刺参稚参对蛋白质和脂肪需求量的初步研究

实验设计了粗蛋白水平分别为12%,18%,26%,32%,37%,44%,粗脂肪水平分别为3%,5%,8%,以藻粉、白鱼粉和酪蛋白等为主要原料的刺参实验饲料,用以饲喂平均体质量为0.90 g的刺参(Stichopus japonicus).经过66 d的饲养实验,测定了试验刺参的质量增长率、脏壁比和体成分等指标.结果显示,饲料中粗蛋白、粗脂肪水平对刺参的生长和脏壁比有明显影响.实验刺参在粗蛋白水平为18.21%～24.18%、粗脂肪为5%时获得最大生长,同时获得最低的脏壁比.体成分等指标没有受到饲料中粗蛋白和粗脂肪水平的明显影响.因此可以认为,刺参的最佳蛋白质和脂肪需要量分别为18.21%～24.18%和5%.

水杨酸、乙酰水杨酸对番茄幼苗叶片中PPO和POD的诱导作用

以番茄品种改良美国908和合作906为试验材料,研究了水杨酸(SA)和乙酰水杨酸(ASA)喷雾处理6-7叶期幼苗后,叶片内多酚氧化酶(PPO)和过氧化物酶(POD)活性在120 h内的变化.结果显示:SA和ASA对2个番茄品种的适宜诱导浓度分别为1 mmol/L和1.39 mmol/L;SA和ASA对PPO活性的诱导效果无显著差异,但对POD活性的诱导效果SA极显著强于ASA;合作906的PPO活性增幅显著大于改良美国908,而POD活性增幅却显著小于改良美国908,且合作906对诱导处理反应更敏感.研究表明,SA和ASA能显著提高番茄幼苗叶片的PPO、POD活性,而酶活性变化在品种和诱导剂间有显著差异.

一氧化氮参与调节盐胁迫诱导的玉米幼苗脱落酸积累

以三叶一心期的玉米幼苗为实验材料,研究了盐胁迫下玉米幼苗根尖和叶片中一氧化氮(NO)和脱落酸(ABA)积累之间的关系。结果表明,盐胁迫下玉米幼苗NO和ABA的含量均增加,用NO供体硝普钠(sodiumnitroprusside,SNP)处理时,ABA含量亦增加,且累积的时间较盐胁迫下早。用NO合成的抑制剂L-NAME(Nω-nitro-L-argininemethylesterhydrochloride)和NaN3处理时,可减弱盐胁迫诱导的ABA含量的增加,用NO清除剂cPTIO处理时,这种盐胁迫诱导的ABA增加减少。推测盐胁迫下产生的NO参与调节ABA的积累及逆境下植物的防御反应。

钙离子参与一氧化氮促进盐胁迫下的玉米种子萌发

0.001～1.0 mmol·L^(-1)一氧化氮(NO)供体硝普钠(SNP)均能提高玉米种子的发芽率,缓解盐胁迫下种子萌发的抑制作用,其中0.1 mmol·L^(-1)SNP的效果最佳。用胞外游离Ca^(2+)螯合剂EGTA、质膜Ca^(2+)通道阻断剂LaCl_3和液泡Ca^(2+)释放抑制剂钌红与0.1 mmol·L^(-1) SNP共处理,均能减弱或抵消SNP促进种子萌发的作用。据此推测,钙离子参与SNP促进盐胁迫下玉米种子萌发的信号转导过程。

低温处理对牡丹春节催花及营养类物质变化的影响

连续观察、测定了牡丹春节催花进程中不同低温天数处理对温室外自然低温解除休眠及温室内培养过程中形态及某些生理生化变化的影响,结果显示:低温处理34d后的11月28日温室外牡丹花芽形态及可溶性糖、淀粉、可溶性蛋白、游离氨基酸含量变化显著,11月28日左右是低温处理期间牡丹花芽代谢变化剧烈的时期;处理41d后的12月5日及以后移入温室的植株能够正常开花。以上结果从形态与营养物质变化的角度说明了11月28日左右牡丹花芽开始逐步解除休眠,12月5日花芽已彻底解除休眠,不同低温对牡丹春节催花过程中花芽的发育有着质的作用。

