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试剂条双夹心酶联免疫吸附试验检测日本血吸虫感染者经尿液排泄的循环趋阴极抗原
被引量:
16
1
作者
陆萍
钱宗立
《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》
CSCD
北大核心
1996年第4期253-256,共4页
目的:建立一种检测感染宿主尿内排泄抗原的简易免疫学试验。方法:用经改良的兼具dot-ELISA和酶标板-ELISA优点的试剂条双夹心酶联免疫吸附试验,检测了家兔及人宿主尿样本中的日本血吸虫肠相关趋阴极循环抗原(CCA...
目的:建立一种检测感染宿主尿内排泄抗原的简易免疫学试验。方法:用经改良的兼具dot-ELISA和酶标板-ELISA优点的试剂条双夹心酶联免疫吸附试验,检测了家兔及人宿主尿样本中的日本血吸虫肠相关趋阴极循环抗原(CCA)。结果:10只高感染兔尿样经透析冻干保存达10年,复原后检测均呈强阳性反应,滴度可达512-1,12只经相同处理的正常兔尿,仅1只出现8-1以下的弱反应。58例采自四川省的感染者和60例正常对照者尿液的CCA检测,敏感性和特异性分别为43.1%和96.7%。与板-ELISA比较,检出率相仿而呈现一定的互补效应,互补检出率为58.6%。兔尿样内加入适量捕获单抗,反应强度即出现剂量依赖的竞争抑制,提示了尿内被检测到的靶微粒具有被抗CCA单抗特异地识别的属性。对于采用同一检测系统不同方法的互补检测性也进行了讨论。结论:实验结果不仅显示了试剂条夹心ELISA适合现场应用的诸多优点,也证明用于特异地检测感染宿主尿内排泄抗原的可行性。
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关键词
日本血吸虫
尿抗原
检测
免疫试验
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职称材料
两株识别血吸虫卵相关组分的单克隆抗体靶表位分析
2
作者
钱宗立
陆萍
钱嵘
《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》
CAS
CSCD
北大核心
1994年第2期93-99,共7页
免疫学鉴定两株主要识别卵相关抗原组分的单克隆抗体(2H10,2H1)均属IgM同型,能与日本及曼氏血吸虫可溶性卵抗原(SEA)及其三氯醋酸可溶组分(SEA-TCA)形成趋弱阳极或趋中性沉淀带;与虫卵温育均可形成典型环...
免疫学鉴定两株主要识别卵相关抗原组分的单克隆抗体(2H10,2H1)均属IgM同型,能与日本及曼氏血吸虫可溶性卵抗原(SEA)及其三氯醋酸可溶组分(SEA-TCA)形成趋弱阳极或趋中性沉淀带;与虫卵温育均可形成典型环卵沉淀物;两者IFA反应谱有明显差异,但均能与肝、肠中的虫卵外围构成明显荧染;经纯化并标记长链生物素后均可建立灵敏度达毫微克水平的同相夹心酶联试验检出相应抗原组分,但2H10仅能检出日本血吸虫SEA(SEAj),而2H1则以检出曼氏种SEAm占优。两株单抗的交替异相组合检测,均为阴性,表明两者识别的表位不同。分别经过碘酸钠及三氟醋酸处理SEAj后进行酶联活性测定,显示2H10与2H1所识别的表位均属糖基依赖型,而前者有显著较强的耐氧化性能,进一步佐证了两株单抗识别表位的异源属性。根据理化特性试探了靶组分的液相层析分离,证明2H10与2H1识别的活性基团不为ConA所有效吸附,应用Mono-QFPLC离子交换层析,活性表位相对集中被0.2—0.4mol/L离子强度的NaCl洗脱峰内。SDS-PAGE及免疫印迹试验分析提示了活性组分分子量的不均一性及糖基属性的不可转印特点。
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关键词
血吸虫
单克隆抗体
卵相关抗原
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职称材料
题名
试剂条双夹心酶联免疫吸附试验检测日本血吸虫感染者经尿液排泄的循环趋阴极抗原
被引量:
16
1
作者
陆萍
钱宗立
机构
上海第二医科
大学
寄生虫
学
教研室
荷兰国立莱登大学寄生虫学研究室
出处
《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》
CSCD
北大核心
1996年第4期253-256,共4页
基金
