大动物胸腺修饰诱导同种心脏移植免疫耐受的实验研究

使用胸腺修饰和γ射线全身照射方法预处理受体猪 ,来评估该诱导免疫耐受方法用于大动物同种异体心脏移植的可能性。动物分组 :空白组不加处理行异位心脏移植 ;对照组受体单用 2Gyγ 射线全身照射 ;实验组受体全身照射加胸腺内注射供体脾细胞 ,两组预处理后 ,观察外周血中淋巴细胞及其亚群CD4、CD8水平的变化以及使用混合淋巴细胞反应(MLR )来了解其免疫功能的相关改变。预处理后 14d ,行异位心脏移植 ,观察移植物生存时间 ,并检测术后IL 2、IL 10水平变化。接受照射 4 8h后淋巴细胞较照射前显著减少 (P <0 0 5 ) ,流式细胞仪计数CD4、CD8水平也明显下降 ,但CD4下降更为明显 ;实验组受体胸腺修饰后第 2周 ,混合淋巴细胞反应刺激效应有所下降 (P <0 0 5 ) ,而单纯照射组预处理前后无显著差异 (P >0 0 5 )。实验组供心存活期 (MST 7 4d )较空白组 (MST 4 2d )和照射组 (MST 4 6d )明显延长 (P <0 0 5 ) ,而空白组与单纯照射组比较无显著差异 (P >0 0 5 )。实验组移植后 1～ 5dIL 2的水平明显低于对照组和空白组 (P <0 0 5 ) ,IL 10水平三组无明显差异 (P >0 0 5 )。实验组预处理后 ,机体产生了一定程度的免疫抑制 ,但并未获得在小动物实验中所获得的所谓“永久性”免疫耐受 。

异种骨髓间充质干细胞胸腺修饰诱导免疫耐受的可行性研究

目的:确定骨髓间充质干细胞(BMSCs)在异种胸腺内的演化过程,为进一步进行BMSCs胸腺修饰诱导异种免疫耐受的研究提供可行性依据。方法:取豚鼠BMSCs经分离纯化体外扩增至第3代,并行胎牛血清-Fe2O3和4,6-二咪基-4-联苯基吲哚(DAPI)标记,标记后的豚鼠BMSCs行胸腺注射,7天后进行切片普鲁士蓝-中性红染色和荧光显微镜观察豚鼠BMSCs演变过程。结果:BMSCs移植至异种胸腺中能够生存,并能转化为多种组织细胞成分,即仍具有多向分化能力。结论:异种BMSCs胸腺修饰在诱导异种受体移植免疫耐受方面将是可行的。

异种胸腺修饰对大鼠抗豚鼠天然抗体产生的影响

为观察异种胸腺修饰对大鼠抗豚鼠天然抗体产生的影响 ,将供体豚鼠和受体SD大鼠随机分成对照组 (a组 )、全身照射组 (b组 )、照射 +胸腺注射组 (c组 ) ,a组大鼠腹腔内注射经处理的豚鼠脾淋巴细胞 (5× 10 6个 ) ,7d后流式细胞仪法检测抗豚鼠IgM及IgG类天然抗体水平的变化 ,b、c组在腹腔注射异种抗原前 17d接受全身照射 ,c组大鼠另在全身照射后 3d接受胸腺内豚鼠脾淋巴细胞注射。结果表明 :a组和b组中 ,腹腔注射后两类天然抗体的水平均明显上升 (P <0 0 1) ,c组中 ,腹腔注射后IgM类的水平亦明显上升 (P <0 0 1) ,而IgG类上升受抑。提示异种胸腺修饰能抑制IgG类天然抗体的生成 ,但对IgM类天然抗体的产生无明显影响。

笼养恒河猴血清天然抗体IgM的检测

采用流式细胞术连续监测 8只幼年猴自出生后 1月～ 5月天然抗体的演变 ,并检测 9只成年猴天然抗体IgM水平。幼年猴 1月龄前天然抗体IgM阳性细胞比例较低 (9 9%± 6 3% ) ,到 3月龄时可达成年猴的 4 0 % ,5月龄时接近成年水平。 9只成年猴天然抗体IgM阳性细胞比例变化幅度很大 ,从 94 9%到 2 6 3% (均数 77 3%± 2 1 5 % )。提示 3月龄前幼年猴可用作避免超急性排斥反应的受体模型。不管是成年猴还是幼年猴 ,被选择为实验受体进行移植研究时 ,应事先对其体内的天然抗体水平进行检测 ,以确保实验的可比性。