燕山板栗种质资源遗传多样性的RAPD分析

为研究燕山板栗的遗传多样性,采用随机扩增多态DNA(randomamplifiedpolymorphicDNA,RAPD)技术对36份燕山板栗种质进行了分析。分析了燕山板栗的遗传丰富度,并对包括36个燕山板栗品种和8份外来板栗品种在内的44份板栗种质进行聚类分析。结果表明,RAPD能有效地区分品种间的差异,用16个随机引物经PCR扩增共得到132个片段,其中有83个多态性片段,占62.9%;不同遗传位点之间遗传多样度最大可达0.444,最小值为0.096,平均多样度为0.187;UPGMA法聚类,将44份板栗种质聚成4个大的类群,36份燕山板栗可分为3个大的类群,外来种质聚为一类。燕山板栗明显不同于外来品种。在RAPD图谱中,找到了19个品种(类型)的特异性标记和标记组合,可作为品种(类型)分子鉴别的依据。

高等植物对环境胁迫的适应与其胁迫信号的转导(英文)

高等植物适应环境胁迫有多种水平与尺度的生理与生化方式,但其本质却是分子水平的基因时空表达与调控,它又受到胁迫信号转导途径的多重调控与影响。环境胁迫的主要形式是冷害、干旱、盐碱胁迫与UV-B辐射等,而它们又是影响高等植物生长、发育、繁殖等重要过程的生态因子,同时也是作物高效生产必需重视的因素,对其与植物相互作用的分子机理的认识有重要理论意义与实践意义。从细胞与组织和器官水平获得的分子生物学规律,只有应用到个体,群体,及生态系统中才会更有生命力。如何将这些数据资料成为宝贵的永续资源是21世纪植物系统生物学面临的主要挑战之一。主要从农业生态环境角度阐述环境胁迫信号转导的分子生物学作用方式,新进展资料的整合并建立起它们的可能联系及本领域中存在的相关问题和可能的解决途径,为高效的农业生态可持续发展提供分子生物学方面的理论基础。

高温胁迫对小麦幼苗几个生理生化指标的影响

采用人工气候室控温,在大气相对湿度40%的条件下,以22℃为对照,在32,36,40℃的高温胁迫条件下,对烟农19二叶期小麦叶片内叶绿素含量、超氧化物岐化酶总活力、丙二醛含量和可溶性糖含量的变化规律进行了研究。结果表明:随着胁迫处理时间的延长,叶片内叶绿素含量迅速降低,且随胁迫温度的升高,叶绿素降解率增大;超氧化物歧化酶(SOD)活性及膜脂过氧化产物(MDA)含量呈现先上升后下降趋势;可溶性糖含量呈上升趋势,且随胁迫温度的升高,可溶性糖含量升高幅度呈上升趋势。这些变化可能是由于高温胁迫造成细胞内膜系统损害所致。

燕山板栗种质资源AFLP遗传多样性分析

为研究燕山板栗的遗传多样性,用扩增片段长度多态性(amplified fragment length polymorphism,AFLP)技术对44份板栗种质的遗传多样性及遗传距离进行分析,其中36份原产燕山地区的种质中有18份为野生种质和18份为栽培品种,另外8份为原产山东的品种。共检测了384个AFLP位点,有217个是多态性位点,占56.5%,这表明了所检测的板栗材料中存在着明显的遗传多样性。用NTSYS软件对44份板栗种质进行聚类分析。所有材料聚成4个类群,其中燕山地区原产的板栗材料被聚为3个类群,山东起源的被聚类为1个独立的类群。在所分析的44份材料中,遗传距离在0.0292和0.2214之间。燕山板栗和外来板栗存在着明显的差异,本研究结果与本实验室用RAPD技术分析的结果是一致的。结果对这些板栗材料在育种中的应用具有重要指导意义。

夏季遮荫改善大田牡丹叶片光合功能的研究

利用气体交换和叶绿素荧光分析技术,研究大田牡丹叶片在自然光照和夏季遮荫处理下光合作用日变化。结果表明:自然光下夏季牡丹叶片的净光合速率(Pn)明显低于春季,2个生长季节Pn日变化差异明显,即春季的Pn日变化呈“单峰型”曲线,夏季的Pn日变化为“双峰型”曲线,有明显的光合“午休”;羧化效率(CE)变化趋势与Pn相似;表观量子效率(AQY)中午降低,下午逐渐回升;光系统Ⅱ(PSⅡ)最大光化学效率Fv/Fm和最大荧光Fm日变化为倒“单峰型”曲线,中午明显降低;与夏季自然光下相比,夏季遮荫处理(遮光50%)的牡丹叶片Pn、AQY、CE升高;气孔限制值(Ls)和叶温(tl)降低;Fv/Fm和Fm中午下降幅度显著减小。这些结果说明:夏季晴天中午高温、强光下,牡丹叶片PSⅡ反应中心发生了可逆失活,PSⅡ功能下调,光合作用的光抑制明显发生,遮荫可减轻光抑制,改善光合功能以增加光合产物积累。

