薯蓣皂苷片对心血管疾病血液流变学影响的系统评价

目的系统评价薯蓣皂苷片(商品名:维奥欣)对心血管疾病血液流变学的影响。方法全面收集维奥欣对心血管疾病血液流变学影响的随机对照试验(RCT),并依纳入标准进行筛选,以全血高切粘度、全血低切粘度、红细胞压积、血浆粘度、纤维蛋白原作结局指标,使用RevMan5.0软件进行Meta分析。结果维奥欣组各结局指标均优于对照组,亦优于阳性药物组(纤维蛋白原除外)。结论维奥欣可有效改善心血管疾病血液流变学相关指标,但因纳入研究的方法质量低下和可能存在发表偏倚,上述结论有待进一步开展高质量、多中心的随机双盲对照试验来证实。

在缺乏繁殖能力的食蟹猴群体中探究指长比与社会等级以及行为的关系

为了探究笼养食蟹猴Macaca fascicularis指长比与社会等级、行为之间的关系,2016年1月,在江苏省苏州西山中科实验动物有限公司猴场内筛选12只健康雌性食蟹猴,组建新的群体前测量实验个体的食指和无名指指长比率(指长比)。利用人为观察记录法和视频采集法记录群体进食顺序和个体行为,分析群体等级秩序和相应个体的行为表现。研究发现,在食蟹猴抑郁样(低头、蜷缩)、独处、运动、社交、自我护理、攻击等行为中,高、低指长比组的食蟹猴在抑郁样、独处、攻击行为上的差异有统计学意义(P<0.05)。研究表明,社会等级强度较高的食蟹猴个体具有较低的指长比比值,在社会活动中具有更强的攻击性;具有较高指长比比值的食蟹猴个体在社会环境下更容易出现抑郁倾向。

齐多夫定对原代大鼠肝细胞的毒性评价

采用二步灌流法分离大鼠肝细胞,苔盼蓝拒染试验测定细胞活力,活力达85%以上者用于实验。将肝细胞分为4组(药物剂量组、阳性对照组、阴性对照组和空白对照组),接种于各培养板(3×105个/ml):96孔板每孔200μl,每一剂量8个平行;24孔板每孔1ml,每一剂量6个平行;6孔板每孔2.5ml,每一剂量2个平行。各板置37℃、体积分数为5%的CO2培养箱培养4h,弃上清。药物剂量组分别加入齐多夫定(AZT)10、5.00、3.30、2.00、0.40和0.08mmol/L,阳性对照组加入四氯化碳(CCl4)10、2、0.5mmol/L,阴性对照组加入体积分数为1%的二甲基亚砜(DMSO)的DMEM,空白对照组加入DMEM培养液。96孔板于加样后6、12和24h测定细胞活性,24孔板于加样后6和12h收集培养上清,测定天冬氨酸转氨酶(AST)、丙氨酸转氨酶(ALT)及乳酸脱氢酶(LDH)的释放量,6孔板加样后12h将细胞苏木素-伊红(HE)染色,观察细胞形态。结果显示,与阴性对照组相比,AZT和CCl4剂量分别高于3.3和2mmol/L时,在6、12和24h均能显著降低细胞活力(P<0.05),在6、12h对AST、ALT、LDH的释放量有统计学意义(P<0.05),CCl4剂量为10mmol/L时可使细胞变小、细胞膜破裂及核碎裂,AZT剂量在3.30mmol/L以上时可引起部分细胞膜破裂、核浓缩,空白组与阴性对照组相比差异无统计学意义(P>0.05)。试验表明,AZT剂量高于3.30mmol/L时有肝细胞毒性作用,且24h内不可逆,AZT毒性明显低于CCl4。

菸花苷对全脑缺血再灌注模型大鼠的脑保护作用

目的:观察菸花苷对全脑缺血再灌注模型大鼠的保护作用。方法:建立双侧椎动脉和双侧颈动脉四动脉夹闭法致大鼠全脑缺血再灌注模型;在全脑缺血前1min尾静脉注射给药;记录大鼠的脑电图及翻正反射恢复时间,检测脑组织含水量、脑血管通透性(伊文思蓝渗透法)以及脑组织超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)含量。结果:菸花苷(2.5~10mg/kg)能显著延长全脑缺血再灌注大鼠缺血后脑电图消失时间,明显缩短再灌注后脑电图恢复时间和翻正反射恢复时间(P<0.01),明显改善脑水肿情况(P<0.05),伊文思蓝渗入量降低,脑血管通透性降低(P<0.01),并且菸花苷10mg/kg使缺血/再灌注大鼠脑组织中MDA含量显著降低(P<0.01),SOD活性显著升高(P<0.05)。结论:菸花苷对全脑缺血再灌注模型大鼠具有明显保护作用,这些作用可能是通过降低脑血管通透性及抗氧化作用实现的。

华东地区人工饲养食蟹猴血液常规和血清生化值的测定

目的建立单笼饲养食蟹猴血液常规和血清生化的参考值,了解检测指标的性别差异。方法选取254只3～5岁健康食蟹猴,雄性84只,雌性170只,在清醒状态下采血。采用全自动血细胞分析仪和全自动生化分析仪检测血液常规和生化指标,并比较不同性别组间的差异。结果经统计分析,获取了单笼饲养食蟹猴血液常规和血清生化的参考值,雌雄食蟹猴血常规指标比较,RBC、HGB、MCHC、HCT、MONO、RDW-CV、MPV、PCT、P-LCR、PDW存在极显著性差异(P<0.01),BASO、NEUT%、LYMPH%、MCH、RDW-SD存在显著性差异(P<0.05),雌雄血生化指标比较,ALT、AST、ALP存在极显著性差异(P<0.01)。结论建立了3～5岁食蟹猴血液常规和血清生化的参考值,同时表明部分指标存在性别差异。

