血液中KRAS基因状态在非小细胞肺癌骨转移患者中的预后作用

目的:非小细胞肺癌患者组织中KRAS基因状态与治疗疗效及预后相关,检测外周血中循环DNA改变被认为是一种无创的、很有潜力的一种诊断和预测疗效的手段。本研究的目的是探讨血液中KRAS基因状态在非小细胞肺癌骨转移患者中的预后作用。方法:总结2010年12月至2013年4月在我院经姑息性化疗及唑来磷酸治疗的非小细胞肺癌骨转移患者的疗效。检测所有患者外周血中KRAS基因突变情况。分析KRAS突变状况与患者临床特征、疾病控制率(DCR)和无疾病进展生存(PFS)的相关性。结果:总共有77例患者进入本项研究,患者血液中KRAS突变率为24.7%。血液中KRAS突变状况与入组患者临床特征无明显相关性。总DCR为68.8%,KRAS突变组DCR为47.4%,KRAS野生型组DCR为75.9%,差异有统计学意义(P=0.02)。平均PFS为6.399个月,突变型和野生型KRAS患者PFS分别为3.291个月和7.417个月,差异有统计学意义(P=0.000)。经多因素cox风险回归分析证实血液中KRAS基因状态是一个独立的预后因子。结论:外周血中KRAS基因突变可作为非小细胞肺癌骨转移治疗中的一个不良预后因子,可能与唑来磷酸治疗疗效相关。

CD44与p-糖蛋白在食管鳞状上皮细胞癌中表达的相关性及临床意义

目的:探讨CD44、p-糖蛋白(P-gp)的表达在食管癌中相关性及临床意义。方法:应用免疫组织化学法技术检测62例食管鳞状上皮细胞癌患者组织标本中CD44蛋白和P-gp的表达情况,根据检测结果进行统计学分析。结果:62例食管鳞状上皮细胞癌中CD44蛋白表达阳性39例(62.9%),P-gp表达阳性21例(33.9%);食管癌及癌旁正常上皮中CD44蛋白与P-gp表达的差异有统计学意义(P<0.001);CD44蛋白与P-gp表达存在相关性(P=0.035);CD44蛋白的表达与患者的性别年龄无关,与肿瘤的分化程度,浸润深度,淋巴结转移相关;P-gp表达与患者的性别,年龄,分化程度无关,与肿瘤的分期,淋巴结转移相关。在CD44蛋白和P-gp蛋白同时表达的17例患者,淋巴结转移率高达70.1%(12/17),而CD44蛋白和P-gp同时不表达的患者中,只有15.7%(3/19)的病人发生淋巴结转移,两组差别有统计学意义(P<0.001)。结论:CD44与P-gp的联合检测有助于综合判断食管癌的分化程度,转移潜能及临床分期,有望为断肿瘤预后的新指标;CD44与P-gp的表达存在相关性,它们对肿瘤多药耐药的影响值得进一步深入研究。

CD44基因变异体对人乳腺癌细胞株MCF-7的侵袭作用

目的探讨一种新的CD44基因变异体（CD44v17）对人乳腺癌细胞株MCF-7侵袭能力的影响及其机制。方法以人乳腺癌耐阿霉素细胞株（MCF-7／ADR）cDNA为模板，采用聚合酶链反应（PCR）扩增目的片段，将其T．A克隆后，进行测序；构建CIM4v17质粒真核表达载体（pcDNA3．1-CD44v17）；应用脂质体转染法将pcDNA3．1-CD44v17转染入MCF-7细胞中，采用逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）及明胶酶谱法测定转染细胞基质金属蛋白酶（MMP）-2和MMPO的表达；Transwell法检测CD44v17对MCF-7细胞的侵袭力；Western blot检测胞外信号调节蛋白激酶（ERK）及磷酸化蛋白激酶（p-ERK）变化。结果限制性内切酶消化证实，重组载体已正确克隆；DNA序列分析显示，CD44v17包含CD44基因1～4号外显子、16～17号外显子、18号外显子1～205位碱基（GeneBank NO．FJ216964）。MCF-7细胞转染pcDNA3．1-CD44v17后，CD44mRNA表达量和蛋白表达率分别为0．92±0．22和（70．0±2．5）％；透明质酸（HA）处理后，MMP-2mRNA表达量和蛋白活性分别为0．72±0．22和1．14±0．12，MMPOmRNA表达量和蛋白活性分别为0．85±0．19和1．23±0．25，细胞侵袭能力明显增加，侵袭细胞数目为352±33个／视野，而CD44单抗可以阻断这种作用；CD44单抗和促分裂原活化蛋白激酶（MAPK）通路抑制剂预处理转染细胞后，显著阻断了p-ERK的表达。结论在MCF-7／ADR细胞中发现CD44v17，并成功克隆和建立pcDNA3．1-CD44v17；HA与CD44v17受体结合，通过CD44→ras→MAPK信号传导通路调节MMP-2和MMPO的表达，从而增加MCF-7细胞的侵袭力。

晚期肺腺癌外周血胸苷酸合成酶mRNA水平与培美曲塞疗效的关系

目的探讨胸苷酸合成酶基因表达与晚期肺腺癌培美曲塞化疗疗效的关系。方法40例晚期肺腺癌患者接受培美曲塞-顺铂方案化疗,根据胸苷酸合成酶基因表达水平分为低表达组(12例)和高表达组(28例),实时荧光定量PCR检测外周血胸苷酸合成酶mRNA的表达。结果低表达组化疗缓解率显著高于高表达组(58.3%vs.21.4%)(P<0.05);低表达组中位无进展生存时间显著长于高表达组(5.7个月vs.3.6个月)(P<0.05)。结论胸苷酸合成酶mRNA可作为培美曲塞治疗晚期肺腺癌的疗效预测指标。

MicroRNA-182基因在非小细胞肺癌中的表达及其临床意义

目的:探讨MicroRNA-182在非小细胞肺癌中的表达及其临床意义。方法:采用RT-PCR检测30例Ⅰ-Ⅳ期非小细胞肺癌患者的癌及癌旁组织标本中MicroRNA-182表达水平差异,并分析其与患者临床参数之间关系。结果:MicroRNA-182在癌旁组织中相对表达量(23.35±23.10)明显高于癌组织中相对表达量(9.54±9.38),差异有统计学意义(P<0.05);MicroRNA-182表达水平与患者性别、年龄、肿瘤分期及大小、淋巴结转移、病理类型均无关联(P>0.05)。结论:MicroRNA-182基因与非小细胞肺癌发病关系密切,提示MicroRNA-182基因可作为非小细胞肺癌的诊断指标,与患者预后不相关。