卫生部及欧共体STD-3项目的联合资助
文摘
目的:建立一种检测感染宿主尿内排泄抗原的简易免疫学试验。方法:用经改良的兼具dot-ELISA和酶标板-ELISA优点的试剂条双夹心酶联免疫吸附试验,检测了家兔及人宿主尿样本中的日本血吸虫肠相关趋阴极循环抗原(CCA)。结果:10只高感染兔尿样经透析冻干保存达10年,复原后检测均呈强阳性反应,滴度可达512-1,12只经相同处理的正常兔尿,仅1只出现8-1以下的弱反应。58例采自四川省的感染者和60例正常对照者尿液的CCA检测,敏感性和特异性分别为43.1%和96.7%。与板-ELISA比较,检出率相仿而呈现一定的互补效应,互补检出率为58.6%。兔尿样内加入适量捕获单抗,反应强度即出现剂量依赖的竞争抑制,提示了尿内被检测到的靶微粒具有被抗CCA单抗特异地识别的属性。对于采用同一检测系统不同方法的互补检测性也进行了讨论。结论:实验结果不仅显示了试剂条夹心ELISA适合现场应用的诸多优点,也证明用于特异地检测感染宿主尿内排泄抗原的可行性。
关键词
日本血吸虫
尿抗原
检测
免疫试验
Keywords
Schistosoma japonicum
urine antigen detections
urine CCA
strip reagent immunoassay
分类号
R532.210.4 [医药卫生—内科学]
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职称材料
题名
两株识别血吸虫卵相关组分的单克隆抗体靶表位分析
2
作者
钱宗立
陆萍
钱嵘
机构
上海第二医科
大学
寄生虫
学
教研室
中国科
学
院上海生物化
学
研究
所
荷兰国立莱登大学寄生虫学研究室
出处
《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》
CAS
CSCD
北大核心
1994年第2期93-99,共7页
基金
中国国家自然科学基金
欧洲共同体科学技术发展基金
文摘
免疫学鉴定两株主要识别卵相关抗原组分的单克隆抗体(2H10,2H1)均属IgM同型,能与日本及曼氏血吸虫可溶性卵抗原(SEA)及其三氯醋酸可溶组分(SEA-TCA)形成趋弱阳极或趋中性沉淀带;与虫卵温育均可形成典型环卵沉淀物;两者IFA反应谱有明显差异,但均能与肝、肠中的虫卵外围构成明显荧染;经纯化并标记长链生物素后均可建立灵敏度达毫微克水平的同相夹心酶联试验检出相应抗原组分,但2H10仅能检出日本血吸虫SEA(SEAj),而2H1则以检出曼氏种SEAm占优。两株单抗的交替异相组合检测,均为阴性,表明两者识别的表位不同。分别经过碘酸钠及三氟醋酸处理SEAj后进行酶联活性测定,显示2H10与2H1所识别的表位均属糖基依赖型,而前者有显著较强的耐氧化性能,进一步佐证了两株单抗识别表位的异源属性。根据理化特性试探了靶组分的液相层析分离,证明2H10与2H1识别的活性基团不为ConA所有效吸附,应用Mono-QFPLC离子交换层析,活性表位相对集中被0.2—0.4mol/L离子强度的NaCl洗脱峰内。SDS-PAGE及免疫印迹试验分析提示了活性组分分子量的不均一性及糖基属性的不可转印特点。
关键词
血吸虫
单克隆抗体
卵相关抗原
Keywords
schistosomiasis japonica,epitope serology,monoclonal antibody,circulating antigen,egg associated antigens
分类号
R383.24 [医药卫生—医学寄生虫学]
下载PDF
职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
试剂条双夹心酶联免疫吸附试验检测日本血吸虫感染者经尿液排泄的循环趋阴极抗原
陆萍
钱宗立
《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》
CSCD
北大核心
1996
16
下载PDF
职称材料
2
两株识别血吸虫卵相关组分的单克隆抗体靶表位分析
钱宗立
陆萍
钱嵘
《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》
CAS
CSCD
北大核心
1994
0
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职称材料
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