板栗SSR和RAPD技术体系的建立

主要从板栗DNA提取、PCR条件的优化等环节对SSR和RAPD的反应条件进行了优化。结果表明,采用PVP和β-巯基乙醇联合除酚,用多次洗涤和高盐相结合进行除糖提取高质量板栗基因组DNA,所获得的DNA完整,无降解,分子量在23kb以上,可扩增、可酶切,D260nm/D230nm在2.0以上,D260nm/D280nm为1.8～2.0,产率为40～300μgDNA/g叶组织,完全满足SSR、RAPD、AFLP等分子标记技术分析的需要。采用单因素对PCR反应体系中各个影响因素进行优化,结果表明对PCR结果影响最为明显的是退火温度和Mg2+浓度的变化。对退火温度和Mg2+浓度进行优化,确定RAPD的PCR反应体系Mg2+浓度为2.0mmol/LMgCl2,退火温度38℃;SSR反应体系Mg2+浓度为2.0mmol/L,退火温度56℃。建立了一套完善的适用于板栗的SSR和RAPD分析的稳定技术体系。

花生幼叶组织培养及有效植株再生

以花生品种白沙果成熟种胚发芽7d的幼叶为外植体,对花生体细胞胚胎发生和植株再生进行了研究,并建立了其高效再生体系。将幼叶切成1mm×1mm,接种在添加1～3mg/L2,4-D和1～5mg/LBAP的MS培养基上进行培养,获得了高频率的胚胎发生丛(89%～96%)。将带有胚胎发生丛的愈伤组织分别转移至添加10mg/LBAP或添加3mg/LBAP和1mg/LABA的MS培养基上进行培养,57%～100%的胚胎发生丛产生体细胞胚(简称体胚);当将其进一步转移至添加3mg/LBAP和1mg/LABA或添加BAP(4,10mg/L)的MS培养基上进行培养时,体胚萌发,再生植株。植株再生率最高可达96%。

琼脂糖凝胶中DNA片段的挤压回收法

为了简化琼脂糖凝胶中DNA片段的回收,该文报道一种新的挤压回收法。将含有DNA片段的凝胶块放在折叠的封口膜之间,然后用一小塑料平板将凝胶块中的DNA溶液用力挤出,用移液枪把所有挤压出的DNA溶液放入effendorf管中,然后用常规的苯酚抽提法进行纯化。DNA回收率达到40-60%(w/w)。该方法简单而有效,且回收的DNA能够直接应用于酶切、连接及PCR等各种分子生物学操作。

部分野生与栽培牡丹种质资源亲缘关系的RAPD研究

利用RAPD技术对芍药属牡丹组的 11个野生牡丹类群和 12个栽培牡丹品种间的亲缘关系进行了研究。筛选出的 17个单引物和 1个组合引物共扩增出 191条谱带 ,其中 15 3条表现多态性 (占 80 1% ) ,揭示了牡丹组植物丰富的遗传多样性。对扩增结果进行UPGMA聚类分析表明 :革质花盘亚组的野生类群与栽培品种聚为一类 ,革质花盘亚组各野生种与栽培品种间的亲缘关系都比较近。 5个野生种与受试牡丹品种间的平均遗传距离值为 0 4 8～ 0 5 7,与栽培牡丹间亲缘关系从近到远依次为 :杨山牡丹、四川牡丹、卵叶牡丹、紫斑牡丹和矮牡丹。另外 ,本次RAPD试验扩增出的 2 5个特异标记可用于牡丹组内种间、品种间的分类与鉴定。

柱型苹果叶片的解剖学研究

利用常规的石蜡切片法,对苹果品种舞姿(柱型)、短枝富士、普通富士以及舞姿×短枝富士的实生后代的叶片结构进行解剖比较研究。结果表明,柱型苹果在叶片总厚度和栅栏组织厚度上明显有别于其他2种类型,表现为:柱型>短枝型>普通型;柱型苹果的海绵组织厚度与其他2种类型无显著差异。普通型苹果的叶片栅栏组织细胞一般排列成2层,其栅栏组织与海绵组织的厚度比值小于1;而柱型和短枝型的栅栏组织细胞通常排列成3层或4层,其栅栏组织与海绵组织的比值大于1,而且,随着矮化程度的加强,栅栏组织细胞层数和栅/海比有增加趋势。

