激发学习兴趣,提高“药理学”教学效果

面对社会上的各种诱惑,大学生走进教室的时间少了。只有激发学生学习"药理学"的兴趣,才能把他们吸引回教室,提高"药理学"的教学效果。如何激发和培养学生对"药理学"的学习兴趣呢?笔者认为可从提升教师个人魅力、创造宽松和谐的课堂氛围、使教学内容形象化、简单化以及适当的测试等五个方面入手。

从多环节提高药理学教学效果

药理学是一门基础与临床、基础与药学、基础与实践相结合的学科,在医药学学习过程中起着承上启下的专业基础课作用。通过分析药理学课程特点,紧扣教学多个环节,充分挖掘教学潜能,调动学生学习的主观能动性,以提高教学质量。

磷酸二酯酶在慢性疼痛与阿尔茨海默病共病中的作用研究进展

慢性疼痛与阿尔茨海默病(AD)是困扰人类的两大疾病。流行病学调查显示,慢性疼痛患者常伴有情感和认知功能异常,而AD患者也常伴有慢性疼痛,这提示慢性疼痛与AD可能存在相似或共同的病理生理机制,但其详细机制尚不明确。磷酸二酯酶(PDE)具有特异性水解细胞内第二信使环磷酸腺苷(cAMP)和(或)环磷酸鸟苷(cGMP)的功能。最新研究报道,PDE家族中PDE2,4,5或7亚型可通过激活cAMP/蛋白激酶A和(或)cGMP/蛋白激酶G,促进其下游信号通路磷酸腺苷反应元件结合蛋白的磷酸化和脑源性神经营养因子的表达,从而不同程度地改善AD小鼠的认知功能障碍,缓解慢性疼痛小鼠的痛觉异常。本文综述PDE在慢性疼痛和AD共病中的作用及相关机制。

提高人肺腺癌裸鼠皮下移植瘤成瘤率的方法学研究

目的:提高人肺腺癌裸鼠皮下移植瘤的成瘤率。方法:人肺腺癌SPC-A-1、GLC-82培养细胞或相应的瘤组织匀浆接种于裸鼠皮下之前,先用富含生长因子的小鼠肉瘤S180腹水上清液按比例稀释,然后在裸鼠背部或腋窝皮下接种。观察人肿瘤细胞或肿瘤组织在加入小鼠肉瘤S180腹水上清液后,对移植瘤生长速度及成瘤率的影响。结果:加入小鼠肉瘤S180腹水上清液后,人肺腺癌SPC-A-1和GLC-82成瘤率明显提高,而且移植后的人肿瘤生长速度较未加小鼠肉瘤S180腹水上清液的人肺腺癌细胞明显加快。结论:小鼠肉瘤S180腹水上清液能明显提高人肺腺癌SPC-A-1和GLC-82裸鼠皮下移植瘤的成瘤率,促进肿瘤生长。

人工合成胸腺素α1在猴体内静脉注射的药动学研究

目的:研究人工合成胸腺素α1(sTα1)在猴体内i.v.的血药浓度-时间曲线、药动学参数特点。方法:用竞争性ELISA法测定sTα1在猴体内i.v.后血清中的药物浓度,用DAS药动学统计软件进行血药浓度-时间曲线拟合及药动学参数计算。结果:猴i.v.sTα11.2mg/kg的药动学特征符合二室开放模型,呈一级动力学消除。结论:猴i.v.sTα1的药动学行为符合二室一级消除。

酵母杀手毒素的作用机制及应用研究进展

杀手毒素的作用机制与抑制酵母细胞壁 β 葡聚糖合成有关。甘露糖蛋白可能是HM 1的受体之一 ,其抗性的产生是N 糖基化减少所致。HM 1是 88个氨基酸组成的亲水蛋白质 ,C 末端 82和 86位精氨酸对其杀手活性至关重要。

