基于有效性完整表达的白芍质量标志物研究

目的:基于中药质量标志物(Q-marker)有效性原则,采用“性-效-物”三元论研究思路,从药性(味)和药效角度揭示白芍Q-marker。方法:采用液相色谱-质谱联用法(LC-MS),解析白芍、炒白芍、赤芍化学物质组;在此基础上,通过分子对接方法,选择白芍中各结构类型代表化合物为配体小分子,通过与苦、酸味受体进行分子对接实验,预测白芍潜在药性(味)物质基础;采用网络药理学方法,通过SwissTargetPrediction、中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)等数据库预测化合物潜在作用靶点,并进行生物信息学分析,构建化合物-靶点-信号通路-药理作用-功效网络,进一步以体外抗炎药效筛选模型,验证白芍及关键化合物的抗炎药效作用,明晰基于药效的白芍物质基础,进而基于有效性完整表达结果确定白芍Q-marker。结果:共解析出白芍中42个成分、炒白芍中41个成分、赤芍中34个成分。其中单萜及其苷类化合物可能为白芍最主要的苦味物质基础,带有没食子酰基的鞣质类化合物可能为白芍最主要的酸味物质基础。网络药理学结果发现,白芍中17个成分通过作用于191个潜在靶点干预了165条相关通路,可发挥促进骨髓造血功能、抑制子宫收缩、抗炎、镇痛、保肝、抗高血压和抑制汗腺分泌等作用;验证实验表明,白芍中8个主要成分可通过下调白细胞介素-6、肿瘤坏死因子-α和一氧化氮等炎症因子的表达发挥抗炎作用。结论:初步确定芍药苷、芍药内酯苷、氧化芍药苷、没食子酰芍药苷、苯甲酰芍药苷、儿茶素、五没食子酰葡萄糖及没食子酸为基于有效性完整表达的白芍Q-marker。

基于HPLC-Q-TOF MS/MS和网络药理学的参蓉蛹草片质量标志物研究

目的:应用高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱法(HPLC-Q-TOF-MS/MS)建立参蓉蛹草片化学成分的检测方法,并结合网络药理学和分子对接方法分析其抗疲劳的网络调控机制、预测参蓉蛹草片的质量标志物。方法:运用HPLC-Q-TOF-MS/MS对参蓉蛹草片物质基础进行分析鉴定。通过PubChem获取所选化合物的结构,利用TCMSP数据库及SwissTargetPrediction获取作用靶点;通过GeneCards、TTD、OMIM数据库筛选与疲劳相关的疾病靶点,获得药物和疲劳的交集靶点;运用UniProt数据库校准靶点名称;利用STRING数据库构建交集基因蛋白质-蛋白质相互作用(PPI)网络,并运用Cytoscape 3.8. 0软件对PPI网络进行拓扑分析;最后借助Metascape在线分析核心交集基因,进行基因本体(GO)功能富集分析、京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集分析,并对分析结果进行可视化。结果:通过HPLC-Q-TOF MS/MS共得到参蓉蛹草片124个化学成分,利用网络药理学对筛选出的23个化学成分进行生物信息学分析,发现其可作用于195个靶点干预33条信号通路。分子对接结果显示,活性化合物可进入受体靶点活性空腔,与其形成的对接构象合理。结论:参蓉蛹草片可通过多成分、多靶点、多途径发挥抗疲劳作用,基于HPLC-Q-TOF MS/MS,结合网络药理学和分子对接方法初步将人参皂苷类、苯乙醇苷类预测为参蓉蛹草片的质量标志物。

醋乳香现代研究进展及质量标志物的预测

醋乳香是乳香Olibanum经醋炙法加工后的炮制品,炮制后可除去部分挥发油成分,消除其对胃黏膜的刺激性,同时能引药入经增强活血止痛、收敛生肌等功效。通过总结文献报道,从醋炙后化学成分与功效变化,刺激性研究,成分特有性、有效性、可测性,配伍环境及体内过程相关性等方面对醋乳香的质量标志物(Q-marker)进行预测分析,初步确定3-乙酰基-9,11-去氢-β-乳香酸、3-乙酰基-α-乳香酸、3-乙酰基-β-乳香酸、11-羰基-β-乳香酸、11-羰基-β-乙酰乳香酸5个三萜类成分和挥发油类成分乙酸辛酯为其可能的Q-marker,以期为醋乳香的全程质量评价、临床应用研究提供理论依据。

