下调基因PTTG1表达对前列腺癌LNCaP-AI细胞增殖、侵袭和凋亡的影响

目的:探讨下调垂体肿瘤转化基因1(PTTG1)表达对雄激素非依赖性前列腺癌LNCa P-AI细胞增殖、侵袭、凋亡,以及对雄激素拮抗剂敏感性的影响。方法:LNCa P-AI细胞转染靶向PTTG1基因的siRNA,MTT法检测细胞增殖,Transwell法检测细胞侵袭,流式细胞术检测细胞凋亡,Western印迹检测PTTG1、p-Akt、p-ERK等蛋白表达水平,琼脂糖凝胶电泳法检测PTTG1 mRNA表达水平。结果:siRNA有效抑制了PTTG1的表达;下调PTTG1表达有效抑制了LNCa P-AI细胞在去雄激素培养液中的增殖,24、48、72 h抑制率分别为(19.47±2.12)%、(24.01±2.13)%、(48.02±2.22)%,组间比较有显著性差异(P<0.05);降低其侵袭力,Transwell试验显示,对照组、转染24、48、72 h后穿过聚碳酸酯膜细胞个数分别为111.11±13.47、74.67±9.85、56.44±8.66、37.33±6.14,组间比较有显著性差异(P<0.01);siRNA-PTTG1转染LNCa P-AI细胞后,空白对照组、转染24、48、72 h后凋亡率分别为(2.17±0.49)%、(18.32±0.94)%、(19.94±1.30)%、(21.73±1.88)%,各组间比较有显著性差异(P<0.05)。siRNA联合氟他胺组对LNCa P-AI增殖的抑制作用和促凋亡作用显著强于siRNA或者氟他胺组,并呈氟他胺浓度相关性;50 nmol/L氟他胺、siRNA联合50 nmol/L氟他胺对LNCa P-AI的抑制率分别为(27.13±3.52)%、(67.51±5.13)%,两组间比较有显著性差异(P<0.05);凋亡率分别为(3.94±0.48)%、(19.93±1.72)%,两组间比较有显著性差异(P<0.05);100 nmol/L氟他胺、siRNA联合100 nmol/L氟他胺的抑制率分别为(43.72±3.90)%、(73.19±4.78)%,两组间比较有显著性差异(P<0.05);凋亡率分别为(5.33±0.66)%、(23.43±1.76)%,两组间比较有显著性差异(P<0.05)。结论:siRNA下调PTTG1表达能够抑制LNCa P-AI的增殖和侵袭,促进凋亡,提高了LNCa P-AI细胞对雄激素拮抗剂氟他胺的敏感性,抑制PTTG1表达可能会强化雄激素剥夺治疗晚期前列腺癌的作用。

垂体肿瘤转化基因1在雄激素非依赖性前列腺癌发生过程中的表达变化

目的:探讨垂体肿瘤转化基因1(PTTG1)在前列腺癌由激素依赖性转化为激素非依赖性过程中的表达变化。方法:通过在去雄激素培养条件下长期培养雄激素依赖性前列腺癌细胞株LNCa P,建立并验证雄激素非依赖性亚系LNCa P-AI细胞模型,用Western印迹、RT-PCR方法每2周检测在去雄激素培养过程中PTTG1的表达改变。结果:经过3个月培养,成功建立雄激素非依赖性亚系LNCa P-AI细胞模型;在LNCa P细胞中,随着去雄激素培养时间延长,PTTG1的表达水平逐渐升高,基质金属蛋白酶-2(MMP-2)和MMP-9表达有同步升高趋势。结论:PTTG1表达在雄激素非依赖性前列腺癌发生过程中逐渐增强,可能是晚期前列腺癌基因治疗的靶标之一。