钙离子介导昆虫蜕皮激素和保幼激素信号转导的研究进展

Ca^(2+)作为生物细胞内信号转导的第二信使,对植物、昆虫和哺乳动物的生长发育以及生理代谢有着重要的作用。Ca^(2+)在昆虫体内参与蜕皮激素(20-Hydroxyecdysone,20E)和保幼激素(Juvenile Hormone,JH)对生理活动的调控。在昆虫中,Ca^(2+)介导上述两种激素信号通路的分子机制是近年来的研究热点。本文综述了Ca^(2+)和Ca^(2+)库在昆虫正常生理活动中的作用以及Ca^(2+)介导的JH和20E的信号转导通路,为深入研究Ca^(2+)对昆虫生长发育的影响提供参考。

家蚕丝绵含油率测定方法的研究

为了准确测定家蚕丝绵含油率,采用索氏萃取法,研究水浴温度、丝绵取样干重对丝绵含油率测定结果的影响。实验结果表明,水浴温度在72～73℃、丝绵取样干重在(3.004±0.003)g时,测得的含油率较其他条件下的测定值高。

野桑蚕不同组织细胞色素P450 CYP305 B1 V1基因的诱导表达特征研究

[目的]研究不同诱导物对野桑蚕各组织中细胞色素P450 CYP305 B1 V1基因表达的影响。[方法]参照GenBank中公布的野桑蚕CYP305 B1 V1基因的mRNA序列,设计1对引物,采用半定量RT-PCR方法分析经NaF、芸香苷、氯氰菊酯和蜕皮激素处理的野桑蚕各组织中CYP305 B1 V1基因的表达情况,并对该基因的氨基酸序列进行同源性比较和进化分析。[结果]氯氰菊酯、芸香苷和NaF影响野桑蚕CYP305 B1 V1基因在组织中的表达,蜕皮激素无明显影响。氨基酸的同源性分析表明该基因氨基酸序列与家蚕CYP305B1的氨基酸序列同源性最高(100%);与赤拟谷盗推测的CYP305 A1、蜜蜂推测的CYP305 A1、果蝇CYP305 A1、冈比亚按蚊CYP305 A2及库蚊CYP2L1有较高的同源性。[结论]野桑蚕CYP305 B1 V1基因可能主要参与外源性化合物的代谢,对揭示细胞色素P450的功能和不同药物的代谢机理具有重要意义。

园艺植物害虫生物防治研究进展

采用生物方法防治园艺植物害虫受到越来越多的关注和应用。本研究在综述园艺植物(果树、蔬菜、花卉等)害虫生物防治现状及特征的基础上,重点介绍了天敌昆虫、病原微生物、昆虫性信息素和植物源杀虫剂利用等方面的研究进展,并对园艺植物害虫生物防治过程中存在的问题进行了初步探讨。

野桑蚕不同组织细胞色素P450 CYP305B1V1基因的诱导表达特征研究(英文)

1材料与方法 1．1材料与试剂野桑蚕采自苏州大学独墅湖校区桑园；宿主菌E．coli TOP10为苏州大学基础医学及生物科学学院生物资源与功能基因组学研究室保存；植物次生性物质芸香苷和内源性物质蜕皮激素均购自SIGMA公司；氯氰菊酯购自拜耳杭州作物科学有限公司；外源性化合物NaF（分析纯）购自西安化学试剂厂；RNAiso reagent试剂盒购自TakaRa公司；其他常用试剂购自TaKaRa公司或上海生工生物工程技术服务有限公司：

茧丝害虫赤拟谷盗的生物学特性及防治研究

从中国茧丝绸交易市场的干茧仓库内发现有多种害虫为害仓储蚕茧,经鉴定,分别为赤拟谷盗、花斑皮蠹和仓潜。通过室内人工饲养和观察,对赤拟谷盗的形态特征、生活习性以及发生特点等有了较全面的了解。在此基础上,提出了以控制生态环境、合理运用化学药剂和生物防治相结合的综合防治措施。

桑枝枯菌核病的发病规律研究

桑枝枯菌核病是近年来在江苏发现的一种新的桑树病害,该病主要危害春季一年生枝条上已萌发的桑芽及新梢,常造成桑芽枯萎和病芽上方的枝条干枯死亡。经鉴定,病原菌为子囊菌亚门,核盘菌属真菌[Sclerotinasclerotiorum(Libert)de Bary]。病原菌在桑芽或新梢的寄生部位能形成黑色菌核。菌核随采叶、伐条等田间操作而掉入土中越冬越夏,成为翌年的初侵染源。病害发生与桑树品种关系密切,育2号为易感病品种。桑园间作是造成病害交互感染的重要原因。

