坏死性小肠结肠炎动物模型建立方法的改进与评价

目的目前新生儿坏死性小肠结肠炎(necrotizing enterocolitis,NEC)动物模型的构建方式仍不统一,本研究旨在明确更贴切临床NEC患儿实际情况的动物建模方式。方法随机将54只C57BL/6新生小鼠分为五组,依次为:对照组(Ctrl组,10只)、缺氧+人工喂养组(HF组,10只)、缺氧+人工喂养+冷刺激组(Cold组,12只)、缺氧+人工喂养+脂多糖(lipopdysaccharide,LPS)组(LPS组,11只)、缺氧+人工喂养+NEC肠内细菌组(Bac组,11只);分别建立NEC动物模型后,评估肠道组织病理、NEC相关肠上皮屏障蛋白(β-catenin、Occludin)和肠上皮细胞死亡标记性分子(CC3、RIPK1、PARP1)以及促炎细胞因子(IL-6、TNF-α、MCP1)的表达变化。结果按照肠道组织学Nadler评分≥2分视为NEC样肠道损伤。本研究除Ctrl组和HF组外,其余三组NEC造模的肠道组织病理均满足NEC样肠道损伤标准。与HF组(30%)、Cold组(83.3%)和LPS组(81.8%)相比,Bac组的建模成功率最高(100%),且造模期间Bac组小鼠的精神状况、腹胀腹泻、活动度等与NEC临床情况更为贴切,同时Bac组小鼠的肠道屏障蛋白β-catenin和Occludin表达下降,与Ctrl组相比,差异有统计学意义(P<0.05)。LPS组和Bac组肠上皮细胞死亡标记性分子RIPK1和PARP1表达上调,炎症因子IL-6、TNF-α和MCP1表达水平增加,与Ctrl组相比,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论本研究成功比较了4种NEC动物模型的建立方法,明确了一种更贴近临床NEC患儿实际情况的动物建模方法,即"缺氧+人工喂养+NEC肠内细菌"。该造模方法成功率高,肠道组织病理损伤、肠道屏障蛋白表达和全身炎症反应与临床上NEC患儿特征相似度更高。