虎杖研究进展及质量标志物预测

虎杖是我国常用的大宗中药材,资源丰富且分布较广,具有广阔的开发利用前景。虎杖中化学成分类型丰富,包括二苯乙烯、醌、黄酮等类化合物,虎杖的药理作用主要体现在抗炎、抗氧化、抗病毒、抗菌、抗癌、肝保护、心血管保护、免疫调节等方面。在对其化学成分、药理作用综述的基础上,根据中药质量标志物(Q-marker)理论,从生源途径、化学成分有效性、化学成分可测性及不同配伍环境几方面对虎杖Q-marker进行预测分析,为明确虎杖的Q-marker和制定科学的质量标准提供参考。

基于“性-效-物”的小儿消积止咳口服液质量标志物研究

目的:基于“性-效-物”理论研究原则,确定小儿消积止咳口服液(XEXJ)中的质量标志物(Qmarker)。方法:通过分子对接实验确定化合物的药性(味),运用Schrodinger 2020 Maestro软件进行酸、甘、苦、辛药味受体与相应化合物的分子对接。通过网络药理学和体外受体实验确定化合物的药效,利用数据库获取并整合得到化合物和疾病共有靶点,将其输入STRING网络分析平台筛选出核心靶点并进行生物信息学分析,运用Cytoscape软件构建网络图;通过G蛋白偶联受体和酶活法检测代表性成分对胆碱能受体毒蕈碱3 (CHRM3)、肾上腺素受体β2 (ADRB2)、ADRA1A、环氧合酶-2 (COX-2)受体的作用。结果:分子对接结果表明,有机酸类和香豆素类可能是XEXJ的酸味物质基础;糖类和简单苯丙素类可能是其甘味物质基础;木脂素、苯乙醇苷、黄酮、三萜类等成分可能是其苦味物质基础;生物碱类及部分黄酮类可能是其辛味物质基础。网络药理学分析发现,XEXJ可能通过作用于神经活性配体-受体相互作用、5-羟色胺能突触、环鸟苷酸-蛋白激酶G (cGMP-PKG)信号通路、钙信号通路等90条通路发挥促消化、止咳和解热抗炎功效。功能受体实验结果表明,XEXJ清热肃肺、消积止咳的作用机制可能与激活CHRM3、ADRB2受体,抑制ADRA1A、COX-2受体有关。综上,初步确定其Q-marker为橙皮苷、柚皮苷、新橙皮苷、去甲基川陈皮素、槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖基-7-O-β-D-龙胆双糖苷、槲皮苷、异槲皮苷、金丝桃苷、山柰酚、连翘酯苷A、连翘酯苷E、连翘脂素、(+)-松脂素-β-D-吡喃葡萄糖苷、桔梗皂苷D、3,29-二苯甲酰栝楼仁三醇、辛弗林、槟榔碱、枸橼酸、绿原酸。结论:基于“性-效-物”理论,采用分子对接、网络药理学和受体实验初步确定了XEXJ发挥药效作用的Q-marker,为其质量控制和作用机制研究提供参考依据。

重楼复方抗肿瘤研究进展

中医常以扶正解毒法治疗癌症。清热解毒类中药重楼常与其他中药配伍进行抗肿瘤治疗。研究表明重楼复方可抑制肿瘤生长、侵袭及转移、逆转多药耐药、提高免疫水平、调节肠道菌群及癌细胞代谢发挥抗肿瘤作用。重楼复方在临床上已被应用于多种癌症的治疗。重楼复方可单独应用改善患者症状,也可通过联合化疗、放疗、常规治疗等提高治疗效果。

中药致肝损伤的研究进展

中药因其确切的疗效和较好的安全性,数千年来一直守护着华夏人民的健康。但部分中药受其自身特性、炮制工艺、配伍组方等影响,可能对肝脏造成较大负担,甚至具有毒性,从而导致肝损伤。该文对引发肝损伤的常见中药及其发生机制做了综述,并从炮制、配伍、剂型改造和给药方式等方面探讨了针对中药肝毒性的减毒措施,为中药的用药安全提供参考。

