云南省红河州和德宏州吸毒人群中HIV-1/HCV共感染者HIV-1耐药性分析

目的了解云南省红河州和德宏州吸毒人群中HIV-1/HCV共感染者HIV-1耐药情况,为该地区该人群的抗病毒治疗提供理论指导。方法筛查HIV-1/HCV共感染吸毒患者血液样本,对HIV-1 pol基因耐药位点进行测序及比对分析。结果在305例HIV-1/HCV共感染吸毒者中,成功获得pol基因的有202例。其中有32例接受HIV-1抗病毒治疗,81例未接受治疗,89例治疗信息未知。治疗组的耐药发生率为40.6%(13/32),显著高于未治疗组的8.6%(7/81)(P<0.05)。治疗组主要对奈韦拉平、依非韦伦、拉米夫定、司他夫定和恩曲他滨高度耐药,而未治疗组仅个别对沙奎那韦、依曲韦林和利匹韦林高度耐药。结论云南省红河州和德宏州吸毒人群中HIV-1/HCV共感染者HIV-1耐药发生率处于较高水平,且现有的一线、二线治疗方案仍行之有效,一线治疗失败者应尽早转入二线治疗。

富马酸替诺福韦二吡呋酯体外抗寨卡病毒活性研究

富马酸替诺福韦二吡呋酯(tenofovir disoproxil fumarate, TDF)是一种核苷类似物(nucleoside analogues),已广泛用于临床治疗人类免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus, HIV)和乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)感染。本研究旨在探讨TDF是否具有体外抗寨卡病毒(Zika virus, ZIKV)活性。首先通过噬斑抑制实验在细胞水平检测TDF是否具有抑制ZIKV作用,随后通过实时荧光定量PCR (real-time quantitative PCR)实验和蛋白质印迹(Western blot)实验分别在RNA水平和蛋白水平进一步验证TDF的抗ZIKV活性,最后通过MTT实验检测TDF的细胞毒性。结果发现, TDF不仅可降低ZIKV感染细胞后噬斑形成,还可抑制ZIKV RNA复制和ZIKV NS2B蛋白的表达,其对ZIKV的半数有效浓度(50%effective concentration, EC50)为14.96~27.47μmol·L-1。阳性药物利巴韦林抑制ZIKV的EC50为56.01±12.16μmol·L-1。MTT检测结果表明, TDF和利巴韦林的细胞毒性很小,半数细胞毒浓度(50%cytotoxic concentration, CC50)均大于500μmol·L-1。通过CC50/EC50计算出TDF的治疗指数(therapeutic index, TI)大于18.20,高于阳性对照药利巴韦林。本研究表明, TDF在细胞、RNA及蛋白水平均具有很好的体外抗ZIKV活性,有望成为抗ZIKV治疗的候选药物。

FDA已批准上市药物托伐普坦可在体内外抑制寨卡病毒感染

寨卡病毒(Zika virus,ZIKV)是黄病毒属中一个被忽视的病毒。近年来,由于其与小头畸形和其他先天性缺陷疾病的关系,引起了全球的广泛关注。目前,仍没有抗ZIKV的疫苗或治疗方法批准上市。我们通过噬斑实验及MTT实验筛选鉴定出一种FDA已批准上市药物--托伐普坦,具有抗亚洲谱系寨卡病毒活性且细胞毒性很低。病毒产量降低实验和蛋白印迹实验也进一步证实了托伐普坦的抗寨卡病毒活性。分时给药实验表明托伐普坦在细胞感染ZIKV后6到14 h发挥抗ZIKV活性,即作用于ZIKV生命周期的进入后阶段。此外,托伐普坦对非洲普系寨卡病毒也具有抑制作用,表明托伐普坦的抗ZIKV活性并不是毒株依赖性的。值得注意的是,托伐普坦还可降低ZIKV感染小鼠的死亡率。因此,托伐普坦是一个潜在的抗ZIKV治疗药物,值得进一步研究。