免疫组化技术应用中的影响因素分析

目的分析免疫组化操作过程中的影响因素、探讨操作及改进方法。方法选取我院免疫组化病例1 238例,总结分析操作过程及各种影响因素。结果染色结果良好,与临床病理相符或基本相符1 126例(90.9%);脱片42例(3.3%);非特异染色37例(2.9%);染色弱29例(2.2%),阴性者5例(0.4%)。结论影响免疫组化结果的因素很多,需注意各个环节的操作规范才能获得满意的免疫组化结果。

脑肿瘤干细胞放射敏感性的实验研究

目的评价脑肿瘤干细胞(brain tumorstem cell,BTSC)与胶质瘤细胞系SHG-44细胞放射敏感性的差异。方法SHG-44细胞分别接种于含10%胎牛血清的DMEM/F12培养基和无血清的DMEM/F12培养基(添加bFGF和EGF)中。CD133免疫细胞化学染色鉴定BTSC。0、0.5、1、2、3、4、6、8、10、20GyX线照射SHG-44细胞和BTSC后以流式细胞仪检测两种细胞的细胞周期及细胞凋亡率,绘制SHG-44细胞和BTSC的存活曲线。结果SHG-44细胞中存在BTSC,后者能在无血清的DMEM/F12培养基中存活并悬浮生长,增殖形成克隆球,具有自我更新和增殖能力,表达特异性标志物CD133。两种细胞在X线照射后细胞周期无明显差异,BTSC的细胞凋亡率低于SHG-44细胞(P<0.05),细胞存活率高于SHG-44细胞(P<0.01)。结论BTSC的放射敏感性较SHG-44细胞明显降低,是胶质瘤放疗抵抗的主要原因。

Livin和脆性组氨酸三联体的表达在确定乳腺癌保乳手术切缘及术中放疗安全靶区中的意义

目的:探讨凋亡抑制蛋白Livin和脆性组氨酸三联体(fragile histidine triad,FHIT)作为乳腺癌保乳手术中手术切缘和放疗安全靶区界定分子指标的可行性。方法:分别采用免疫组织化学法和RT-PCR法检测30例乳腺癌及距离肿瘤边缘1、2和3 cm处癌旁组织中Livin和FHIT蛋白及其mRNA的表达,并与HE染色病理切片进行比对。结果:Livin蛋白及其mRNA在乳腺癌组织和癌旁组织(距离肿瘤边缘1、2和3 cm)中的表达率分别为66.67%、20.83%、2.50%和0.00%,以及73.30%、19.17%、3.33%和0.00%;FHIT蛋白及其mRNA在乳腺癌组织及其癌旁组织(距离肿瘤边缘1、2和3 cm)中的表达率分别为46.67%,76.67%,82.50%和86.67%,以及53.33%、73.33%、85.00%和87.50%。Livin mRNA与FHITmRNA的表达呈负相关(r=-0.346,P<0.01)。距离肿瘤边缘1、2和3 cm处癌旁组织中Livin和FHIT的表达差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:Livin和FHIT在乳腺癌及其不同距离癌旁组织中的表达存在差异,距离肿瘤边缘1 cm以外的范围是比较合理的术中电子线照射区域。

脑胶质瘤MGMT基因启动子甲基化与蛋白表达的研究

目的探讨脑胶质瘤中MGMT基因启动子甲基化与MGMT蛋白表达的相关性及MGMT基因变异与脑胶质瘤临床病理学特征的关系。方法采用甲基化特异性PCR(MSP)的方法检测49例脑胶质瘤组织中MGMT基因启动子甲基化情况,免疫组织化学法检测脑胶质瘤MGMT蛋白表达情况。结果49例脑胶质瘤组织中,MGMT基因启动子甲基化阳性率为53.06%(26/49);脑胶质瘤组织中MGMT基因启动子区甲基化阳性率在脑胶质瘤WHOⅡ、Ⅲ、Ⅳ级中分别为45.45%、50.0%和72.72%,三者间比较差异无统计学意义(P=0.32);在不同性别、年龄之间MGMT基因启动子甲基化阳性率差异也无统计学意义(P>0.05)。MGMT蛋白表达阳性率为55.10%(27/49),其中29.62%(8/27)MGMT基因启动子甲基化为阳性;而22例MGMT蛋白表达阴性的组织中,81.81%MGMT基因启动子甲基化阳性(18/22)。MGMT蛋白表达与其基因启动子甲基化呈负相关(r=-0.520,P<0.05),不同性别、年龄及病理学分级之间MGMT蛋白表达率差异均无统计学意义(P>0.05)。结论MGMT基因启动子区甲基化可能是MGMT蛋白失活的重要原因之一,检测组织中MGMT基因启动子的异常甲基化可以作为肿瘤早期诊断的一项指标;MSP是检测MGMT基因启动子区甲基化灵敏和可靠的方法。