CD19 CAR-T细胞治疗的安全性:基于FAERS数据库的不良反应事件信号挖掘与分析

目的分析目前已上市的CD19嵌合抗原受体T(chimeric antigen receptor T,CAR-T)细胞药物在治疗中出现的不良反应事件(adverse effect,AE),为临床用药提供依据。方法使用美国食品药品监督管理局不良事件报告系统(FDA adverse event reporting system,FAERS)数据库,经过数据检索、筛选、去重、整理和分析等处理后,获取4种已上市的CD19 CAR-T药物阿基仑赛(Axicabtagene ciloleucel,Axi-cel)、替沙仑赛(Tisagenleucel,Tisa-cel)、布瑞基奥仑赛(Brexucabtagene autoleucel,Brexu-cel)和瑞基奥仑赛(Lisocabtagene maraleucel,Liso-cel)2017年第1季度至2023年第4季度的基线资料和AE结果。采用报告比值比(reporting odds ratio,ROR)法和比例报告比值比(proportional ADR reporting ratio,PRR)法分析和比较其AE。结果本研究利用FAERS数据库,共得到4种已上市的CD19 CAR-T药物的AE报告5335份。4种CD19 CAR-T药物AE的男性占比均高于女性;年龄分布均在18岁以上;体重则多数集中在50~100 kg。CD19 CAR-T药物AE共累及到23类系统器官分类(system organ classification,SOC),主要集中在神经系统疾病和免疫系统疾病等,其中以细胞因子释放综合征(cytokine release syndrome,CRS)、免疫效应细胞相关性神经毒性综合征(immune effector cell-associated neurotoxicity syndrome,ICANS)最为常见。此外,还发现一些说明书中未列出的AE,如骨髓异常增生综合征(myelodysplastic syndromes,MDS)、急性肾损伤(acute kidney injury,AKI)和脓毒症等。结论在CD 19 CAR-T药物的临床实践中,除需关注药物说明书中提及的AE外,还应注意可能发生的未提及的AE,如MDS、AKI和脓毒症等。

基于体外透皮成分分析的靶向网络药理学结合分子对接的儿泻康贴膜药效物质基础及作用机制研究

目的 通过高效液相色谱-四极杆-飞行时间质谱(HPLC-Q-TOF-MS/MS)分析儿泻康贴膜体外透皮接收液的化学成分,结合网络药理学和分子对接技术初步预测其治疗小儿腹泻、腹痛的药效物质基础及作用机制。方法 采用HPLC-QTOF-MS/MS于正、负离子模式下扫描,确认儿泻康贴膜透皮化学成分。选取19个主要活性成分为研究对象,利用Swiss Target prediction数据库收集化合物潜在作用靶点;通过GeneCards、OMIM、Drugbank数据库获取小儿腹泻、腹痛相关疾病靶点;借助String 12.0网络分析平台,获得活性成分与疾病交集靶点的蛋白质-蛋白质相互作用(PPI)网络,从而筛选出核心靶点;利用Omicsbean在线分析平台对交集靶点进行基因本体(GO)功能分析和京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集分析,进一步通过Cytoscape3.9.1软件构建网络图;运用Schr?dinger2020 Maestro12.4软件将10个主要活性成分与15个核心靶点进行分子对接,验证其结合能力。结果 儿泻康贴膜体外透皮接收液共鉴定出90个成分,包括生物碱类、黄酮类、有机酸类、苯丙素类、三萜类、苦味素及其他类;选取的19个活性成分治疗小儿腹泻、腹痛的潜在作用靶点共260个,经PPI网络分析筛选出肿瘤蛋白p53(TP53)、信号传导及转录激活蛋白3(STAT3)、表皮生长因子受体(EGFR)、丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶1(AKT1)等15个核心靶点;KEGG通路富集共得到166条通路,筛选出与疾病密切相关的通路共90条,包括磷脂酰肌醇-3-激酶-蛋白激酶B信号通路、丝裂原活化蛋白激酶信号通路、神经营养素信号通路、白细胞介素17信号通路等重要信号通路。分子对接结果显示,儿泻康贴膜中10个主要活性成分与15个核心靶点蛋白间结合能力较强,能形成稳定的复合物。结论 通过HPLC-Q-TOF-MS/MS获得儿泻康贴膜体外透皮成分,结合网络药理学和分子对接技术初步确定了儿泻康贴膜发挥多成分、多靶点、多途径治疗小儿腹泻、腹痛的潜在药效物质基础及作用机制。