浅谈研究生毕业与论文发表

就目前网络讨论热点"研究生毕业与论文发表挂钩现象"发表一些个人意见,不能简单地以"对"或"不对"而作出裁决,而应考虑目前国内教育的具体现状。

重组人干扰素α2a在小鼠和大鼠体内i.v.和i.m.的药动学研究

目的:研究rh-干扰素α2a(rh-IFNα2a)在小鼠和大鼠体内i.v.和i.m.的血药浓度-时间曲线、药动学参数和分布、排泄特点。方法:用双抗体夹心ELISA法测rh-IFNα2a在小鼠和大鼠体内i.v.和i.m.后血清、胆汁、尿液及组织中的药物浓度,用DAS药动学统计软件进行血药浓度-时间曲线拟合及药动学参数计算,并结合免疫组织化学技术研究rh-IFNα2a的组织分布特点。结果:Rh-IFNα2a i.v.和i.m的药动学行为分别符合二室和一室开放模型,呈一级动力学消除;rh-IFNα2a主要分布在肾、肺组织中;rh-IFNα2a 36 h尿累计排泄量为0.121%,胆汁累计排泄量为0.247%。结论:I.v.i、.m.rh-IFNα2a的药动学行为分别符合二室一级消除、一室一级消除。

5-羟基-1-氢-吲唑对SH-SY5Y细胞的保护作用及其机制研究

目的研究5-羟基-1-氢-吲唑对1-甲基-4-苯基-吡啶离子(MPP^+)诱导凋亡的SH-SY5Y神经细胞的保护作用及其可能的作用机制。方法以MPP^+诱导SH-SY5Y细胞凋亡建立体外帕金森病细胞模型,以MTT法筛选药物有效保护浓度;以免疫化学染色以及Hoechst 33258核染研究药物的神经保护作用以及抗凋亡作用;以Western blot法检测与神经元凋亡密切相关的磷酸化tau蛋白及其上游激酶磷酸化糖原合成激酶(P-GSK-3β)和周期依赖性蛋白激酶5(cyclin dependent kinase,CDK5)的表达。结果 MPP+可引起GSK-3β的活化以及CDK5活性升高,诱导tau的异常磷酸化和神经细胞凋亡;而5-羟基-1-氢-吲唑可下调GSK-3β与CDK5的活性,降低磷酸化tau的水平和抑制MPP+导致的SH-SY5Y细胞的凋亡。结论 5-羟基-1-氢-吲唑可抑制MPP+引起的SH-SY5Y神经细胞凋亡,作用机制可能是通过同时抑制GSK-3β和CDK5两条信号传导通路,而降低tau蛋白的磷酸化水平,进一步发挥神经元保护作用。

6-羟基-1H-吲唑抑制Tau磷酸化对MPP^+诱导凋亡的SH-SY5Y细胞保护作用的研究

目的研究6-羟基-1H-吲唑通过抑制Tau磷酸化对MPP+诱导凋亡的SH-SY5Y细胞的保护作用。方法体外培养人神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y,以MPP+诱导SH-SY5Y细胞凋亡作为帕金森病的细胞模型。MTT分析法检测提前2 h加入6-羟基-1H-吲唑对细胞的保护作用;Hoechst 33258荧光染色法检测神经元凋亡情况;免疫细胞化学方法检测多巴胺能神经元内Tau的磷酸化水平。结果 200μmol·L-1MPP+可以使SH-SY5Y细胞存活率下降至(47.80±0.84)%(P<0.01),并且升高Tau磷酸化水平,出现典型的凋亡。而6-羟基-1H-吲唑抑制MPP+对SH-SY5Y细胞的毒性,并通过抑制Tau蛋白过度磷酸化而减少神经元凋亡,使TH-阳性细胞数目增加。结论 6-羟基-1H-吲唑可以通过抑制Tau磷酸化而对MPP+诱导凋亡的SH-SY5Y细胞发挥保护作用,提示Tau蛋白可能可以作为药物治疗帕金森等神经退行性疾病的新靶点。

造模持续时间对大鼠高营养性肥胖模型制备的影响

目的研究造模持续时间对大鼠高营养饮食诱导型肥胖(DIO)及其相关指标形成的影响。方法在3批实验中,断乳♂SD大鼠各290只,用相同配方的高营养饲料分别喂养7、9和10wk以建立DIO模型,然后分别给西布曲明8、4和4mg·kg-1共18、14和14d。实验指标包括体重、Lee′s指数、肝脏和腹腔脂肪湿重、血糖和血脂水平以及脂肪肝的形成。结果造模7wk的DIO大鼠体重、Lee′s指数、肝脏和脂肪湿重高于正常组;造模9wk的除以上指标有改变外,血TG水平也升高;造模10wk后,又同时出现血GLU水平的升高,且有明显的脂肪肝形成。结论造模的持续时间对DIO大鼠肥胖相关指标的形成有影响,应根据实际研究目的确定模型建立所需时间的长短。

