胃癌术中腹腔灌洗液的CEA^(··)mRNA的检测及意义

目的 探索建立一种较敏感的检测胃癌手术时腹腔灌洗液中游离癌细胞的方法。方法 应用实时荧光逆转录 -多聚酶链反应 (RT PCR )方法定量检测 65例胃癌术中腹腔灌洗液的CEA mRNA ,同时用腹腔冲洗细胞学方法 (PLC )涂片寻找癌细胞。设 5例良性胃疾病的术中腹腔灌洗液及5例健康志愿者血液为阴性对照。结果 (1)良性胃病组和对照组CEA mRNA均为阴性 ;(2 )胃癌组中RT -PCR方法检测游离癌细胞的阳性率为 47.7% ,无假阳性 ;而PLC的检出率仅为 12 .3 %。胃癌组中CEA mRNA阳性率与肿瘤浸润深度、病理分期 (I +II和III +IV期 )、有无腹膜转移均有明显相关性 (均P 0 .0 5 )。结论 实时荧光RT PCR较PLC方法检测胃癌患者腹腔灌洗液中的游离癌细胞具有更高的敏感性及特异性 ;游离癌细胞的存在和肿瘤临床病理因素有一定的相关性。

实时RT-PCR及电化学技术检测胃癌术中腹腔灌洗液中游离癌细胞的比较

目的建立实时RT-PCR及电化学技术两种较敏感的检测胃癌术中腹腔灌洗液中游离癌细胞的方法,并对这两种检测方法进行比较。方法分别采用实时荧光RT-PCR和电化学发光方法检测65例胃癌术中腹腔灌洗液中CEAmRNA及CEA蛋白,同时进行腹腔冲洗细胞学方法(peritoneallavagecytology,PLC)涂片寻找癌细胞。收集5例良性胃疾病的术中腹腔灌洗液,5例健康志愿者血液为阴性对照。结果(1)RT-PCR方法检测游离癌细胞的阳性率为47.7%,电化学发光法的阳性检出率为35.4%,两者均无假阳性。而PLC的检出率仅12.3%。(2)电化学发光方法具有快速、试剂稳定、无污染和衰变、自动化程度高,且较经济等优点。(3)CEAmRNA、CEA蛋白阳性率在不同的病理分期组(+期和+期)中差异有显著性(P<0.05)。结论实时荧光RT-PCR方法和电化学发光方法检测游离癌细胞各有优势,游离癌细胞的存在与肿瘤病理状态有一定相关性。

胃癌术中腹腔游离癌细胞检测临界值的确定及其临床意义

目的探讨胃癌术中腹腔游离癌细胞(FCC)检测的最佳阳性判定值,以及腹腔FCC的存在对预后的影响。方法用实时荧光RT-PCR方法检测术中腹腔FCC,并进行5年的随访。用MedCalc软件分析FCC最佳阳性判定值;[大于此值表示FCC存在,标记为FCC(+)],并前瞻性地分析FCC(+)组及(-)组与预后的关系。最后用多因素Cox回归模型分析影响预后的独立因素。结果(1)最佳阳性判定值为31.21拷贝/mL时约登指数最高;(2)FCC(+)与(-)组的平均存活期分别为17.2个月和48.7个月,中位存活期分别为8.1个月和60.0个月;5年累积存活率分别为9.1%和67.4%。Kaplan-Meier生存分析显示,FCC(-)组生存时间明显长于FCC(+)组(P=0.000)。Cox模型分析发现FCC,浆膜及远处转移是影响生存预后的独立因素(P<0.05)。结论(1)FCC最佳阳性判定值为31.21拷贝/mL;(2)腹腔FCC是影响预后的独立危险因素之一,FCC(+)反映手术时肿瘤存在扩散状态,预示患者预后较差。

术中腹腔游离癌细胞检测用于胃癌TNM分期

目的探讨术中腹腔游离癌细胞的检测在胃癌TNM分期中的应用。方法用实时荧光RT-PCR方法检测胃癌患者术中腹腔游离癌细胞（freecancer cell，FCC），并进行5年的随访。用MedCale软件分析FCC最佳阳性判定值，大于此值表示FCC的存在，标记为FCC（＋），然后把FCC（＋）当作远处转移（MI）重新进行分期，并作新的生存曲线图。结果（1）在最佳阳性判定值为31．21拷贝／ml时约登指数最高；（2）把FCC（＋）、当作MI重新进行分期，各分期之间的5年生存曲线显示：Ⅰ～Ⅱ期P=0．134；Ⅱ～Ⅲ期P=0．004；Ⅲ～Ⅳ期P=0．022。新分期各分期的5年生存率分别为Ⅰ期100％（18／18），Ⅱ期88％（7／8），Ⅲ期24％（4／17），Ⅳ期9％（2／22）。结论（1）FCC最佳阳性判定值为31．21拷贝／ml；（2）现行TNM分期中加入FCC检测结果则可使其更加完善，能更准确地评估进展期胃癌患者的手术预后。