四种肿瘤标志物联合检测对胃癌的诊断价值

对已确诊的胃癌患者于术前测量其相关血清肿瘤标志物,分析不同的联合检测对胃癌的诊断价值,选出临床诊断胃癌敏感性最佳的组合。用电化学发光免疫分析法和酶联免疫法测定56例胃癌患者及30名健康对照组的血清CEA、CA19-9、CA72-4、MG7-Ag(胃癌抗原)。结果显示,对照组CEA为2.1±0.8μg/L,CA19-9为14.5±7.3U/mL,CA72-4为4.2±1.3mU/L,MG7-Ag为2.8±1.0μg/L。胃癌患者术前CEA为28.4±91.2μg/L,CA19-9为35.9±71.9U/mL,CA72-4为9.8±40.8U/mL,MG7-Ag为3.6±4.4μg/L。胃癌患者术前血清4项肿瘤标志物中的CEA和CA72-4较对照组有明显增高,有显著性差异(P<0.05)。经分析,4项血清肿瘤标志物的组合中,第11、9、8组合(见正文表3)的敏感性分别是69.6%、63.9%、63.6%。结论是CEA、CA72-4联合检测对胃癌诊断有意义,CEA与CA72-4、MG7-Ag的组合为首选。

榄香烯乳联合顺铂抑制胃癌AGS细胞生长的实验研究

目的:研究榄香烯乳(elemene)单独或联合顺铂(cisplatin)对人胃癌AGS细胞增殖和周期的影响,并探讨两药是否有协同作用及其可能的分子机制。方法:榄香烯乳单独或联合顺铂作用人胃癌AGS细胞。MTT法检测细胞增殖;流式细胞术检测细胞周期;BrdU掺入标记增殖的AGS细胞,免疫荧光细胞染色法测定增殖细胞数;Western印迹检测细胞周期蛋白D1(cyclinD1)的表达。结果:榄香烯乳(10-160μg/ml)对AGS细胞生长的抑制作用呈现浓度和时间依赖性,与对照组比较,除10μg/ml作用12h外,其它各组差异均有统计学意义(P<0.05)。细胞周期中DNA合成前期(G0/G1期)细胞比例增加,DNA合成期(S期)细胞比例下降。榄香烯乳作用AGS细胞后,降低BrdU的渗入率,减少cyclinD1的表达。榄香烯乳(80μg/ml)联合顺铂(4μg/ml)对细胞增殖和周期的抑制明显强于单独用药(P<0.05)。结论:榄香烯乳可抑制人胃癌AGS细胞的增殖并阻滞细胞于G0/G1期,与顺铂联合具有协同作用,其机理可能与降低cyclinD1的表达有关。

昼夜自发性促性腺激素水平在性早熟诊断中的意义

目的:探讨昼夜自发性促性腺激素(Gn)水平在性早熟诊断中的价值。方法:采用免疫化学发光法检测40例性早熟女孩白天和夜间自发性黄体生成素(SLH)和自发性滤泡刺激素(SFSH),同时设正常女孩为正常对照组。结果:中枢性性早熟(CPP)(26例)与非中枢性性早熟(NCPP)(14例)女孩的日间SLH无显著性差异(F检验,P>0.05),但夜间的有显著性统计意义(F检验,P<0.001)。CPP组和NCPP组日间的及其夜间的SLH均值均高于正常对照组(F检验,分别为P<0.001、P<0.001、P<0.001和P<0.005)。当日间SLH≥0.3IU/L时,78.8%为CPP,在CPP中为80.8%,而在NCPP中为42.9%。当日间SLH≥0.7IU/L并同时夜间SLH≥1.1IU/L时,100%为CPP。PLH在(5￣8)IU/L之间的CPP女孩均无日间SLH≥0.7IU/L的同时又有夜间的SLH≥1.1IU/L的现象。结论:免疫化学发光分析法(ICMA)有可能提升自发性Gn水平在小儿性早熟等内分泌疾病诊疗中的临床价值,但SLH尚不宜作为CPP的筛查手段,当昼夜的SLH同时明显增高时有望作为CPP的重要实验室指标之一。

4～6岁正常儿童昼夜血清基础促性腺激素水平的观察

目的进一步了解正常儿童青春期之前昼夜血清基础促性腺激素分泌的生理规律,并为性早熟的诊断和监测提供正常参考依据.方法74名4～6岁正常儿童,男54名,女22名.采集每个儿童昼夜血样,运用全自动免疫化学发光分析仪分析所有标本的血清LH和FSH,采用Excell97软件对所得数据进行统计分析.结果男童昼夜基础促性腺激素水平无显著性差异.女童夜间基础促性腺激素水平高于白天;4～5岁年龄组夜间基础促性腺激素水平亦高于白天.结论青春期之前夜间的促性腺激素脉冲性分泌增多现象的年龄,在女童可能较通常认为的在青春期之前1～2年要早得多.

