戊二醛一步固化法制备氟尿嘧啶壳聚糖微球

以壳聚糖为载体,戊二醛为交联剂,氟尿嘧啶为模型药物,采用一步固化法制备氟尿嘧啶壳聚糖微球制剂。以外观和包封率为指标优化了处方,并考察了交联剂浓度和交联时间对微球体外释放行为及溶胀度的影响。采用扫描电镜和红外光谱对微球结构进行表征。所得载药微球的载药量和包封率为33.5%、51.2%,平均粒径为(6.8±1.8)μm,30 min时突释量为33.5%。

一种根管消毒控释系统──甲硝哒唑药棒

作者在国内首先研制出一种根管消毒控释系统──甲硝哒唑药棒，进行了性能检验及临床疗效观察。结果显示：成品的甲硝哒唑含量是加入量的９９．５±１．１％，７０％溶出量需要３ｈ３０ｍｉｎ（转篮法），对组织的刺激性小于肠线，在人体根管内药物的抑菌有效量至少保持７天，临床应用根管消毒成功率为９８％。

纳米二氧化硅诱导 A549 细胞损伤及其氧化应激机制

目的 探讨纳米二氧化硅（SiO2）诱导细胞损伤的作用机制研究。方法 噻唑蓝比色（MTT）法检测20 nm和50 nm SiO2 0~1000 mg·L-1处理A549细胞24 h对细胞存活率的影响。纳米SiO2 25，50和100 mg·L-1处理细胞24 h后，检测细胞内超氧阴离子（O2-·）、羟自由基（·OH）、过氧化氢（H2O2）、一氧化氮自由基（NO·）、活性氧（ROS）、丙二醛（MDA）含量以及细胞膜ATP酶的活性变化；采用荧光显微镜观察凋亡坏死细胞形态。结果 20 nm和50 nm SiO2对A549细胞的半数致死量（LD50）分别为30±4和（120±14）mg·L-1。与正常对照组比较，纳米SiO2引起A549细胞内O2-·，·OH，H2O2和NO·含量显著增加（P〈0.05），ROS过量产生（P〈0.05），脂质过氧化物MDA含量显著升高（P〈0.05），且细胞存活率与ROS及MDA含量呈现明显的负相关性（R2=0.954和R2=0.937），ATP酶活性显著降低（P〈0.05）；Hoechst33342/PI双荧光染色法观察到明显的细胞凋亡与坏死。结论纳米SiO2可诱导细胞自由基过量生成，氧化应激反应加剧，导致脂质过氧化反应、细胞膜受损和细胞功能障碍，以及引发细胞凋亡与坏死，产生细胞毒性。

灵芝酸单体Me肠溶胶囊制备及其兔体内生物利用度测定

目的制备灵芝酸单体Me(简称GA-Me)β-环糊精(β-CD)包合物肠溶胶囊,以提高GA-Me的溶解度和避免在胃中降解,并考察其在兔体内的生物利用度。方法采用研磨法制备GA-Me-β-CD包合物,考察不同投料摩尔比对增溶效果的影响;通过优化处方和制备工艺,制得包合物肠溶胶囊;采用高效液相色谱法,测定其体外释放及兔体内生物利用度。结果当GA-Me∶β-CD摩尔比为1∶3时,包合物的溶解度为5.28μg/mL,是原药的5倍;采用等量递加法将GA-Me-β-CD包合物与适量微晶纤维素及微粉硅胶共150 mg;GA-Me静脉给药组:t1/2α为(2.88±0.36)min,AUC0-24 h为(237.08±8.25)μg.min/mL;GA-Me口服给药组:t1/2α为(4.06±1.02)min,AUC0-24 h为(240.04±8.31)μg.min/mL,F为(21.70±0.75)%;肠溶胶囊口服给药组:t1/2α为(79.28±5.04)min,AUC0-24 h为(308.98±53.60)μg.min/mL,F为(27.93±4.84)%。结论 GA-Me-β-CD包合物改善了GA-Me的溶解度,包合物肠溶胶囊口服生物利用度为(27.93±4.84)%。

