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抗vWF与GPIb-IX结合部位的噬菌体呈现型单链抗体制备及功能研究
1
作者
祝怀平
王迎春
+3 位作者
季顺东
江淼
白霞
阮长耿
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2005年第4期308-311,314,共5页
目的:为了研制新型特异性抗血栓制剂。方法:利用噬菌体展示文库技术筛选与vWF- A1区有高亲合力单链抗体(ScFv) ;基因重组的方法构建高效表达载体pET 2 0b(+) ScFv ,在大肠杆菌中诱导表达;夹心ELISA方法鉴定此单抗的抗原结合活性;瑞斯...
目的:为了研制新型特异性抗血栓制剂。方法:利用噬菌体展示文库技术筛选与vWF- A1区有高亲合力单链抗体(ScFv) ;基因重组的方法构建高效表达载体pET 2 0b(+) ScFv ,在大肠杆菌中诱导表达;夹心ELISA方法鉴定此单抗的抗原结合活性;瑞斯脱霉素诱导的血小板聚集试验(RIPA)测定ScFv对血小板聚集的抑制作用。结果:噬菌体展示技术筛选的ScFv在大肠杆菌中成功地诱导表达,表达的ScFv占菌体总蛋白的4 1% ,以包涵体形式存在;经纯化复性的ScFv可以与vWF、rvWF- A1、rvWF- A1 A3结合,但不与rvWF A3、BSA反应;ScFv具有抑制RIPA功能,抑制率为73. 7%。结论:在大肠杆菌中高效表达的噬菌体展示技术筛选的抗vWF A1区ScFv可特异性与vWF- A1区结合,而抑制瑞斯脱霉素诱导的血小板聚集,显示出很好的应用前景,为研制新型抗栓药物奠定基础。
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关键词
VWF
血栓
抗体/ScFv
表达
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职称材料
题名
抗vWF与GPIb-IX结合部位的噬菌体呈现型单链抗体制备及功能研究
1
作者
祝怀平
王迎春
季顺东
江淼
白霞
阮长耿
机构
苏州大学附属第一医院江苏血液研究所江苏核医学重点实验室
出处
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2005年第4期308-311,314,共5页
基金
国家自然科学基金资助项目 (3 0 0 70 3 2 2 )
文摘
目的:为了研制新型特异性抗血栓制剂。方法:利用噬菌体展示文库技术筛选与vWF- A1区有高亲合力单链抗体(ScFv) ;基因重组的方法构建高效表达载体pET 2 0b(+) ScFv ,在大肠杆菌中诱导表达;夹心ELISA方法鉴定此单抗的抗原结合活性;瑞斯脱霉素诱导的血小板聚集试验(RIPA)测定ScFv对血小板聚集的抑制作用。结果:噬菌体展示技术筛选的ScFv在大肠杆菌中成功地诱导表达,表达的ScFv占菌体总蛋白的4 1% ,以包涵体形式存在;经纯化复性的ScFv可以与vWF、rvWF- A1、rvWF- A1 A3结合,但不与rvWF A3、BSA反应;ScFv具有抑制RIPA功能,抑制率为73. 7%。结论:在大肠杆菌中高效表达的噬菌体展示技术筛选的抗vWF A1区ScFv可特异性与vWF- A1区结合,而抑制瑞斯脱霉素诱导的血小板聚集,显示出很好的应用前景,为研制新型抗栓药物奠定基础。
关键词
VWF
血栓
抗体/ScFv
表达
Keywords
vWF
Thrombosis
Antibody/signle chain Fv
Expression
分类号
Q78 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
抗vWF与GPIb-IX结合部位的噬菌体呈现型单链抗体制备及功能研究
祝怀平
王迎春
季顺东
江淼
白霞
阮长耿
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2005
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