鼻咽癌靶向肽修饰的rES对鼻咽癌裸鼠移植瘤生长的影响

目的探讨鼻咽癌靶向肽(NTP)修饰的重组人血管内皮抑素(rES)对鼻咽癌裸鼠移植瘤生长的影响,为鼻咽癌的靶向治疗提供新思路。方法合成pET-28a-rES与pET-28a-rES-NTP质粒,并通过大肠杆菌表达系统制备rES与rES-NTP重组蛋白,聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和蛋白质免疫印迹(WB)鉴定重组蛋白。建立人鼻咽癌CNE1细胞裸鼠移植瘤模型,酶联免疫吸附试验检测重组蛋白注射后不同时间点在肿瘤组织中的含量。将致瘤成功的裸鼠随机分为对照组、rES组、rES-NTP组3组,3组分别隔日尾静脉注射100μL的生理盐水、rES重组蛋白(15 mg/kg)、rES-NTP重组蛋白(15 mg/kg),共给药4周。测量移植瘤的体积与重量;免疫组织化学染色法检测移植瘤中CD31的表达;荧光定量PCR、WB检测移植瘤中VEGF、HIF-1ɑmRNA与蛋白质的表达。结果rES与rES-NTP重组蛋白的理论分子量分别为22.48 kd、23.33 kd,经SDS-PAGE与WB鉴定正确。尾静脉注射后5 min、30 min、1 h、3 h、6 h时,rES-NTP组在肿瘤组织中的含量均高于rES组(P<0.05),而在注射后12 h时,两组差异无统计学意义(P>0.05)。rES-NTP组移植瘤的体积和重量受到明显的抑制,低于对照组与rES组(P<0.05)。rES-NTP组中的CD31、VEGF、HIF-1ɑ表达量均低于对照组与rES组(P<0.05)。结论rES-NTP重组蛋白具有较好的肿瘤靶向能力,能够有效抑制鼻咽癌裸鼠移植瘤的生长,抑制血管生成,下调VEGF及HIF-1ɑ表达。