氟比洛芬酯脂微球的制备及其在兔体内的药物动力学评价

以两步乳匀法制备氟比洛芬酯(FA)脂微球,采用动态光散射法、超速离心法测得FA脂微球粒径为(168.6±9.3)nm,Zeta电位为(-34.8±1.4)mV,包封率为(99.4±0.9)%;用高效液相色谱法检测兔体内FA代谢产物氟比洛芬(FP),FA脂微球静脉给药后,FP主要药物动力学参数分别如下:t1/2β为(0.83±0.13)h,AUC0→24h为(16.10±1.56)μg·h/mL,CL为(0.41±0.02)L/(h·kg)。制得的FA脂微球包封率高,稳定性好,在兔体内的FP药物动力学过程符合二室模型。

细菌外膜囊泡包覆的载药纳米粒的制备及其小鼠鼻腔免疫效果评价

目的·制备细菌外膜囊泡(outer membrane vesicle,OMV)包覆的载卵清蛋白(ovalbumin,OVA)聚乳酸-羟基乙酸共聚物[poly(lactic-co-glycolic acid)copolymer,PLGA]纳米载体并用于小鼠鼻腔免疫效果评价。方法·采用超滤离心法制备OMV,采用乳化溶剂挥发法制备包载OVA的PLGA纳米粒(nanoparticle,NP),采用机械挤出法制备OMV包覆的PLGA载药NP,并对其进行表征。载OVA的OMV-PLGA NP经BALB/c小鼠鼻腔给药,用ELISA法检测鼻腔灌洗液、空肠黏膜和粪便中特异性sIgA抗体水平。结果·OMV包覆的PLGA载药NP粒径为(234.4±22.9)nm,透射电子显微镜观察其具有核壳结构。给药14 d后,载OVA的OMV-PLGA NP给药组在鼻腔灌洗液、空肠黏膜及粪便中sIgA抗体水平最高;与OMV+OVA给药组相比,载OVA的OMV-PLGA NP给药组在鼻腔灌洗液、空肠黏膜及粪便中的OVA特异性sIgA抗体水平分别提高了1.6、2.1和1.7倍,OMV特异性sIgA抗体水平均提高了1.5倍。结论·该纳米给药系统能同时使OMV和OVA被摄取与呈递,产生较强的小鼠黏膜免疫诱导反应。

高效液相色谱法测定大鼠全血中的灵芝酸单体Me

建立大鼠全血中灵芝酸单体Me的高效液相色谱测定方法。采用色谱柱Diamonsil^(?)C_(18)柱(250mm×4.6μm,5μm),流动相为甲醇-水(体积比为94:6,用醋酸调pH至3.6);流速为1mL/min;检测波长为245nm;内标为苯丙酸诺龙。灵芝酸单体Me血中浓度在0.05～40μg/mL范围内线性良好(r>0.99),定量限为50ng/mL,日内和日间测定的精密度(以相对标准偏差表示)均低于8.6%。该方法简便、灵敏、准确,适用于大鼠体内灵芝酸的药物动力学研究。

难溶性药物BMCP25二甲基-β-环糊精包合物的表征及在大鼠体内的药动学

采用研磨法制备难溶性药物BMCP25(1)-二甲基--环糊精(DM--CD)包合物。X射线衍射及扫描电镜结果提示1经包合后,由针状结晶转变为无定形,形成了新的物相。包合后,1溶解度从(0.36±0.08)g/ml提高至(123.82±9.81)g/ml。建立了大鼠血浆中1的HPLC测定法,考察大鼠静脉注射1混悬液(2 mg/kg)及灌胃给予1混悬液或1-DM--CD溶液(10 mg/kg)的药动学情况。结果表明,1混悬液灌胃给药组的大鼠血浆中药物浓度低于最低检测限,而1-DM--CD包合物的口服生物利用度为(16.84±5.88)%。可见1-DM--CD包合物可显著改善口服生物利用度。