功能性食品评价中影响血糖测定稳定性的若干因素

目的:探讨影响血糖测定稳定性的因素。方法:采用葡萄糖氧化酶法、血糖仪、全自动生化仪,观察禁食时间、室温、采血方法及造模方法对血糖测定的影响。结果:禁食时间以12～16h为宜,12h最佳;血清在4℃下保存8h以内对测定结果无显著性影响;应根据实际需要选择适宜的采血方法和造模方法;三种测定方法间无显著性差异。结论:血糖测定应严格控制禁食时间和室温,根据实际情况选用适宜的采血、造模及测定方法。

慢病毒介导bcr/abl基因RNAi对白血病K562细胞生物学特性的影响

目的:研究慢病毒介导RNAi致bcr/abl基因长期沉默对K562白血病细胞各种生物学特性的影响。方法:构建含bcr/ablRNAi序列的pNL-B/A-EGFP慢病毒重组质粒载体并包装病毒,感染K562细胞,挑取稳定转化的克隆(B/A-K562)。Real-time PCR及Western blotting验证干扰效应;锥虫蓝染色、集落形成实验检测细胞增殖能力变化;联苯胺染色观察细胞分化;ELISA法检测酪氨酸激酶活性;AO-EB染色观察细胞凋亡;比色法检测Caspase-3、Caspase-9活性;以上检测均以K562细胞和转染空质粒EGFP-K562作对照。结果:成功构建bcr/abl基因RNAi稳定转染的B/A-K562细胞,Real-time PCR及Westernblotting证实B/A-K562细胞中bcr/ablmRNA及P210bcr/abl蛋白含量明显下调。bcr/abl基因稳定下调后,K562细胞倍增时间明显延长(37.1vs20.4、23.3h)、集落形成能力减弱(P<0.01),K562细胞向红系分化,酪氨酸激酶活性下降(P<0.01),自发凋亡率显著提高(P<0.01),细胞中Caspase-3(P<0.05)及Caspase-9(P<0.01)活性明显提高。结论:慢病毒介导的RNAi能实现bcr/abl基因长期沉默,从而抑制K562细胞恶性增殖,诱导其分化及凋亡。

低分子肝素超氧化物歧化酶结合物抗氧化损伤及对神经细胞的保护作用

目的研究低分子肝素超氧化物歧化酶结合物(LWMHSOD)对低糖低氧损伤的神经细胞的保护作用。方法采用体外培养的大鼠大脑皮层神经元,造成低糖低氧损伤模型,观察LMWHSOD抗氧化损伤及对神经细胞的保护作用。结果LMWHSOD能够减少低糖低氧造成的细胞死亡,降低损伤后细胞外液LDH、MDA、NO的含量,改善细胞膜的流动性。结论LMWHSOD对神经细胞具有保护作用。

重组人碱性成纤维细胞生长因子对大鼠十二指肠溃疡的治疗作用及临床前安全性评价

目的:研究重组人碱性成纤维细胞生长因子(rh-bFGF)对大鼠十二指肠溃疡(DU)的治疗作用并评价其安全性。方法:用半胱胺制备大鼠DU模型;用小鼠及比格犬给药观察rh-bFGF的急性毒性;用大鼠及比格犬给药90d观察rh-bFGF的长期毒性。结果:rh-bFGF对半胱胺诱导的大鼠慢性DU有良好的治疗作用,剂量为5×103、1×104AU/kg时,DU面积较对照组显著减小,溃疡表面的柱状腺上皮再生速度明显增快。rh-bFGF组溃疡表面全部或几乎全部为再生腺上皮所覆盖者近60%,而法莫替丁组仅13%。rh-bFGF一次给药(i.g.和i.v.)对小鼠和犬的最大耐受量分别大于2×106AU/kg和3.5×105AU/kg,分别相当于人临床拟用量(24000AU)的4167倍和729倍。rh-bFGF连续p.o.给药90d,不影响大鼠和比格犬的外观、一般行为活动及生长发育;血液学和血液生化学指标与正常对照组比较,均未见明显差异;对骨髓造血功能也无明显影响;病理检查未见脏器组织形态学改变。结论:rh-bFGF能明显促进DU表面腺上皮再生与溃疡愈合,未见明显急性和长期毒性反应。

