高职生物医药类专业开展现代学徒制的特殊问题及对策——以苏州工业园区服务外包职业学院为例

生物医药产业具有高技术性的特点为人才培养提出了新的挑战,而在高职生物医药类专业开展现代学徒制是应对挑战的有效途径,然而在实施过程中存在一些问题。因此,文中详细阐述了问题所在,并就这些问题,以国家最新政策为依据,提出了相应的对策。

基于多孔卷积神经网络的图像空间结构信息细节表征

针对传统图像空间结构信息表征方法存在细节表征模糊度较高、信息训练损失较高等问题,提出一种新的基于多孔卷积神经网络的图像空间结构信息细节表征方法。该方法通过图像空间结构信息细节相似性度量,并以图像的形状、颜色和纹理特征对图像空间结构信息细节进行编码,再去除图像冗余信息,利用多孔卷积神经网络对图像空间结构的深度信息进行融合,从而完成图像空间结构信息的细节表征。实验结果表明,基于多孔卷积神经网络的图像空间结构信息细节表征方法在模糊度、训练损失、图像相似性等方面都比传统的3种方法优越,能够清晰地表征图像空间结构信息。

基于CRISPR/Cas9基因编辑技术构建PD-L1-GFP报告基因HT29细胞株

利用CRISPR/Cas9基因编辑技术和同源重组技术在PD-L1基因的特定位置敲入绿色荧光蛋白(GFP)序列,构建含有PD-L1-GFP报告基因的结肠癌细胞(HT29)稳定细胞株。根据CRISPR-Cas9靶点设计原则,针对PD-L1基因终止密码子设计两对sgRNA,退火形成双链后连接至Lenti-V2空载质粒中,转化培养后提取质粒并测序验证。对于正确的Lenti-V2-sgRNA重组质粒,T7E1酶切验证其基因编辑效率。根据靶点位置设计左同源臂+GFP+右同源臂序列合成Donor片段,双酶切后连接至pUC19,重组载体转化扩增后同样进行质粒提取和测序验证。将验证成功的Lenti-V2-sgRNA和pUC19-donor-GFP共转染HT29细胞,荧光显微镜检测GFP表达情况,菌落PCR及基因测序验证GFP报告基因的靶向插入效果。经酶切和测序鉴定,靶向编辑PD-L1的Cas9载体Lenti-V2-gRNA和含GFP基因的Donor质粒pUC19-donor-GFP构建成功。两个重组质粒转染HT29细胞后,显微观察、多克隆验证、单克隆筛选及鉴定结果显示,GFP成功转入HT29细胞并进行了表达,经有限稀释法筛选出的单克隆细胞荧光均一,且与对照组相比,阳性细胞克隆的基因组PCR均检测到特异条带,表明在PD-L1终止密码子前成功插入了GFP片段,细胞株构建成功。通过基因编辑技术成功构建了稳定表达PD-L1-GFP报告基因的HT29结肠癌细胞株,建立了一个可以直观在细胞上观察PD-L1是否表达以及表达的强弱程度的系统,为后期体内外筛选调控PD-L1的上游新靶点及药物奠定了基础。

工业CT在锂离子电池失效分析检测中的应用

锂离子电池的失效分析是质量控制和安全性测试的重要环节。工业CT扫描技术在不破坏锂离子电池的前提下,可用于观测电池内部因装配工艺不到位、产气等原因导致的极片接触不良、电解液分布不均匀等问题,从而出现了内阻升高、断路或者容量衰减等失效现象。针对上述问题对装配工艺进行优化,锂离子电池表现出良好的电化学性能。实验表明工业CT可以清晰获取电池内部的三维结构信息,有效分析内部缺陷,对锂离子电池的质量控制和生产工艺有指导意义。

利用CRISPR/Cas9技术构建能克隆难度序列的Stbl2^(TM)菌株

Stbl2^(TM)菌株适合克隆不稳定的外源DNA片段,但该菌株易受噬菌体侵染,且在构建某些高拷贝质粒时,难以克隆成功。利用CRISPR/Cas9技术将Stbl2^(TM)菌株的抗噬菌体相关基因fhuA和控制拷贝数的基因pcnB进行编辑,降低克隆难度,提高克隆效率。针对2个基因分别设计sgRNA,构建含有sgRNA的质粒pTarget-fhuA和pTarget-pcnB,分别将2个质粒与pCas9-Red质粒转入Stbl2^(TM)菌株中,经菌落PCR和测序验证基因正确编辑后再将2个外源质粒消除,并将2 kb的线粒体基因组序列作为外源基因,转入菌株进行最终的功能验证。结果表明:fhuA基因被成功敲除103 bp,pcnB基因被成功敲除802 bp,将高拷贝pUC57质粒转入基因编辑后的Stbl2^(TM)菌株,可明显降低质粒的拷贝数,且能正确克隆线粒体基因难度序列。该研究构建的菌株可作为后续克隆难度序列的感受态使用,还可为难度序列的基因克隆提供借鉴方法。