靶向淋巴细胞激活基因3(LAG-3)纳米抗体的筛选与活性分析

目的建立淋巴细胞激活基因3(LAG-3)免疫噬菌体纳米抗体文库,获得高特异性和亲和力的抗LAG-3纳米抗体,并鉴定其功能活性。方法采用人LAG-3蛋白免疫羊驼,获取外周血cDNA;通过巢式PCR获得纳米抗体基因,构建至pComb3XSS质粒,电转至大肠杆菌XL1-Blue中构建纳米抗体噬菌体免疫文库,并对文库进行质量分析。通过噬菌体展示技术筛选抗LAG-3特异性纳米抗体,通过第二代基因测序技术获得纳米抗体的基因序列。将目的序列构建到大肠杆菌BL21(DE3)周质表达载体pET-22b(+)中进行抗体表达,Prism A柱进行纯化,通过高效液相色谱-质谱分析(HPLC-MS)、ELISA、Western blot法和表面等离子共振技术(SPR)进行抗体性质和功能分析。结果构建的纳米抗体噬菌体免疫文库的库容为7.20×10^(8)菌落形成单位(CFU),序列分析文库多样性良好,经过4轮淘筛后获得3条具有不同氨基酸序列的抗LAG-3纳米抗体,分别为重链抗体重链可变区结构域-L1-3(VHH-L1-3)、VHH-L3-2和VHH-L13-2,纳米抗体表达纯化后纯度在95%以上,三种抗体均可以与重组人LAG-3蛋白进行特异性结合;其中VHH-L13-2抗体的亲和力指数KD值为3.971×10^(-9)mol/L,且对于LAG-3和纤维蛋白原样蛋白1(FGL-1)的结合具有抑制作用,半数抑制浓度(IC_(50))值为15.58 nmol/L。结论成功构建了LAG-3纳米抗体噬菌体免疫文库,筛选获得了特异性好、亲和力高的LAG-3纳米抗体,且对于LAG-3与其配体的结合具有一定的抑制作用。

基于均匀设计实验的栀子-三七主要有效成分抗Aβ_(1-42)诱导SH-SY5Y细胞损伤的配伍研究

目的:采用均匀设计实验方法,探索栀子和三七中5个主要有效成分的有效配伍比例,为临床治疗阿尔茨海默病提供初步实验依据。方法:建立β-淀粉样蛋白(Aβ_(1-42))诱导SH-SY5Y细胞损伤模型,以细胞存活率为指标,研究主要有效成分抗Aβ_(1-42)诱导SH-SY5Y神经细胞损伤的有效浓度,以损伤恢复率为指标选出5种药效较好的成分。在此基础上筛选出的5种药效良好的成分分别为自变量X_(1),X_(2),X_(3),X_(4),X_(5),损伤恢复率(%)为因变量Y,选用U_(21)(21^(5))均匀设计表和线性、二次多项式2种数学模型,以逐步回归方法筛选变量,确定5种有效成分的有效配伍比例。结果:栀子-三七主要有效成分除京尼平外均能提高Aβ_(1-42)诱导SH-SY5Y细胞损伤的细胞存活率,并呈浓度依赖性。筛选得到5种药效良好的成分为三七皂苷R1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Rg1、栀子苷、京尼平龙胆双糖苷。均匀设计实验结果经回归分析得到Y=12.77501992-0.4938270427X_(2)+0.07063466558X_(1)X_(2)-0.022126968533X_(1)X_(5)+0.05300069195X_(3)X_(4)(r=0.8574,F=11.1059,P=0.002),均匀设计实验验证得到最佳配伍比例为三七皂苷R1∶人参皂苷Rb1∶人参皂苷Rg1∶栀子苷∶京尼平龙胆双糖苷=1∶1∶1∶1∶0。行为学试验显示与模型组小鼠比较,盐酸多奈哌齐组、栀子-三七最优配伍的测试次数和记忆错误次数均显著降低。ROS和Western blot结果显示与模型组比较,盐酸多奈哌齐组、栀子-三七最优配伍可以有效降低ROS的荧光强度和RAGE蛋白的表达。结论:运用均匀设计筛选获得的最优配伍比例可有效改善阿尔茨海默病,其作用机制可能为抑制RAGE-ROS通路的激活发挥抗阿尔茨海默病的作用,为治疗阿尔茨海默病提供了实验依据。