N_3-邻甲苯甲酰基-氟脲嘧啶通过凋亡作用抑制人胃癌细胞生长

目的N3-邻甲苯甲酰基-氟脲嘧啶(N3-O-toluyl-flu-orouracil,TFU)是N1-乙酰基-N3-邻甲苯甲酰基-氟脲嘧啶的降解产物和5-氟脲嘧啶(5-FU)前体物,本研究观察TFU体内外对人胃癌细胞生长抑制活性及作用特点。方法体外实验,以MTT法测定TFU对人胃癌细胞SGC-7901和MKN-45生长抑制作用,并与肝微粒体酶存在条件下的结果比较。在肝微粒体酶存在时,将人胃癌细胞与低剂量TFU孵育10h,以吖啶橙/溴乙锭染色(AO/EB)观察肿瘤细胞形态;分别以琼脂糖凝胶电泳法和流式细胞仪分析肿瘤细胞DNA断裂特点;Western blot法检测肿瘤细胞Bcl-2和Bax蛋白表达。体内实验,以裸鼠移植人胃癌细胞并灌胃给药观察TFU对肿瘤细胞生长抑制作用。取肿瘤组织切片,以TUNEL(ter-minal deoxynucleoid transferase nick-end labeling)染色法,观察肿瘤细胞核染色比例,计算凋亡率。结果TFU对胃癌细胞生长抑制作用较弱,而在肝微粒体酶存在时能够明显提高TFU对胃癌细胞生长的抑制率。TFU对裸鼠移植人胃癌细胞生长抑制作用较强,对动物体重抑制作用弱。进一步实验,在肝微粒体酶存在下,低剂量TFU能够诱导肿瘤细胞凋亡。吖啶橙/溴乙锭(AO/EB)染色后,胃癌细胞呈现剂量依赖性凋亡形态改变。细胞染色体DNA断裂呈现Ladder现象和亚二倍体(sub-G1)凋亡峰。TFU上调胃癌细胞Bax蛋白表达,降低Bcl-2蛋白水平。TUNEL法检测裸鼠移植人胃癌细胞凋亡,TFU能够提高胃癌细胞核TUNEL染色水平。结论TFU对人胃癌细胞生长具有抑制作用,该作用可能与肝微粒体酶缓慢水解释放出低水平5-FU有关,低水平5-FU可能通过调节Bcl-2和Bax表达活性诱导胃癌细胞凋亡。

单甘酯对实验性血栓形成的影响

目的 研究单甘酯 (glycolmannatesulfate ,GMS)对血栓形成的影响。方法 结扎大鼠下腔静脉观察对静脉血栓的形成 ,Chandler方法观察体外血栓形成 ,全自动凝血仪测定凝血指标和纤维蛋白原及ATⅢ、Ⅱ、Ⅱa活性。结果 GMS 2 0、40mg·kg-1对大鼠静脉血栓的形成有抑制作用 (P<0 0 1) ;2 5mg·kg-1即能明显抑制家兔体外血栓的形成 ,随剂量的增加而增强。GMS可使家兔TT、CT、APTT、RT及PT明显延长 ,降低大鼠血浆纤维蛋白原含量及降低因子Ⅱ及因子Ⅱa活性 ,升高ATⅢ活性。结论 GMS具有明显的抗血栓形成作用 。

色霉素对多巴胺能神经元的保护作用

目的研究色霉素对MPP+诱导凋亡的多巴胺能神经元的保护作用。方法体外培养的胎鼠腹侧中脑神经元,以MPP+引起多巴胺能神经元凋亡作为帕金森病的细胞模型,Hoechst 33258荧光核染色法检测神经元的凋亡情况,免疫细胞化学方法检测多巴胺能神经元内磷酸化Tau水平。结果10μmol·L-1 MPP+可以升高Tau磷酸化水平,诱导神经元发生典型的凋亡。而色霉素通过抑制Tau磷酸化,减少神经元凋亡,使TH-阳性细胞数目增加。结论色霉素可以通过抑制Tau磷酸化而对MPP+诱导凋亡的多巴胺能神经元发挥保护作用,色霉素可能用于临床防治帕金森病等神经退行性疾病。