家蚕基质金属蛋白酶基因Bm-MMP的克隆、序列分析及表达研究

基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinases,MMPs)家族是一类蛋白水解酶,能够降解基底膜和细胞外基质中大部分蛋白质。为了研究MMPs对家蚕Bombyxmori基本生理功能的影响,本文利用RACE和RT-PCR方法,首次从家蚕蛹中克隆了一个MMP基因的全长cDNA,命名为Bm-MMP。序列分析表明,Bm-MMP的mRNA存在两个选择性剪切变体,分别命名为Bm-MMP-V1和Bm-MMP-V2。其中Bm-MMP-V1cDNA全长为2257bp,包含一个1686bp的开放阅读框,编码561个氨基酸,预测蛋白质分子量约为62.3kD;Bm-MMP-V2cDNA全长为2188bp。同源性分析表明,Bm-MMP-V1和Bm-MMP-V2的氨基酸序列与蜡螟Galleria mellonella的Gm1-MMP的氨基酸序列同源性最高,均为88.8%;与黑腹果蝇Drosophila melanogaster的Dm1-MMP的氨基酸序列同源性,分别为61.2%和64.3%。将Bm-MMP-V1的编码区连接到表达载体pET28a(+)上,并在大肠杆菌BL21中进行原核表达,SDS-PAGE和Western blot分析结果表明,带有6×His标签的融合蛋白被成功表达。半定量RT-PCR分析表明,Bm-MMP-V1和Bm-MMP-V2在4龄眠蚕、熟蚕、吐丝后36及48h、预蛹中的表达量比5龄中食期与化蛹后的表达量高,推测该基因与家蚕幼虫蜕皮变态有关;LPS诱导5龄3d的幼虫,其Bm-MMP-V1和Bm-MMP-V2在血液中的表达量升高,推测Bm-MMP可能与免疫相关。本研究为进一步研究Bm-MMP在家蚕体内的作用机制奠定了基础。

酚氧化酶在家蚕血淋巴中的活力分布及影响因素的研究

昆虫血淋巴黑化的形成由激活酚氧化酶原的级联系统所引发,酚氧化酶在昆虫体液免疫中起着非常重要的作用。本试验以家蚕3龄末期开始每天抽取血淋巴制成粗酶液,以L-DOPA为底物,测定各龄期活力分布规律,并且通过改变酚氧化酶与底物反应的条件,发现温度与PH值对酚氧化酶添力具有很大的影响。

雌雄茧丝性状差异性研究

以荧光茧色判性蚕品种为材料,研究了雌雄性别之间蚕茧及其茧丝若干经济性状的差异性。结果显示:平均全茧量雌比雄重,约0.297g;平均茧层率雌比雄低,约4.07个百分点;平均茧层量雌雄间比较接近,雌雄性别间全茧量、茧层率的差异在显著水平a=0.01下达到极显著水平。平均茧丝纤度雄比雌细0.188dtex,干茧出丝率雄比雌高出3.2个百分点,强力雄比雌大0.191CN/dtex,伸长率雄比雌高出1.02个百分点,雌雄性别间这些性状的差异在显著水平a=0.05下均未达到显著水平。雄茧平均茧丝长比雌茧的增长4.69%,平均纤度粒内百回均方差比雌茧的减小0.14。

DNA分子标记检测家蚕黄海、苏春品种和纯度的研究

利用单粒卵微量DNA抽提法,从家蚕黄海、苏春及其一代杂交种转青蚕卵快速提取出基因组DNA。筛选出的RAPD随机引物S60稳定扩增出2个原种的DNA特异性片段RH-Ⅰ440和RS-Ⅱ1000,克隆和测序后发现分别为463bp和约938bp。利用网上数据库进行序列分析,RH-Ⅰ440的nt2-462与一个家蚕wholegenomeshotgunsequence(WGS)(No:BAAB01096026.1)的nt1644-2104有96%的一致性,其中存在2个Caps。RS-Ⅱ1000的nt3-935与另一个家蚕WGS(No:BAAB01031489.1)的nt1046-1989有97%的一致性,其中存在13个Gaps。RH-Ⅰ440和RS-Ⅱ1000可以作为两个品种RAPD特征DNA片段进行品种和纯度的鉴定。

家蚕单粒卵DNA的快速制备方法研究

研究了含量甚微的家蚕单粒卵DNA的抽提方法。将蚕卵催青至转青,以增加蚕卵的DNA含量。在Eppendorf管内用牙签刺破 蚕卵,再用酚、氯仿速提法抽提,能够在1h左右制备出符合RAPD需要的DNA模板,每粒卵能够提取到100ng左右的DNA,制备量接近常规方 法。