功能性消化不良动物模型的中医证型及其评价指标研究进展

功能性消化不良(FD)作为功能性胃肠病,中医临床通过病症结合的方式进行治疗,将其分为脾虚气滞证、肝胃不和证、脾胃湿热证、脾胃虚寒证、寒热错杂证、肝郁脾虚证、肝郁气滞证等证型。FD动物模型的构建依据证型特定的发病机制来模拟人体症状,检测指标常采用行为学、胃肠动力学及相关蛋白水平等评估模型与FD患者的相似度。符合病症的动物模型是开展药效研究和药效评价的前提和基础,对FD中医证型的造模方法及检测指标进行整理和分析,旨在完善和优化动物模型,为后续的药物研究提供支持。

中药五味药性理论的现代研究进展

五味作为中药药性理论的核心内容,近年来有许多学者从不同方面对中药五味理论进行一系列的研究。由于传统中医药理论与现代药学思维方式和认识途径存在差异,导致人们对于中药五味药性理论的认识不尽相同。从中药五味的源流,哲学思想对五味属性的推演以及四气、归经、升降浮沉、功效与五味的联系对中药五味药性理论的脉络进行梳理,进一步从真实滋味和功效属性两方面对中药五味药性的现代研究进行探讨,通过探究五味的真实滋味的标定及五味物质基础与功效的关联关系,对其进行客观的描述,以期寻求一种更加科学化的现代方法阐明中药五味药性理论。

消痔丸对复方地芬诺酯致小鼠便秘模型的药效评价及作用机制

目的 探究消痔丸对复方地芬诺酯致小鼠便秘模型的药效作用及机制。方法 ICR小鼠随机分为对照组、模型组、溴化甲基纳曲酮(阳性对照,58.5 mg·kg^(-1))组和消痔丸低、中、高剂量(1.17、2.34、4.68 g·kg^(-1))组,连续ig给药7 d,给药同时除对照组外,其余各组按照7.5 mg·kg^(-1) ig复方地芬诺酯混悬液制备小鼠便秘模型。观察小鼠一般情况;末次给药结束后,各实验组禁食不禁水16 h,模型组和各给药组ig给予复方地芬诺酯,30 min后给药组ig含相应受试药的活性炭悬液,对照组、模型组ig活性炭悬液。第1批小鼠观察首次排黑便时间、6 h内排便粒数、6 h和24 h内排便质量及粪便含水率。第2批小鼠检测小肠推进率,酶联免疫吸附实验(ELISA)检测结肠组织和血清中5-羟色胺(5-HT)、P物质(SP)、血管活性肠多肽(VIP)水平变化,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测结肠组织水通道蛋白3(AQP3)、AQP9 mRNA水平,Western blotting法检测AQP3、AQP9蛋白表达水平。结果 与模型组相比,各给药组小鼠粪便干结情况有所好转,排便量均有不同程度的增加,体质量有所增加,精神状态逐渐好转。与模型组相比,各给药组均能显著缩短排首粒黑便时间,提高6 h排便粒数及粪便含水率、6 h及24 h排便质量(P<0.05、0.01、0.001);除消痔丸低剂量组,其余各给药组小鼠24 h粪便含水率均显著增加(P<0.01、0.001);各给药组小肠炭末推进距离及炭末推进率均明显提高(P<0.05、0.01、0.001);各给药组均能显著降低结肠组织中VIP水平(P<0.01、0.001),除消痔丸低剂量组,其余各给药组均能显著提高结肠组织中5-HT、SP水平(P<0.01、0.001);各给药组均能显著增加血清中5-HT、SP水平并降低VIP的表达水平(P<0.05、0.01、0.001);各给药组AQP3蛋白表达量均显著下降(P<0.01、0.001),AQP9蛋白表达量均显著上升(P<0.05、0.01、0.001);各给药组AQP3 mRNA水平均显著下降(P<0.01、0.001),AQP9 mRNA水平均显著上升(P<0.05、0.01、0.001)。结论 消痔丸对复方地芬诺酯诱导的小鼠便秘模型有显著的治疗效果,可以显著缩短便秘小鼠排首粒黑便时间、增加排便粒数并提高粪便含水率、显著促进小肠推进作用,作用机制与调节肠液分泌相关因子5-HT、SP、VIP等的释放以及AQP3、AQP9表达相关。