环氧虫啶-二甲基-β-环糊精包合物的制备及表征

[目的]制备难溶性药物环氧虫啶的二甲基-β-环糊精(DM-β-CD)包合物,并对其表征。[方法]采用溶液搅拌法制备环氧虫啶-DM-β-CD包合物,运用红外光谱法、X-射线衍射法和扫描电镜法对其进行表征,相溶解度法研究环氧虫啶和DM-β-CD的包合特性。[结果]DM-β-CD与环氧虫啶以1∶1的比例形成环氧虫啶-DM-β-CD包合物,其溶解度为(14.3±0.2)g/L。在水中放置24 h时,环氧虫啶及其包合物分别水解了62.1%和3.6%。[结论]DM-β-CD与环氧虫啶形成包合物,提高了环氧虫啶的水中溶解度和稳定性。

阿霉素诱导HK-2细胞损伤机制的研究

目的探讨阿霉素诱导人肾近端小管上皮细胞（HK-2 cells）损伤作用机制。方法用刃天青试验法检测阿霉素0-100μmol/L暴露HK-2细胞24 h对细胞存活率的影响,并计算半数致死浓度（LC50）;检测细胞培养上清中乳酸脱氢酶（LDH）含量以及细胞内Caspase-3/7蛋白活性的变化;用荧光显微镜观察细胞内磷脂质蓄积情况。结果阿霉素暴露HK-2细胞24 h,可明显抑制HK-2细胞存活,且具有浓度依赖性（LC50=2.01±0.16μmol/L）;阿霉素可以引起HK-2细胞培养上清中LDH含量显著升高（P〈0.01）,细胞内Caspase-3/7蛋白活性显著升高（P〈0.01）,且细胞存活率与胞外LDH含量及胞内Caspase-3/7蛋白活性均呈现明显的负相关性（r^2=0.986和r^2=0.991）,LDH含量与Caspase-3/7蛋白活性呈现明显正相关性（r^2=0.999）;荧光标记染色法观察到明显的细胞内磷脂质蓄积。结论阿霉素可诱导磷脂质在HK-2细胞内大量蓄积,导致细胞膜受损和细胞功能障碍,以及引发细胞凋亡,产生细胞毒性。

灵芝酸单体T片剂的制备及其兔体内药动学研究

目的研制灵芝酸单体T(GA-T)片剂,并评价其在兔体内的药动学特性。方法 采用单因素法考察药用辅料的种类与用量,优化处方和制备工艺,经粉末直接压片制得GA-T片剂。高效液相色谱法测定GA-T在兔体内的血药浓度,采用药动学软件kinetica 5.0计算药动学参数,研究GA-T片剂在兔体内药动学特性。结果 GA-T片剂优化处方中,选用微晶纤维素与喷雾干燥乳糖1∶1为填充剂,1%微粉硅胶和0.5%硬脂酸镁分别作为助流剂与润滑剂。制得片剂的外观、硬度、崩解时间和溶出度等各项评价指标均符合《中国药典》2010年版的要求。兔口服GA-T片剂的绝对生物利用度为33.03%。结论粉末直接压片法工艺简单可靠,GA-T片剂兔体内生物利用度良好。本实验为GA-T的临床前研究提供了实验数据。

氟比洛芬酯脂微球注射液的研制

以两步乳匀法制备氟比洛芬酯(1)脂微球注射液。采用单因素法结合正交试验优化得到的制备工艺为:乳化温度65℃,20 000 r/min高速剪切8 min,1 000 bar高压均质6次,再调节pH值至8.5,灌装熔封于5 ml安瓿,115℃高压灭菌30 min。优化制品灭菌后的脂微球粒径约200 nm,ζ电位为-36 mV,包封率为99.3%,pH值约7.0。