荷载达沙替尼的姜黄素-透明质酸自组装胶束的药代动力学

目的 比较荷载达沙替尼(DAS)的透明质酸(HA)-姜黄素(CUR)自组装胶束(THCD-NPs)与混合给药(DAS+CUR)在细胞及大鼠体内的药代动力学。方法 将乳腺癌4T1细胞分别与DAS+CUR、THCD-NPs共孵育4,12,24 h后用蛋白定量法测定4T1细胞的药物摄取率;将DAS+CUR混合物和THCD-NPs通过尾静脉注射进SD大鼠体内,于不同时间点采血,测定大鼠体内DAS和CUR的血药浓度,绘制药时曲线,用WinNolin 8.2药代动力学软件进行统计分析。结果 建立了同步检测血浆中DAS和CUR的HPLC法;相同时间点下THCD-NPs组细胞DAS和CUR的摄取率均大于CUR+DAS组。大鼠体内药动学结果显示:THCD-NPs组DAS和CUR的药时曲线下面积(AUC)、药物平均滞留时间(MRT)、半衰期t1/2等参数均大于DAS+CUR组。结论 THCD-NPs能显著提高DAS和CUR的细胞摄取率,有效增加两种药物在大鼠体内的滞留量,延长体内循环时间,有望提高药物的治疗效果。

HPLC测定可溶微针贴片中熊果苷的含量

目的建立可溶微针贴片中熊果苷的含量测定方法。方法采用高效液相色谱法测定可溶微针贴片中熊果苷的含量;色谱柱:Unitary C_(18)100柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相为水-甲醇(90∶10);流速为1.0 ml/min;柱温为25℃;检测波长为282 nm。结果熊果苷在2.1-105μg/ml范围内与HPLC峰面积呈良好的线性关系(r=1);熊果苷的专属性、日内和日间精密度、稳定性、加样回收率均符合要求。结论 HPLC法测定可溶微针贴片中熊果苷的含量简单、准确,可作为可溶微针贴片中熊果苷含量测定质量控制方法。

3-溴丙酮酸磷脂复合物纳米乳的制备及其对乳腺癌MCF-7细胞的抑制作用

目的制备3-溴丙酮酸(3-bromopyruvate,3-BP)磷脂复合物自乳化释药系统,进行质量评价并考察其对乳腺癌MCF-7细胞的抑制作用。方法以复合率为指标,采用正交实验法,考察3-溴丙酮酸与各单因素对复合率的影响,筛选制备3-溴丙酮酸磷脂复合物(3-BP-PC)的最佳处方,对制备的磷脂复合物进行表征;通过自乳化工艺制备3-溴丙酮酸磷脂复合物纳米乳,对制备得到的3-溴丙酮酸纳米乳进行表征。通过MTT、Calcein AM/PI染色实验和集落克隆形成实验考察3-溴丙酮酸单药、3-溴丙酮酸磷脂复合物和3-溴丙酮酸纳米乳对乳腺癌MCF-7细胞的增殖抑制作用。结果3-BP-PC最佳制备工艺为:以无水乙醇为溶剂,3-溴丙酮酸与大豆磷脂的质量比(g/g)为1∶3,复合温度为40℃,复合时间为2 h,最终复合率为89.66%±1.36%(n=3)。制备得到的3-溴丙酮酸纳米乳呈近球型,且直径大小符合制备要求,与3-溴丙酮酸单药相比,制备得到的3-溴丙酮酸纳米乳对乳腺癌MCF-7细胞抑制作用更强(P<0.05或P<0.01)。结论通过对3-BP的剂型改造,成功制备得到了3-溴丙酮酸纳米乳,且与3-溴丙酮酸单药和3-溴丙酮酸磷脂复合物相比,3-溴丙酮酸纳米乳能够增强对乳腺癌MCF-7细胞增殖抑制作用。

睡眠剥夺对海马区单胺类神经递质、氨基酸代谢及小鼠行为的影响

目的 研究短期睡眠剥夺对小鼠海马脑区代谢的影响。方法 采用改良多平台水环境法建立睡眠剥夺模型。小鼠随机分为3组,每组10只,分别为正常对照组、睡眠剥夺24 h组和睡眠剥夺48 h组。采用旷场实验评价小鼠焦虑样行为,采用糖水偏好实验、强迫游泳和悬尾实验评价小鼠的抑郁样行为;应用高效液相色谱法(high performance liquid chromatography, HPLC)对小鼠海马脑区5-羟色胺(5-HT)、去甲肾上腺素(NE)、多巴胺(DA)、γ-氨基丁酸(GABA)、二羟基苯乙酸(5-DOPAC)、高香草酸(HVA)6种单胺类神经递质及谷氨酸(Glu)、天冬氨酸(Asp)、丝氨酸(Ser)、牛磺酸(Tau)4种氨基酸的含量进行测定;采用免疫荧光染色技术检测每组小鼠海马脑区胶质细胞表达量。主要指标为单胺类神经递质与氨基酸含量的测定。结果 行为学结果表明与对照组相比,睡眠剥夺24 h组糖水偏好率上升,强迫游泳不动时间、悬尾不动时间显著缩短,旷场总运动距离增加;睡眠剥夺48 h组糖水偏好率下降、强迫游泳及悬尾不动时间延长,旷场总运动距离降低。单胺类递质HPLC检测结果表明,与对照组相比,睡眠剥夺24 h组小鼠海马区,DA含量升高(P<0.001)、NE含量升高(P<0.01),GABA含量降低(P<0.05),5-HT、5-DOPAC和HVA含量较对照组差异无统计学意义;睡眠剥夺48 h小鼠海马区5-HT、NE含量降低(P均<0.05),DA含量降低(P<0.01),GABA含量升高(P<0.01),5-DOPAC和HAV差异无统计学意义。氨基酸类递质HPLC检测结果显示,较对照组,睡眠剥夺24 h组Tau及Glu水平均升高(P均<0.05),Asp及Ser差异无统计学意义。睡眠剥夺48 h组海马脑区Glu及Tau含量较睡眠剥夺24 h组下降,差异有统计学意义(P均<0.05)。免疫荧光结果显示,睡眠剥夺24 h组GFAP阳性数较对照组差异无统计学意义,睡眠剥夺48 h组,GFAP阳性数较对照组降低(P<0.05)。结论 睡眠剥夺24 h可能通过激活小鼠海马脑区胶质细胞,上调5-HT、DA、NE含量,同时Glu、Tau水平升高,引起小鼠行为学焦虑样的改变;睡眠剥夺48 h可能通过抑制小鼠海马脑区胶质细胞激活,反向调节海马脑区上述单胺类神经递质、氨基酸,引起小鼠行为学抑郁样的改变。