大口黑鲈amh基因全长cDNA克隆、表达及多克隆抗体制备

为研究大口黑鲈(Micropterus salmoides)抗缪勒氏管激素(amh)基因的表达及其在性腺发育中的潜在作用,研究利用RACE技术克隆得到了大口黑鲈amh基因,并制备Amh多克隆抗体,通过qRT-PCR、Western Blot分析Amh在大口黑鲈不同组织和不同发育阶段性腺中的表达模式,最后利用HE染色法和免疫组化观察不同发育阶段性腺的形态组织学变化及其与Amh表达的潜在关系。结果显示:大口黑鲈amh基因cDNA序列全长2050 bp,由24 bp5′非编码区、394 bp3′非编码区和1632 bp的开放阅读框组成,共编码543个氨基酸。amh基因mRNA在大口黑鲈11个组织中均有表达,其中雄鱼精巢中表达量最高,肌肉次之,雌鱼卵巢中表达量最高,肌肉次之。amh基因在雌雄鱼不同发育阶段的性腺中表达存在显著差异,精巢中表达量均显著高于卵巢(P<0.05)。同时,Western Blot结果显示Amh蛋白在精巢中表达丰度较高。amh基因在精巢中的表达量呈先上升后下降的趋势,且在孵化后65d鱼精巢中其表达量达到最高(P<0.05),免疫组化结果显示Amh表达于早期精巢的支持细胞;孵化后135d和215d雄鱼精巢中其表达量明显下降,HE染色显示雄鱼精巢处于精子细胞生成和精子形变期,Amh主要表达于支持细胞中,精子占据精巢的绝大部分空间,支持细胞所占面积比例减少。amh基因在孵化后45d、65d和135d雌鱼卵巢中表达量较低,孵化后215d表达量上升,并且在卵母细胞的细胞膜边缘及外周的滤泡细胞和颗粒细胞检测到了Amh阳性信号。研究结果表明:在精巢中,Amh可能参与早期精巢发育;在卵巢中,其可能参与颗粒细胞和滤泡细胞发育。综上所述,Amh在大口黑鲈性腺发育中发挥着关键的调控作用。

加州鲈驯化技术研究比较

加州鲈即大口黑鲈,分类学上属鲈形目、太阳鱼科、黑鲈属。原产美国加利福尼亚州密西西比河水系,是一种肉质鲜美、无肌间刺、生长快、易起捕、适温较广的肉食性鱼类。广东于1983年引进中国,1985年人工繁殖成功,逐渐成为名优养殖品种。

加州鲈规格苗种工厂化驯化技术研究

加州鲈规格鱼种培育指从水花开始培育至体长3厘米以上的过程。传统加州鲈苗种培育方法是指通过池塘施肥培育天然饵料(轮虫、枝角类、桡足类)、水花长至3厘米时进行冰鲜或饲料驯化的过程。因为传统加州鲈育苗方法受天气影响较大,培育成活率不稳定,在气候环境不适宜时发塘成活率低,因此开展加州鲈苗种室内驯化技术研究意义重大。

河蟹池塘套养加州鲈技术

在河蟹池塘套养加州鲈,能进一步提高蟹池养殖水体的利用潜力,有效利用池塘水体空间与水生动物资源,还可改善水体环境,提高养殖经济效益。现将相关养殖技术介绍如下:一、养殖条件1.池塘布局。养殖池塘为长方形、东西向,排灌方便,面积以5~20亩为宜。水深控制在1.5~2.0米;塘堙坚实、宽1.5~2.5米,以防漏水;淤泥厚度保持在5~10厘米,以维持池水肥度;池塘坡比为1:(2~3)。

河蟹池塘套养加州鲈技术

河蟹套养鲈鱼,起到进一步提高蟹池养殖水体利用潜力,有效利用池塘水体空间与水生动物资源,改善水体环境的自然生态作用,同时鲈鱼倍受消费者青睐,市场价格较高,更为蟹池套养补充效益提供了保证。现将相关技术介绍如下。一、养殖条件1.池塘布局池塘为长方形,东西向。面积5~20亩为宜,水深在1.5~2米,塘埂宽度在1.5~2.5米,淤泥厚度保持在5~10厘米以维持池水肥度,塘埂坚实防漏水,排灌方便,池塘坡比为1∶(2~3)。