LINC01224靶向miR-485-5p调节PAK4表达影响结直肠癌术后复发的研究

目的探究长链非编码RNA(lncRNA)LINC01224靶向miR-485-5p调节p21激活激酶4(PAK4)的表达,继而影响结直肠癌(CRC)患者术后复发的分子机制。方法选取2019年1月至2022年1月承德市中心医院病理科归档的病历资料完整的96例患者的CRC组织,其中54例未复发患者设为未复发组,42例局部复发、转移患者设为复发组。采用实时荧光定量PCR法检测2组CRC组织中LINC01224、miR-485-5p和PAK4的表达水平。将人CRC细胞CACO-2和HCT116各分为3组,分别制备2种细胞的对照组(为正常培养细胞)、NC组(为转染阴性组,转染NC-siRNA慢病毒质粒)和LINC01224下调组(转染LINC01224-siRNA慢病毒质粒)。采用CCK-8法、细胞划痕实验和Transwell实验分别检测各组细胞的增殖、迁移和侵袭能力,荧光素酶报告实验鉴定LINC01224与miR-485-5p、miR-485-5p与PAK4的靶向关系,蛋白质印迹法检测PAK4蛋白的表达水平。结果与未复发组患者相比,复发组患者CRC组织中LINC01224和PAK4表达水平均显著升高,miR-485-5p表达水平显著降低(P均<0.01)。与NC组和对照组细胞相比,LINC01224下调组细胞的增殖、迁移和侵袭能力均显著减弱(P<0.05,P<0.01,P<0.01),而NC组与对照组细胞的差异均无统计学意义(P均>0.05)。荧光素酶报告实验结果显示,LINC01224与miR-485-5p、miR-485-5p与PAK4均存在靶向关系。LINC01224下调组细胞的PAK4蛋白表达水平较NC组和对照组均显著降低(P均<0.01)。结论下调LINC01224的表达可以抑制CRC细胞的增殖、迁移和侵袭,其机制可能是LINC01224靶向miR485-5p调节PAK4的表达,从而影响CRC术后复发。