基因表达序列分析技术(SAGE)在家蚕研究中的应用现状与前景

家蚕是鳞翅目模式昆虫,家蚕组数据库和基因表达差异分析数据库的建设为鳞翅目害虫功能基因的研究提供了一个便利的技术平台。基因表达序列分析技术(SAGE)以及在此基础上发展起来的结合标签的基因序列延伸(GLGI)、长片段基因表达序列分析(LongSAGE)等在家蚕获取基因表达谱、发现组织特异表达以及发现新基因中应用获得了很多重要的结果;众多通用SAGE数据库以及家蚕数据库为SAGE数据的生物信息学分析提供条件;以SAGR为核心的一系列技术通过定性与定量研究将把家蚕基因研究引入基因网络研究中,进行靶向定位以及辐射研究,加快家蚕后基因组时代步伐,为快速有效地发掘和研究鳞翅目害虫的功能基因提供模式价值。

桑疫病病原性状、发生规律及其防治的研究

桑疫病是桑树的主要病害之一,各地发生普遍,对蚕桑生产的影响很大。本文详细介绍了近十多年来在桑疫病的分型、病原性状、发生发展规律等方面的研究进展情况,并提出了以推广抗病品种为主的综合防治措施。

桑蚕一代杂交种纯度检验标准改进研究

桑蚕一代杂交种杂交率检验,现行方法以0.50 g(约800粒)蚕卵的样本杂交率作为判断标准,该标准准确性差。本文首次提出了以每批蚕卵(总体)纯度(杂交率)作为判别标准,并分别以可靠性90%和95%,设计了蚕卵序贯抽样检验的方案,这种检验方案适合使用DAN检验方法进行品种纯度检验。

利用桑枝屑栽培平菇的研究

桑树枝条是蚕桑生产的副产物,一般作为柴火处理,经济价值极低。利用桑枝屑栽培食用菌可明显提高枝条的附加值,大大提高单位面积的经济效益,有利于蚕桑生产的可持续发展。本文报道了利用桑枝屑栽培平菇的研究,结果表明,用桑枝屑替代部分栽培料培养平菇获得了成功,其发菌情况、子实体生长和平菇产量等与棉籽壳培养料为对照的基本相同,生物转化率达76．8％,处于较高水平,因此该方法可用于平菇的生产和开发。

DNA分子标记检测家蚕苏菊、明虎品种和纯度的研究

利用单粒卵微量DNA抽提法,从江苏省家蚕主要品种苏菊、明虎及其一代杂交种蚕卵快速提取出基因组DNA,用筛选出的 RAPD随机引物S77稳定扩增出苏菊、明虎的DNA特异性片段RS和RM,克隆和测序后大小分别为1694bp和1303bp,使用Blastn程序在NCBI 数据库检索发现,Rs的nt30-429与一个家蚕WGS(whole genome shotgun sequence)(dbj|BAAB01119085．1,contis504766)的nt472-874有92％的同源性,其中存在11个空缺位点(Gaps);RM的nt1070-1301与另一个家蚕WGS(dbj|BAAB01141578．1,contig554782)的nt262-31有91％的碱基相同,其中存在2个Gaps。进一步根据RS和RM序列合成SCAR标记引物PS-1(FP:5’ttccccccagtacgcaataac3’,RP:5’ ttccccccagacgtcacgtact3’)和PM-1(FP:5’ttcccccagtgatggaatttacg3’,RP:5’ttccccccagtccaatgttaca3’),能够准确、快速地鉴别所标记的苏菊、明虎及其F1蚕品种。

桑黄的研究与应用

桑黄是药用真菌中十分名贵的中药材,对增强人体免疫功能以及治疗疾病等方面都有明显作用。本文介绍了桑黄的形态特征、人工培养、有效成分的提取纯化及其在医疗保健工作中的积极作用,为进一步开展桑黄的研究工作提供参考。

蛋白酶抑制剂的研究与应用

蛋白酶抑制剂可以抑制昆虫的生长和发育 ,近年来在抗虫基因工程中得到了广泛的应用。也有研究表明 ,蛋白酶抑制剂与植物的抗病性也有一定的关系。在生物体内 ,酶与相应的抑制剂是处于一种相互制约的平衡状态 ,这种状态维持了生物的各种代谢平衡。本文综述了蛋白酶抑制剂的研究进展情况 ,同时探讨了蛋白酶抑制剂抗虫效果的影响因素、蛋白酶抑制剂作为抗虫蛋白的优势、存在问题、解决措施及其应用前景。

老挝家蚕线粒体cox3基因序列分析及分子进化研究初探

对老挝家蚕品种L11的线粒体DNA(mitochondrial DNA,mtDNA)cox3基因(cox3)进行PCR扩增、克隆和序列分析。结果表明,在测定的909bp的片段中,含有ATPase 6基因及tRNA-Gly基因的部分序列和cox3全序列。其中,cox3读码框包括789个核苷酸,编码262个氨基酸。L11 cox3和已经公布的家蚕(中国家蚕品种夏芳、日本家蚕Aojuku、韩国家蚕Backojam)mtDNAcox3基因完全一致,但与日本野桑蚕、中国野桑蚕的氨基酸同源性分别为99%和98%。