胚乳的发育及其调控

文章对胚乳的发育及其调控进行了概述。

基因枪法导入cyclAt和GUS基因获得转基因水稻

以cyclAt基因为目的基因,HPT和GUS为选择和报告基因,应用PDS-1 000/He型基因枪协同转导,通过轰击来源于水稻成熟种子诱导产生的胚性愈伤组织,获得了转基因水稻植株.结果表明:通过X-Gluc染色分析,GUS基因在愈伤组织和再生植株叶片中的表达效率高.以转基因植株的基因组DNA为模板,用cyclAt基因的特异性引物对其进行PCR扩增,只检测到1 000 bp左右的片段,比其1 604 bp的完整序列小,因此推测cyc1At基因在转导入水稻后被剪接.此外,在协同转导过程中,cyc1At和GUS可能与受体基因组DNA随机整合,因此视GUS基因为报告基因有一定局限性;但两者同时被整合的频率远高于单一基因的整合.

半定量RT-PCR法检测Wee1基因在水稻胚乳发育过程中的表达模式

通过半定量RT-PCR研究Wee1基因在水稻胚乳中的表达模式.结果发现Wee1基因的表达伴随水稻种子胚乳的整个发育过程.在所检测的几个时期中,授粉后第4 d(4 days after pollination,4 DAP)的胚乳中Wee1基因表达量最大;以后随着发育的进行,其表达量逐渐降低,直至15 DAP的胚乳中仍有微弱表达.