中成药治疗慢性乙型病毒性肝炎用药规律及核心药材网络药理学预测

目的基于古今医案云平台分析中成药治疗慢性乙型病毒性肝炎的用药规律,并基于网络药学方法探究核心药材组合治疗慢性乙型病毒性肝炎的潜在作用机制,为慢性乙型病毒性肝炎的临床用药提供参考。方法收集药融云数据库中收录的治疗慢性乙型病毒性肝炎中成药,对其所含药味、功能主治等信息进行摘录,经过数据筛选、标准化处理,建立标准化医案数据库,利用古今医案云平台,从中药频次、中药属性、聚类分析、药物关联分析等方面进行数据挖掘,总结慢性乙型病毒性肝炎用药特点,筛选核心药材组合。采用网络药理学方法对核心药材进行靶点预测、蛋白质相互作用(PPI)分析、京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集分析,构建“药材-成分-靶点-通路”网络,预测核心药材作用机制。结果药融云数据库共收载治疗慢性乙型病毒性肝炎中成药114种,除去不同剂型,共计80种,涉及中药材279味,其中用药频次较高的中药有黄芪、丹参、虎杖、当归等15味中药。药性多见于寒、平、微寒、温;药味多属甘、苦、辛味;归于肝、脾、肺、心4经的较多;药物功效以清热解毒占比最高。核心药材组合虎杖-白花蛇舌草-丹参的17个主要活性成分可作用于132个核心靶点,调控包括HIF-1、IL-17、PI3-Akt、TNF、乙型肝炎等信号通路。结论临床中成药治疗慢性乙型病毒性肝炎以疏肝健脾、清热利湿为主,同时兼以活血化瘀、补虚止痛,达到虚实同治的良好效果。核心药材虎杖-白花蛇舌草-丹参通过多个成分干预多个靶点、进而调控多条与慢性乙型病毒性肝炎相关的信号通路来发挥治疗作用。

“伤科要药”三七在骨伤与创伤中的研究进展

三七是临床伤科疾病的常用中药,有散瘀止血、消肿定痛之效,历代中医古籍对其性味归经、功效主治的论述大同小异,现代研究发现三七具有活血、止血、抗炎、免疫调节、抗肿瘤等药理活性,主要活性成分为皂苷类。伤科疾病是指人体因跌打坠堕、扭伤劳损、碰撞闪挫等原因而引起的皮肉、筋骨、脏腑、气血等损伤,主要包括挫伤、创伤、软组织损伤、骨折及内伤等临床常见疾病。通过整理历代本草和现代文献中关于三七“伤科要药”功效的相关记载,对其在骨损伤修复、活血化瘀、止血、抗炎镇痛、伤口愈合等方面的药理作用及机制进行归纳梳理,为其深入开发和临床应用提供参考。

儿泻康贴膜对功能性腹痛幼龄大鼠药效作用及机制研究

目的 研究儿泻康贴膜对功能性腹痛幼龄大鼠的影响,并探讨其疗效机制。方法 将出生1 d的SD大鼠随机分为对照组和模型组,采用母婴分离联合冰水应激的方法建立功能性腹痛大鼠内脏高敏感模型。选取造模成功的大鼠随机分为模型组、丁桂儿脐贴组,儿泻康贴膜(1/24、1/12、1/6贴)组。各组大鼠腹部贴剂给药,连续7 d,对照组、模型组腹部给予空白模拟贴。观察给药后大鼠粪便Bristol分级评分、粪便含水率及腹壁撤退反射(AWR)评分结果;采用酶联免疫吸附实验(ELISA)法检测血清和结肠组织中5-羟色胺(5-HT)、P物质(SP)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的含量;采用实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)测定结肠组织中囊性纤维化跨膜转运调节体(CFTR)、促肾上腺皮质激素释放因子(CRF)m RNA表达水平;Western blotting法检测CFTR、CRF蛋白表达水平。结果 与模型组相比,儿泻康贴膜各剂量组大鼠粪便Bristol评分明显降低,粪便含水量显著减少,不同注水体积下的AWR评分均显著降低,血清和结肠组织中致痛致泻相关因子5-HT、SP、TNF-α的表达均得到显著抑制,结肠组织中CFTR和CRF mRNA和蛋白的相对表达量均显著降低(P<0.05、0.01、0.001)。结论 儿泻康贴膜对功能性腹痛大鼠有显著的治疗效果,其通过调节血清和结肠组织中腹痛腹泻相关因子的含量以及结肠组织中相关蛋白的表达以显著降低大鼠粪便Bristol评分和粪便含水量以及大鼠的内脏敏感性。

