长链非编码RNA YAF2-AS1通过调控微小RNA-141-3p表达抑制肝星状细胞活化实验研究

目的:探讨长链非编码RNA(lncRNA)YAF2-AS1在肝星状细胞活化中的作用及可能的分子机制。方法:采用基因表达数据库(GEO)分析YAF2-AS1在肝纤维化组织和正常肝组织中的表达。用YAF2-AS1质粒转染人肝星状细胞LX-2细胞并设为YAF2-AS1组,以转染阴性对照质粒为对照组。采用CCK-8实验检测LX-2细胞增殖。采用流式细胞术检测LX-2细胞周期分布和活性氧(ROS)含量。采用lncRMap软件和双荧光素酶活性实验验证YAF2-AS1与miR-141-3p的靶向关系。采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测miR-141-3p表达。采用Western blot检测蛋白磷酸酶及张力蛋白同源物(PTEN)/蛋白激酶B(AKT)信号通路中PTEN、p-AKT蛋白以及肝纤维化标志物[α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、Ⅰ型胶原蛋白(CollagenⅠ)、转化生长因子β受体Ⅱ(TGFβR2)]的表达。结果:与正常肝组织比较,肝纤维化组织YAF2-AS1表达水平降低(P<0.01)。与对照组比较,YAF2-AS1组LX-2细胞增殖活性被抑制(P<0.05);G_(0)/G_(1)期LX-2细胞比例升高(P<0.01),S期和G_(2)/M期LX-2细胞比例降低(均P<0.05);LX-2细胞ROS含量升高(P<0.01)。miR-141-3p是YAF2-AS1的靶基因(P<0.01)。与对照组比较,YAF2-AS1组LX-2细胞miR-141-3p表达降低(P<0.01);PTEN蛋白表达增加,p-AKT、α-SMA、CollagenⅠ、TGFβR2蛋白表达降低(均P<0.05)。结论:YAF2-AS1在肝纤维化组织中表达下调,过表达YAF2-AS1通过降低miR-141-3p表达抑制肝星状细胞的活化。