碱裂解法提取细菌质粒DNA的改良

碱裂解法是目前最为广泛应用的细菌质粒DNA的提取方法。但该法提取DNA所需时间较长,通常需要2h以上。为了快速提取质粒DNA,对常规碱裂法中溶液Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、RNA酶A及无水乙醇的反应时间由原来的5min、5min、10min、30min、10min分别缩短至5s、1min、5s、10min、5min。这种改良方法极大地缩短了DNA的提取时间,可在30min内完成整个DNA的制备,且制备的DNA可直接应用于进一步的酶切、连接及PCR等各种分子生物学分析。

四个杏鲍菇品种的氨基酸分析与比较

测定了4个杏鲍菇新品种子实体的氨基酸含量,结果表明,4个新品种的子实体中含有丰富的8种人体必需氨基酸、支链氨基酸和带有胍基的精氨酸,而芳香族氨基酸的含量却很低。在测定过程中,由于采用了酸水解,子实体中的色氨酸被破坏,而其余17种氨基酸均被测出,含量极其丰富。尤其是精氨酸、谷氨酸的含量接近于α-酪蛋白、卵蛋白和大豆球蛋白。

抑制性差减杂交(SSH)技术在分离植物差异表达基因中的应用

抑制性差减杂交技术(SSH)是基于抑制PCR作用的cDNA差减杂交,是在转录水平上研究差异基因表达的技术。该技术在一个循环过程中完成差异表达基因丰度的均等化及目标群体和对照群体中相同基因的去除,从而实现差异表达基因的高度富集。一个典型的SSH过程,可在一个差减杂交过程中将稀有基因序列富集上千倍。本文通过详细分析该技术在植物差异表达基因分离中的应用发现:SSH技术主要用于分离组织特异性表达和诱导型表达的基因。首先,SSH技术广泛应用在分离植物发育过程中不同发育阶段和不同组织器官中的组织特异性表达的基因,为揭示植物生长发育过程的分子机理提供了有效手段;另外,在不同植物中,该技术被大量应用于分离各种生物及非生物胁迫条件下诱导表达的抗性相关基因,可以揭示植物抗逆的分子机理。目前,SSH技术已开始应用于分离与次生代谢产物合成相关的基因。SSH技术是分离植物差异表达基因,揭示植物复杂生命现象分子机理的有效方法,将在植物差异表达基因研究中得到更广泛的应用。

苹果制汁新品种鲁加4号浓缩汁贮藏过程中稳定性的影响因素

以苹果制汁新品种鲁加4号[特拉蒙(Telamon)×新红星(Starkrimson)]的浓缩果汁为试材,研究温度、pH值、糖度和果实成熟度对苹果浓缩汁贮藏过程中稳定性的影响。结果表明,温度对苹果浓缩汁贮藏过程中稳定性影响较大,贮藏温度越高,浓缩汁的稳定性越差;糖度对其影响显著,糖度越高,浓缩汁稳定性越差;pH值和果实成熟度对苹果浓缩汁稳定性也有显著性影响,浓缩汁贮藏1～2周期间,pH值与A420值呈正相关,贮藏3～4周期间,pH值与A420值呈负相关。不同采收期苹果果实出汁率、可溶性固形物含量、多酚含量、浓缩汁酸含量变化不同。果实成熟时采收制得的浓缩汁稳定性比较好。

活性氧的信号转导功能

氧气是地球上需氧生物维持生命所必需的，过去人们以为，氧对需氧生物有益无害。研究表明，在需氧生物利用氧气的代谢过程中，会产生一类含有氧的比氧气性质还活泼的物质一活性氧（reactive oxygenspecies，ROS），它包括过氧化氢（H2O2）、超氧阴离子（O2^-）、羟自由基（·OH）等，可与细胞内的生物大分子反应，引发氧化损伤。白内障、肺水肿、糖尿病，肌肉萎缩、营养缺乏、精神病等都与氧化损伤有关。但近年的研究发现，活性氧在细胞的增生、分化、凋亡等的调控中也起重要作用，被认为是一种新的第二信使。