茛总苷对2株肿瘤细胞的细胞周期无明显影响;用Annexin V/PI双染法,其实验结果显示毛茛总苷可诱导MGC803细胞凋亡。结论:毛茛总苷在体外可以明显抑制MGC803和PATU8988的增殖,其作用机制可能与诱导细胞凋亡有关,而与细胞周期阻滞无关。

毛茛有效部位D1对人胃癌细胞MGC803细胞增殖和凋亡的作用及其机制的初步研究

采用AlamarBlue和瑞-姬氏染色方法检测毛茛有效部位D1对人胃癌细胞MGC803增殖的作用;PI染色法观察D1对MGC803细胞周期的影响;半定量RT-PCR法检测D1对MGC803细胞周期相关基因表达的作用;用DAPI染色方法和细胞色素C免疫荧光法观察D1对胃癌细胞MGC803凋亡的影响。结果显示,毛茛有效部位D1对胃癌细胞MGC803表现出较好的增殖抑制作用,且24、48和72 h的半数抑制浓度分别为126.89、74.81、68.72μg/mL;同时D1对细胞周期和周期相关基因的表达无明显影响,且D1能促使细胞色素C释放到细胞胞浆诱导细胞凋亡。

百草降脂灵对动脉粥样硬化兔OX-LDL和LDL-RmRNA表达的影响

目的 :研究百草降脂灵预防性给药对动脉粥样硬化 (atherosclerosis,AS)兔氧化低密度脂蛋白(OX LDL)、低密度脂蛋白受体 (LDL R)mRNA表达的影响。方法 :用 4F (Forgarty)导管拉伤兔腹主动脉内皮 ,然后连续喂饲高脂饲料 ,6wk后造成兔AS模型。同时预防性给予百草降脂灵 0 .1 6g·kg-1,0 .3 2 g·kg-1,1 2wk后取兔腹主动脉 ,采用DAB显色法 ,研究各组间OX LDL表达情况。另取兔肝脏 ,利用RT PCR技术研究百草降脂灵预防性给药后对LDL RmRNA表达的影响。结果 :百草降脂灵组同AS模型组相比 ,兔腹主动脉OX LDL表达明显降低 (P <0 .0 5或P <0 .0 1 ) ,兔肝脏LDL RmRNA表达明显增加 (P <0 .0 1 )。结论 :百草降脂灵预防性给药可减少兔腹主动脉OX LDL表达 ,增加兔肝脏LDL RmRNA表达 ,这是百草降脂灵预防兔动脉粥样硬化发生发展的可能机制之一。

miRNA在结肠癌早期诊断和筛选中的作用

miRNA(microRNA)是近年研究发现的存在于血液和结肠癌组织中的一类独特的小RNA,他们作为生物标志可准确地诊断结肠癌,并且能辅助预测结肠癌的复发.特异性miRNA过表达或沉默与结肠癌的发展和演进有关,肿瘤细胞的转移和耐药性涉及miRNA.组织和血液中的特异性miRNA差异表达为结肠癌早期诊断和筛选提供了应用前景.miRNA在肿瘤生成中的作用表明:miRNA在缓解和防止肿瘤复发中有着潜在的重要作用,他们可能成为肿瘤基因治疗的重要靶点.本文主要综述了特异性miRNA在结肠癌早期诊断和筛选中的作用.

沙苑子中沙苑子苷A对照品的制备及鉴定

目的建立从沙苑子中制备沙苑子苷A对照品的方法。方法采用大孔树脂富集、聚酰胺柱色谱、硅胶柱色谱和重结晶方法对沙苑子80%乙醇提取物进行分离纯化,通过MS、IR、UV、1H-NMR和13C-NMR进行结构鉴定,通过TLC和HPLC对对照品进行纯度检测。结果从沙苑子中分离、纯化出沙苑子苷A对照品,质量分数>99.0%。结论该方法制备的沙苑子苷A对照品符合中药化学对照品的相关要求,可作为沙苑子药材及其制剂质量控制,以及中药药效物质基础研究用的化学对照品。

百草降脂灵对动脉粥样硬化兔腹主动脉PCNA及突变型p53表达的影响

目的 研究百草降脂灵预防性给药对动脉粥样硬化 (Atherosclerosis,AS)兔增殖细胞核抗原 (ProliferatingCellNuclearAntigen ,PCNA)及突变型 p5 3表达的影响。方法 用 4FFogarty导管拉伤兔腹主动脉内皮 ,然后连续喂饲高脂饲料 ,6周后造成兔动脉粥样硬化模型。同时预防性给予百草降脂灵 0 .16 g/kg ,0 .32g/kg ,12周后取兔腹主动脉 ,采用DAB显色法 ,研究各组间PCNA及突变型p5 3表达情况。结果 百草降脂灵预防性给药可减少兔腹主动脉PCNA及突变型 p5 3表达。 结果 百草降脂灵预防兔动脉粥样硬化的发生发展 ,可能与减少兔腹主动脉壁突变型 p5 3基因表达 。

异丙酚对培养心肌细胞缺氧乏糖损伤的影响

目的 观察异丙酚对缺氧乏糖心肌细胞血清乳酸脱氢酶 (L DH)和血清肌酸激酶 (CK)漏出量的影响 ,以探讨异丙酚对缺血心肌细胞的作用。方法 取出生 2 4 h以内的 Wistar红皮乳鼠体外培养心肌细胞分成 5组 (n=5 ) :正常对照组、缺氧乏糖组、缺氧乏糖 +异丙酚 4 0μmol/ L组、缺氧乏糖 +异丙酚 80μmol/ L组、缺氧乏糖 +异丙酚1 6 0 μmol/ L组 ,给予缺氧乏糖 6 h干预 ,观察 L DH和 CK的漏出量。结果 异丙酚 4 0 μmol/ L 对 L DH和 CK无明显影响 ,异丙酚 80μmol/ L、1 6 0μmol/ L明显降低 L DH和 CK的漏出量。结论 异丙酚在一定浓度下可降低缺氧乏糖心肌细胞 L DH和 CK的漏出量 。

雷帕霉素对帕金森病大鼠模型行为学、氧化应激水平及线粒体相关基因表达的影响

目的探讨雷帕霉素对帕金森病(PD)大鼠模型的保护作用及其机制。方法 60只大鼠均分为5组:C组作为空白对照;其余4组采用6-羟基多巴(6-OHDA)两点注射法制备PD大鼠模型。LR、MR和HR组造模前7d开始用雷帕霉素0.05、0.5和5mg/kg每天灌胃给药1次;P组给予生理盐水作为模型对照。术后3周对大鼠进行行为学评分;检测纹状体丙二醛(MDA)和谷胱甘肽(GSH)含量、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)活性,以及B细胞淋巴瘤/白血病2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)和还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)氧化酶p47phox mRNA的表达水平。结果与P组相比,LR、MR和HR组大鼠旋转圈数减少、纹状体MDA含量降低、GSH含量、SOD、GSH-PX活性以及Bcl-2mRNA表达升高、Bax和p47phox mRNA表达水平降低。结论雷帕霉素可以有效改善PD大鼠模型行为学表现。其机制可能与调控病灶相关部位的氧化应激水平及线粒体相关基因mRNA的表达有关。