类器官在肝脏再生医学中的研究进展

肝脏再生医学可利用功能性肝细胞修复或替代受损的肝组织,肝细胞或肝微组织移植有望作为肝移植的替代治疗方案得到了快速发展,但是再生医学需要有稳定增殖能力及肝细胞特性的细胞。肝脏类器官来源于成体干细胞或多能干细胞,可以在体外大量增殖和长期培养,并保持遗传稳定性,模拟体内器官的结构和功能,为肝脏再生提供了新策略。本文对肝脏类器官以及其在肝脏再生医学中的研究进展进行综述,并探讨其应用潜力及存在的局限性。

人源性肿瘤异种移植模型在胰腺癌研究中的应用

胰腺癌是一种恶性程度极高,发病隐匿,预后极差的恶性肿瘤,目前以化疗为代表的全身综合治疗仍是改善胰腺癌患者术后预后的主要手段。但胰腺癌耐药机制复杂,可选择的化疗方案较多,患者对每种化疗方案的敏感性不同,疗效也不同,因此需要一种临床前模型检测每种化疗药物的有效性,为患者筛选出最合适的药物。人源性肿瘤异种移植(PDX)通过将患者肿瘤组织植入到免疫缺陷鼠体内从而获得个体化肿瘤模型,指导患者临床用药。本文将在回顾胰腺癌PDX模型建立方法的基础上,对PDX模型在胰腺癌治疗领域的应用进展进行综述,旨在为胰腺癌的个体化治疗提供新的方向。

痛风康宁片对高尿酸血症的预防作用及机制研究

目的 采用多种实验模型评价痛风康宁片(TKT)对高尿酸血症的预防作用并研究其作用机制。方法 采用ig酵母膏联合ip氧嗪酸钾法制备大鼠高尿酸血症模型,酵母膏(20 g·kg^(-1))连续ig 7 d,且于ig酵母膏第5天开始给药,设置对照组、模型组和TKT低、中、高(0.58、1.15、2.30 g·kg^(-1))组和苯溴马隆27 mg·kg^(-1)组,对照及模型组给予等容量0.5%CMC-Na,每天ig给药1次,给药第3天(即ig酵母膏第7天),ip注射氧嗪酸钾200 mg·kg^(-1)造模。检测注射氧嗪酸钾后2、4 h的血清尿酸浓度、尿量、尿液中尿酸排出量及肾脏中尿酸盐转运体1(URAT1)、有机阴离子转运体1(OAT1)、OAT3抗体表达,评价TKT对大鼠高尿酸血症的预防作用;采用次黄嘌呤诱导小鼠高尿酸血症模型,设置对照组、模型组和TKT低、中、高剂量(0.83、1.66、3.33 g·kg^(-1))组及苯溴马隆39 mg·kg^(-1)组,每天ig给药1次,连续给药5 d,对照及模型组给予等容量0.5%CMC-Na,检测血尿酸、尿酸酶及黄嘌呤氧化酶(XOD)含量,评价TKT对小鼠高尿酸血症的预防作用;采用大鼠水负荷模型,设置对照组和TKT低、中、高(0.58、1.15、2.30 g·kg^(-1))组及氢氯噻嗪27 mg·kg^(-1)组,每天ig给药1次,连续给药3 d,对照组给予等容量0.5%CMC-Na,通过检测给药后1、2、3、4、5 h的尿量及给药后5 h内总尿量,评价TKT对大鼠的利尿作用。结果 与模型组比较,TKT(0.58、1.15、2.30 g·kg^(-1))能明显降低大鼠血清尿酸浓度(P<0.05、0.01),明显增加尿酸排出量(P<0.05、0.01),明显增加肾脏OAT1的表达(P<0.05、0.01),1.15、2.30 g·kg^(-1)能明显减少肾脏URAT1的表达(P<0.05、 0.01);TKT (1.66、 3.33g·kg^(-1))能明显降低小鼠血清尿酸浓度(P<0.05、 0.01),TKT(0.83、1.66、3.33 g·kg^(-1))能明显增加尿酸酶含量(P<0.05、0.01);TKT(0.58、1.15、2.30 g·kg^(-1))能明显增加给药后不同时间点的尿量(P<0.05、0.01),明显增加给药后5 h总尿量(P<0.05、0.01)。结论 TKT通过促进尿酸分泌、抑制尿酸重吸收及利尿作用,使血清尿酸浓度明显降低、尿尿酸排出量明显增加,显示对实验性高尿酸血症有明显的预防作用。