RPL31-siRNA对人胰腺癌BxPC-3细胞裸鼠皮下移植瘤生长的抑制作用

目的:研究siRNA沉默糖体蛋白L31(ribosomal protein L31,RPL31)对人胰腺癌BxPC-3细胞裸鼠皮下移植瘤的抑制作用,探讨RPL31基因在胰腺癌中可能的作用机制.方法:设计合成靶向人RPL31基因的siRNA及阴性对照siRNA;建立人胰腺癌BxPC-3细胞的Balb/c裸鼠皮下移植瘤模型,按照移植瘤体积随机化分为3组:溶剂对照组、阴性对照组及RPL31-siRNA干预组;使用RNAi-Mate转染试剂将RPL31-siRNA进行移植瘤瘤内注射,观察各组裸鼠体内瘤体生长速度,绘制肿瘤生长曲线;采用实时定量PCR及Western blot的方法检测移植瘤组织RPL31基因的表达;免疫组织化学法(immunohistochemistry,IHC)检测裸鼠皮下移植瘤Ki-67及CD31的表达;原位末端标记技术(TUNEL)检测移植瘤组织的细胞凋亡.结果:与溶剂对照组和阴性对照组相比,RPL31-siRNA注射组裸鼠皮下移植瘤生长缓慢,移植瘤体积明显缩小,差异具有统计学意义(P<0.05);移植瘤组织中RPL31基因的mRNA水平和蛋白水平表达下调;另外,RPL31-siRNA注射组裸鼠移植瘤中Ki-67表达下调(55.78%±4.63%、51.37%±5.05%vs11.08%±1.31%),CD31的表达下调(56.53%±6.03%、44.84%±5.24%vs9.67%±1.39%);RPL31-siRNA注射组裸鼠移植瘤细胞凋亡增加(2.92%±0.54%、3.85%±0.87%vs39.58%±4.02%).结论:RPL31-siRNA可以下调胰腺癌BxPC-3细胞裸鼠皮下移植瘤中RPL31基因的表达,抑制移植瘤的生长,并且还可以抑制移植瘤中Ki-67及CD31的表达,诱导移植瘤细胞的凋亡.以RPL31为靶点的基因治疗有潜在临床应用前景.

齐多夫定对原代大鼠肝细胞毒性作用的研究

目的:研究齐多夫定对原代大鼠肝细胞的毒性。方法:采用二步灌流法分离Wistar大鼠肝细胞,经台盼蓝拒染试验测定细胞活力,活力>85%用于实验。实验分4组:药物组、阳性对照组、阴性对照组和空白对照组。肝细胞悬液(3×105个/ml)接种于各培养板:96孔板每孔200μl,24孔板每孔1ml,6孔板每孔2.5ml,各板置37℃、5%二氧化碳培养箱培养4h,弃上清液。药物组分别加入齐多夫定10、5、3.3、2、0.4、0.08mmol/L,阳性对照组分别加入四氯化碳10、2、0.5mmol/L,阴性对照组加入含1%二甲基亚砜(DMSO)的DMEM培养液,空白对照组加入DMEM培养液。96孔板于加样后6、12、24h进行MTT试验测定细胞活性,24孔板于加样后6、12h测定肝细胞AST、ALT及LDH的释放量,6孔板加样后12h将细胞苏木素-伊红(HE)染色,观察细胞形态。结果:齐多夫定浓度为3.3mmol/L、四氯化碳浓度为2mmol/L时,于6、12、24h的吸光度(OD)值分别为(1.20±0.17)、(0.99±0.08)和(0.89±0.09)与(1.20±0.13)、(1.01±0.09)和(0.88±0.13),同时间点阴性对照组OD值分别为(1.34±0.08)、(1.11±0.10)和(1.03±0.11)。与阴性对照组比较,齐多夫定组、四氯化碳组的细胞活力均显著降低,差异均有统计学意义(均P<0.05),但10mmol/L齐多夫定对细胞活性的影响远低于10mmol/L四氯化碳。加3.3mmol/L齐多夫定后6和12h,AST释放量为(18.53±2.02)卡门单位和(26.86±2.61)卡门单位,ALT的释放量为(15.16±2.18)卡门单位和(27.48±2.27)卡门单位,LDH释放量为(1681.00±193.98)U/L和(2708.55±78.73)U/L;阴性对照组同时间点AST释放量为(15.91±1.62)卡门单位和(37.71±2.54)卡门单位,ALT释放量为(19.66±0.74)卡门单位和(23.42±1.46)卡门单位,LDH释放量为(2036.39±134.56)U/L和(2870.21±87.73)U/L;与阴性对照组比较,齐多夫定对AST、ALT及LDH的释放量均有显著影响,差异均有统计学意义(均P<0.05)。齐多夫定浓度≥3.3mmol/L时,可引起细胞膜破裂、核浓缩,四氯化碳浓度为10mmol/L时,可使细胞变小、细胞膜破裂及核碎裂。结论:齐多夫定浓度≥3.3mmol/L时,具有肝细胞毒性作用,齐多夫定的细胞毒性低于四氯化碳。