储存红细胞代谢产物持续影响巨噬细胞功能的初步研究

目的探究储存红细胞代谢产物持续影响巨噬细胞功能表达的情况。方法从人外周血分离诱导培养巨噬细胞,采用流式细胞术检测巨噬细胞CD14和CD68分子的表达情况,选择储存21 d悬浮少白细胞红细胞与其共培养,分别在0 h、12 h、24 h和36 h检测培养液上清中的白介素4(IL-4)和白介素6(IL-6)的含量,并采用免疫荧光的方法检测巨噬细胞CD68蛋白的表达情况。结果贴壁法和磁珠纯化法均可培养出符合条件的巨噬细胞,但磁珠纯化获得的巨噬细胞纯度更高。巨噬细胞与红细胞共培养后,不同时间的巨噬细胞CD68蛋白表达情况不同,其中24 h组CD68的表达最强。上清中IL-4和IL-6的分泌也不相同,其中IL-4含量在0 h、12 h、24 h和36 h分别为31.21 pg/mL、31.55 pg/mL、31.77 pg/mL和31.73 pg/mL,差异无统计学意义(P>0.05);IL-6含量在0 h、12 h、24 h和36 h的检测分别为2.34 pg/mL、25.56 pg/mL、65.15 pg/mL和35.47 pg/mL,差异有统计学意义(P<0.05)。结论人外周血分离培养巨噬细胞方法可靠性高。对储存红细胞刺激巨噬细胞功能变化及炎症因子研究发现储存红细胞代谢产物对机体内环境有促炎作用,可为进一步研究储存红细胞对巨噬细胞功能的影响提供理论参考和数据支持。