鼠抗人4-1BB单克隆抗体的研制及其生物学特性的鉴定

目的:鼠抗人4-1BB分子功能性单克隆抗体(mAb)的研制及其生物学特性的鉴定。方法:以高表达人4-1BB分子的转基因细胞293T/4-1BB为免疫原,常规免疫BALB/c小鼠,采用B淋巴细胞杂交瘤技术进行细胞融合,并以293T/4-1BB为阳性抗体筛选细胞,293T/mock为阴性抗体筛选细胞,经免疫荧光标记和流式细胞术(FCM)分析、反复筛选和多次克隆化培养,筛选出特异分泌鼠抗人4-1BB分子mAb的杂交瘤细胞株;采用W estern b lot、间接免疫荧光法、竞争结合抑制试验、3H掺入和细胞凋亡分析等方法对mAb进行生物学特性的鉴定。结果:成功获得3株持续、稳定分泌鼠抗人4-1BB mAb的杂交瘤细胞株,命名为1G5、4B11和9F11。对mAb的生物学功能的研究结果表明,3株mAb均能识别活化T细胞和单核细胞来源的树突状细胞(Mo-DC)表达的4-1BB分子。mAb 4B11能有效地激发T细胞体外增殖、抑制其凋亡,并能促进Mo-DC体外扩增,上调CD80、CD83、CD86和CD1α的表达。结论:获得的3株分泌鼠抗人4-1BB mAb的杂交瘤,所分泌的抗体具有特异性地识别人4-1BB分子;其中4B11 mAb具有激发T细胞增殖及促进Mo-DC体外扩增与成熟的作用,为激发型4-1BB mAb。

乙肝患者胃肠道肿瘤的高风险

目的:检测患者血清乙肝病毒DNA-PCR、糖蛋白抗原CA199、糖蛋白抗原CA125、癌胚抗原(CEA)、甲胎蛋白(AFP),结合检测结果,统计和研究乙肝患者胃肠道肿瘤的发病概率。方法∶乙肝病毒DNA检测用PCR法定量;CA199,CA125,CEA,AFP采用电化学发光法,选择1664例住院患者且乙肝DNA病毒拷贝数大于500拷贝/ml,其中295例经病理组织学和临床确诊为胃肠道肿瘤患者,再结合CA199,CA125,CEA,AFP高低来分别统计,分析各种胃肠道肿瘤的发生比例和趋向性。结果:乙肝病毒DNA-PCR拷贝数高于6000拷贝/ml好几年的患者或带菌年数较长的中年患者胃肠道肿瘤发病率很高,与正常人群差异有显著性(P<0.01)。结论∶乙肝病毒DNA-PCR升高的患者及病程长的人群中胃肠道肿瘤趋势增高。

激发型CD40单克隆抗体联合特异性细胞毒T淋巴细胞对B细胞淋巴瘤的免疫治疗作用

目的 研究激发型CD40单克隆抗体5C11联合特异性细胞毒T淋巴细胞（CTL）对B细胞淋巴瘤的免疫治疗作用。方法 人B细胞淋巴瘤Daudi细胞株经5C11刺激24或48h，Annexin V／PI结合实验测定凋亡率，流式细胞术检测Fas表达率。外周血单个核细胞来源的树突状细胞（DC），经凋亡Daudi细胞负载、5C11诱导成熟后，与自体T细胞混合培养，激发特异性CTL，JAM法检测5C11、CTL或5C11联合CTL对Daudi细胞的杀伤效应。皮下注射Daudi细胞，建立人源化SCID小鼠B细胞淋巴瘤模型；接种肿瘤细胞1周、3周后，分别经腹腔注射5C11、CTL、5C11＋CTL进行治疗，通过肿瘤生长曲线、荷瘤小鼠生存期评价疗效。结果 5C11作用后，Daudi细胞表面Fas的表达率显著上调，但细胞凋亡率没有明显改变。特异性CTL能有效杀伤靶细胞，且与5C11联合应用后，Daudi细胞DNA片段形成率显著增高，8h为71．9％±4．0％，12h达82．6％±4．4％。经5C11、CTL、5C11联合CTL治疗后，荷瘤小鼠体内肿瘤生长速度均显著减缓，而且在低肿瘤负荷小鼠中，CTL、5C11联合CTL治疗分别取得了30．0％和70．0％的完全缓解率，与对照组相比，各治疗组小鼠生存期显著延长。结论 激发型CD40单抗5C11可显著上调细胞表面Fas的表达，增强Daudi细胞对诱导凋亡的敏感性，从而促进肿瘤特异性CTL的体外杀伤和体内治疗效应。

牛奶中雌性激素对雄性幼鼠血脂代谢的影响

目的研究牛奶中雌性激素对雄性幼鼠血脂代谢的影响。方法48只21日龄雄性SD幼鼠随机等分为4组,每组12只。分别定量喂食妊娠奶牛奶、市售纯牛奶、产后奶牛奶和实验配方奶。于其53日龄时应用全自动生化分析仪检测各组幼鼠血清总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)和尿肌酐(Cr)水平;应用免疫化学发光法(ICMA)检测各组幼鼠血清孕酮(P4)、尿游离雌三醇(UFE3)水平。采用SPSS13.0软件进行统计学分析。结果妊娠奶牛奶、市售纯牛奶、产后奶牛奶和实验配方奶乳清中的总雌二醇分别为1189.66pmol/L、833.98pmol/L、588.17pmol/L和286.48pmol/L;P4分别为9.76nmol/L、10.18nmol/L、2.83nmol/L和0.92nmol/L;血清TC分别为(1.78±0.29)mmol/L、(1.94±0.20)mmol/L、(2.10±0.28)mmol/L和(2.11±0.22)mmol/L,产后奶牛奶组和实验配方奶组与妊娠奶牛奶组比较差异均有统计学意义(Pa<0.05);4组间血清TG、HDL-C、LDL-C、P4和UFE3/Cr差异均无统计学意义(Pa>0.05)。结论妊娠奶牛奶可能对雄性SD幼鼠有降血清TC作用,其机制可能与雌二醇和P4联合作用有关。

Menin在胃癌细胞中的表达

我们选取5株不同分化程度的人胃癌细胞，检测Menin的表达，现报道如下。